發(fā)布時間：2020-12-25 10:25

　　皰疹病毒屬中具有代表性的是單純皰疹病毒Ⅰ型與Ⅱ型（HSV Ⅰ／Ⅱ）、愛潑斯坦-馬爾病毒（EBV）、人巨細胞病毒（CMV）、水痘-帶狀皰疹病毒（VZV）和人類皰疹病毒6型（HHV6）這6種病毒，它們是免疫功能低下者臨床常見的病原體，尤其兒童細胞、體液免疫系統(tǒng)不成熟，易導(dǎo)致皰疹類病毒感染。皰疹類病毒感染后其臨床癥狀和體征沒有特異性，而且臨床又缺乏有效的診斷方法。在本研究中，我們在皰疹類病毒較保守的DNA多聚酶基因上自行設(shè)計兩對共用引物，分別對6種病毒進行聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）及限制性內(nèi)切酶片段長度多態(tài)性分析（RFLP），最終建立了PCR-RFLP方法快速檢測病毒DNA的方法，并對臨床標本進行檢測取得較好結(jié)果。 第一部分 皰疹類病毒特異性酶切圖譜的建立 方法：在皰疹類病毒高度同源序列DNA多聚酶基因中設(shè)計兩對通用引物，一對擴增單純皰疹病毒Ⅰ型與Ⅱ型、愛潑斯坦—馬爾病毒、人巨細胞病毒四種病毒，另一對擴增水痘—帶狀皰疹病毒和人類皰疹病毒6型兩種病毒。對標準病毒株HSV Ⅰ（F株）、 2003浙江大學(xué)碩士學(xué)位論... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【圖文】：

種疙疹病毒PCR擴增結(jié)果

而P3、P;這對引物只對vzv、HHv6擴增，不能擴增其他四種瘡疹病毒，同時兩對引物對乙肝病毒、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、新型隱球菌和人類基因組均不能擴增(圖1一2)。二、PCR擴增的敏感性P;、P:這對引物在加二甲基亞颯(DMSO)的PCR反應(yīng)體系中擴增CMV，檢測其靈敏度為0.1龜(圖1一3)，在未加二甲基亞礬(DMSO)的PCR反應(yīng)體系中擴增，其靈敏度為IOfg(圖1一4);p3、p4這對引物在加和未加二甲基亞礬(DMSO)的PcR反應(yīng)體系中擴增Vzv，檢測其靈敏度均為lfg(圖1一5，圖1一6)。圖1一16種疙疹病毒PCR擴增結(jié)果M:分子量對照l:CMVPCR擴增結(jié)果2:HSVIPCR擴增結(jié)果3:HSVllPCR擴增結(jié)果4:EBVPCR擴增結(jié)果5:VZVPCR擴增結(jié)果6:HHV6PCR擴增結(jié)果

2003浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文圖1一26種疙疹病毒PCR擴增的特異性M:分子量對照l:CMVPCR擴增結(jié)果2:HSVIPCR擴增結(jié)果3:HSVllPCR擴增結(jié)果4:EBVPCR擴增結(jié)果5:VZVPCR擴增結(jié)果6:HHV6PCR擴增結(jié)果7:乙肝病毒8:大腸桿菌9:金黃色葡萄球菌10:新型隱球菌11:人類基因組12:空白對照

【參考文獻】：
期刊論文
[1]套式聚合酶鏈反應(yīng)加限制酶分析檢測母嬰巨細胞病毒感染[J]. 尚世強,洪文瀾,石一復(fù),余鐘聲,顧佩寶.  中華兒科雜志. 1997(11)



本文編號：2937469