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建立胸腺瘤型重癥肌無(wú)力裸鼠模型可行性的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-04-07 07:16

  本文關(guān)鍵詞:建立胸腺瘤型重癥肌無(wú)力裸鼠模型可行性的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的初步探索移植的瘤組織在BALB/c裸鼠體內(nèi)存活情況,檢測(cè)裸鼠總補(bǔ)體活性、T淋巴細(xì)胞及亞群,探討胸腺瘤合并重癥肌無(wú)力動(dòng)物模型建立的可行性,為研究胸腺瘤及重癥肌無(wú)力的發(fā)病機(jī)制提供可能的動(dòng)物模型基礎(chǔ)。方法選擇2014年07月至2015年01月天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院心胸外科收治的重癥肌無(wú)力合并胸腺瘤患者6例,術(shù)后病理診斷均為B型胸腺瘤。移植前經(jīng)剪尾取血法分別采集裸鼠外周血用于流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)T淋巴細(xì)胞及其亞群和酶聯(lián)免疫吸附分析法檢測(cè)外周血清總補(bǔ)體水平。在無(wú)菌條件下,獲取瘤組織標(biāo)本,用無(wú)菌手術(shù)刀將其切割成1-2mm3的組織塊,通過(guò)手術(shù)方式將組織塊分別移植到36只BALB/c裸鼠的左側(cè)腎被膜下,移植后90天分別經(jīng)摘眼球法采取外周血進(jìn)行檢測(cè)T淋巴細(xì)胞及其亞群和總補(bǔ)體含量變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后采取頸椎脫臼法處死裸鼠,取出其左側(cè)腎臟,觀察移植瘤組織塊成活情況。應(yīng)用配對(duì)t檢驗(yàn)方法對(duì)瘤組織塊成活的裸鼠移植前后外周血T淋巴細(xì)胞及其亞群和總補(bǔ)體含量變化進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果1、移植的胸腺瘤組織塊在BALB/c裸鼠左側(cè)腎被膜下存活:成活的瘤組織塊位于腎被膜下,結(jié)構(gòu)清晰,無(wú)缺血、壞死,無(wú)明顯增大,HE染色及免疫組化顯示胸腺瘤組織塊在腎被膜下存活,移植成功率61%。2、移植前后BALB/c裸鼠外周血T淋巴細(xì)胞及其亞群的變化:移植后CD3+T淋巴細(xì)胞百分比、CD4+T淋巴細(xì)胞比例與移植前比較明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);CD8+T淋巴細(xì)胞比例移植后與較移植前比較明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3、BALB/c裸鼠外周血清中總補(bǔ)體含量的變化:移植后外周血清中總補(bǔ)體含量與移植前比較降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1、人源性胸腺瘤作為異體移植物能夠在BALB/c裸鼠體內(nèi)長(zhǎng)期存活。2、BALB/c裸鼠有完整的補(bǔ)體系統(tǒng),且能發(fā)揮作用。3、移植的胸腺瘤組織塊對(duì)BALB/c裸鼠外周血T淋巴細(xì)胞及其亞群產(chǎn)生影響,CD3+T淋巴細(xì)胞百分比、CD4+T淋巴細(xì)胞比例升高,CD8+T淋巴細(xì)胞比例降低,T淋巴細(xì)胞亞群比例處于失衡狀態(tài)。說(shuō)明移植的胸腺瘤組織在裸鼠體內(nèi)發(fā)揮部分胸腺功能,影響了裸鼠的細(xì)胞免疫,可能重建了其細(xì)胞免疫,后續(xù)需針對(duì)CD4+T細(xì)胞亞群進(jìn)行研究,了解其亞群細(xì)胞組成比例和功能的發(fā)揮。4、TAMG動(dòng)物模型建立具有一定的可行性,可為研究胸腺瘤和重癥肌無(wú)力的發(fā)病機(jī)制提供動(dòng)物模型基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】:重癥肌無(wú)力 胸腺瘤 T淋巴細(xì)胞亞群 補(bǔ)體 動(dòng)物模型
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R-332;R746.1
【目錄】:
  • 中文摘要4-6
  • Abstract6-10
  • 縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明10-12
  • 前言12-18
  • 研究現(xiàn)狀、成果12-16
  • 研究目的、方法16-18
  • 一、對(duì)象和方法18-26
  • 1.1 研究對(duì)象18
  • 1.1.1 實(shí)驗(yàn)資料18
  • 1.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物18
  • 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器18-20
  • 1.2.1 主要試劑18-19
  • 1.2.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備19-20
  • 1.2.3 主要溶液配制20
  • 1.3 實(shí)驗(yàn)方法20-25
  • 1.3.1 胸腺瘤組織BALB/c裸鼠移植20-21
  • 1.3.2 裸鼠采血及處死21
  • 1.3.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)裸鼠外周血T淋巴細(xì)胞及其亞群21-22
  • 1.3.4 ELISA法檢測(cè)裸鼠外周血清中總補(bǔ)體(CH50)的含量22-23
  • 1.3.5 裸鼠腎組織HE染色及免疫組化23-25
  • 1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法25-26
  • 二、結(jié)果26-33
  • 2.1 胸腺瘤合并重癥肌無(wú)力患者組織塊BALB/c裸鼠移植結(jié)果26-28
  • 2.2 選取瘤組織塊成活裸鼠外周血T淋巴細(xì)胞及其亞群數(shù)據(jù)進(jìn)行分析28-31
  • 2.2.1 裸鼠移植前外周血T淋巴細(xì)胞及其亞群流式細(xì)胞圖28-29
  • 2.2.2 裸鼠移植后外周血T淋巴細(xì)胞及其亞群流式細(xì)胞圖29-30
  • 2.2.3 裸鼠外周血T淋巴細(xì)胞及其亞群移植前、后結(jié)果統(tǒng)計(jì)學(xué)分析30-31
  • 2.3 ELISA法檢測(cè)裸鼠外周血清中總補(bǔ)體(CH50)含量的結(jié)果分析31-33
  • 三、討論33-38
  • 結(jié)論38-39
  • 參考文獻(xiàn)39-45
  • 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明45-46
  • 附錄46-48
  • 綜述 重癥肌無(wú)力相關(guān)動(dòng)物模型的研究現(xiàn)狀48-60
  • 綜述參考文獻(xiàn)55-60
  • 致謝60

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 李倩如;杜英;趙航;高峰;張清勇;李國(guó)喜;胡祥;張欽憲;;MG患者胸腺移植BALB/c nu/nu裸鼠模型的建立及其功能研究[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;2009年04期


  本文關(guān)鍵詞:建立胸腺瘤型重癥肌無(wú)力裸鼠模型可行性的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):289923

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