目的探討采用Cre-LoxP技術(shù)構(gòu)建肝臟特異性HIF-2α基因敲除小鼠模型的可行性。方法由美國Jackson實驗室引進(jìn)loxP標(biāo)記的HIF-2α基因小鼠,采用Cre/loxP重組酶系統(tǒng)和Alb-Cre轉(zhuǎn)基因小鼠,通過多次繁殖雜交,建立肝臟特異性HIF-2α基因敲除小鼠模型。利用PCR技術(shù)鑒別小鼠基因型,并用RT-qPCR檢測小鼠肝臟、脂肪及肌肉組織HIF-2αmRNA水平,同時檢測野生型小鼠和Alb-Cre⁺/HIF-2α^fl/fl的純合子小鼠血糖、血脂以及肝功能水平。3組HIF-2αmRNA數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析和Turkey檢驗。結(jié)果 PCR法成功檢測出子代小鼠基因型,包括Alb-Cre⁺/HIF-2α^fl/fl和Alb-Cre^-/HIF-2α^fl/fl純合子小鼠。肝臟HIF-2α基因敲除鼠肝臟組織HIF-2αmRNA表達(dá)量為0.10±0.02,明顯低于野生型小鼠的1.00±0.10（HSD=-1.87,P<0.05）。結(jié)論采用Cre-Lox... 

【文章來源】：中華肝臟外科手術(shù)學(xué)電子雜志. 2019年03期

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    一、材料
        1. 動物:
        2. 主要試劑:
    二、方法
        1. 肝臟特異性敲除小鼠構(gòu)建:
        2. 小鼠基因型鑒定:
        3. 小鼠HIF-2α基因m RNA水平檢測:
        4. 小鼠腹腔內(nèi)葡萄糖耐量實驗 （intraperitoneal glucose tolerance test, IPGTT） :
        5. 小鼠腹腔內(nèi)胰島素耐量實驗 （intraperitoneal insulin tolerance test, IPITT） :
        6. 小鼠血脂檢測:
        7. 小鼠肝功能檢測:
    三、統(tǒng)計學(xué)方法
結(jié)果
    一、小鼠基因型鑒定結(jié)果
    二、轉(zhuǎn)錄水平驗證肝臟HIF-2α基因被敲除
    三、IPGTT和IPITT結(jié)果
    四、血脂和肝功能
討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Epidemic of non-alcoholic fatty liver disease and hepatocellular carcinoma[J]. Adnan Said,Aiman Ghufran.  World Journal of Clinical Oncology. 2017(06)



本文編號：2956665