單純皰疹病毒（HSV）可導(dǎo)致多種嚴(yán)重疾病，其中Ⅱ型病毒（HSV-2）引起的性傳播疾病發(fā)病率有逐年上升的趨勢(shì)。在抗病毒治療方面，以單克隆抗體為主的生物療法具有顯著療效。但是由于完整的鼠源性McAb分子具有分子量大，組織穿透性差，免疫原性強(qiáng)等缺點(diǎn)，在人體治療中難以阻斷病毒“峽谷”（Canyon）表面的抗原、受體結(jié)合位點(diǎn)，并易引起人抗鼠抗體反應(yīng)。近年興起的基因工程技術(shù)，為鼠抗體的基因工程改建和抗體分子小型化，提供了有力的技術(shù)手段。 本文從分泌高中和活性和高保護(hù)性的抗HSV-2鼠McAb雜交瘤細(xì)胞系CHA9中提取mRNA，以O(shè)ligo（dT）₁₅為引物，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA，以此作模板，用合成的特異性鼠抗體通用引物進(jìn)行PCR，擴(kuò)增出CHA9V_H基因片段，并克隆至PUC18載體中，挑取陽(yáng)性重組克隆，采用雙脫氧鏈終止法進(jìn)行核苷酸序列分析，結(jié)果表明：所克隆的基因全長(zhǎng)360bp，編碼120個(gè)氨基酸，含有維持抗體結(jié)構(gòu)的半胱氨酸，序列內(nèi) 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：104 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
英文縮寫(xiě)詞表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻(xiàn)回顧
    基因工程抗體研究進(jìn)展
        一、基因工程抗體制備的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)
        二、嵌合抗體
        三、重構(gòu)型抗體
        四、單域抗體
        五、單鏈抗體
    噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)研究進(jìn)展
        一、噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)的興起
        二、抗體庫(kù)載體系統(tǒng)的改進(jìn)
        三、“天然”抗體庫(kù)的問(wèn)世
        四、半人工合成抗體庫(kù)的組建
        五、抗體庫(kù)技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)
研究?jī)?nèi)容
    第一部分 CHA9可變區(qū)基因的克隆及序列分析
        材料與方法
        結(jié)果
        討論
    第二部分 CHA9單鏈抗體基因的構(gòu)建
        材料與方法
        結(jié)果
        討論
    第三部分 CHA9單鏈抗體的表達(dá)及初步鑒定
        材料與方法
        結(jié)果
        討論
小結(jié)
致謝
參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]抗HFRSV鼠／人嵌合抗體基因的構(gòu)建[J]. 祝道成,閻巖,汪力亞,徐志凱,尹文,汪美先,姜紹諄,吳興安,李以莞,張擁輝.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 1995(02)
[2]設(shè)計(jì)抗體研究進(jìn)展[J]. 陳文杰,史常志.  國(guó)外醫(yī)學(xué).臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè). 1995(01)
[3]絲狀噬菌體表面呈現(xiàn)技術(shù)[J]. 陳蘇民.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè)). 1994(05)
[4]單克隆抗體技術(shù)新進(jìn)展[J]. 薛生,朱元曉,沈倍奮.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊(cè)). 1993(04)
[5]單克隆抗體治療單純皰疹性角膜炎的臨床觀察[J]. 楊良戶(hù),秦克鋒,喻啟桂,于純智,高謙,王海濤,鄭仁瑞,馬吉獻(xiàn),汪美先,姜紹諄.  眼科研究. 1992(02)
[6]單純皰疹病毒糖蛋白單克隆抗體對(duì)致死性感染BALB/c幼鼠的被動(dòng)保護(hù)作用[J]. 劉雪雁,汪美先,秦克鋒,喻啟桂,黃艷.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 1991(04)
[7]基因重組制備鼠/人嵌合McAb研究進(jìn)展[J]. 程云,汪美先,楊守純.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 1990(03)
[8]抗單純皰疹病毒McAb的研究——Ⅲ.McAb的體外中和作用及動(dòng)物體內(nèi)保護(hù)作用[J]. 高謙,姜紹諄,馬文煜,戴敦穗,汪美先.  中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 1985 (04)



本文編號(hào)：2946156