目的建立測(cè)定9V型肺炎球菌多糖蛋白結(jié)合物原液中游離多糖含量的檢測(cè)方法。方法對(duì)9V型肺炎球菌多糖溶液進(jìn)行不同濃度的脫氧膽酸鈉(NaDOC)酸沉處理,選擇僅沉淀結(jié)合物而不沉淀多糖的最佳處理?xiàng)l件,篩選出所能沉淀蛋白的最大濃度;對(duì)建立的方法進(jìn)行準(zhǔn)確度、精密度、專屬性及線性驗(yàn)證。結(jié)果 9V型肺炎球菌多糖蛋白結(jié)合物原液的最佳NaDOC酸沉處理?xiàng)l件為2%NaDOC-0. 05 mol/L HCl;蛋白濃度低于200μg/m L時(shí),NaDOC酸沉處理?xiàng)l件沉淀蛋白的效果最佳。準(zhǔn)確度試驗(yàn)的回收率在90%～99%之間;實(shí)驗(yàn)內(nèi)及實(shí)驗(yàn)間均具有良好的精密度(CV均小于10%);在10～100μg/mL范圍內(nèi)采用蒽酮硫酸法測(cè)定糖濃度的曲線,線性良好,r~2 0. 998;NaDOC的終濃度在0. 25%以下,對(duì)蒽酮硫酸法檢測(cè)無干擾。結(jié)論 NaDOC酸沉淀法能很好地分離結(jié)合物原液中的結(jié)合物與游離多糖,具有良好的重復(fù)性和準(zhǔn)確性,可用于測(cè)定9V型肺炎球菌多糖蛋白結(jié)合物原液中的游離多糖含量。
【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 多糖及其蛋白結(jié)合物
    1.2 主要試劑及儀器
    1.3 蛋白濃度檢測(cè)
    1.4 多糖濃度檢測(cè)
    1.5 Na DOC含量檢測(cè)
    1.6 游離糖含量檢測(cè)方法的建立
        1.6.1 游離糖分離條件
        1.6.2 重復(fù)性及NaDOC含量測(cè)定
        1.6.3 不同蛋白濃度結(jié)合物的沉淀效果
    1.7 方法的驗(yàn)證
        1.7.1 準(zhǔn)確度
        1.7.2 精密度
        1.7.3 線性
        1.7.4 專屬性
2 結(jié)果
    2.1 方法的建立
        2.1.1 游離糖分離條件
        2.1.2 重復(fù)性及NaDOC含量
        2.1.3 不同蛋白濃度結(jié)合物的沉淀效果
    2.2 方法的驗(yàn)證
        2.2.1 準(zhǔn)確度
        2.2.2 精密度
        2.2.3 線性
        2.2.4 專屬性
3 討論

【參考文獻(xiàn)】

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2 王晶;于旭博;劉方蕾;孔素娟;袁菲;劉愛萍;吳兵;侯亞莉;謝貴林;趙志強(qiáng);;A群腦膜炎球菌多糖結(jié)合物原液中游離糖含量測(cè)定方法的建立及其驗(yàn)證[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2014年10期

3 沈堅(jiān);梁芳;方曼莉;王偉;趙菲瓊;馬相虎;;測(cè)定b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗游離多糖的脫氧膽酸鈉沉淀法的建立[J];國(guó)際生物制品學(xué)雜志;2014年05期

【共引文獻(xiàn)】

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2 侯亞莉;于旭博;劉方蕾;楊英英;吳兵;劉佳;王晶;毛睿;謝貴林;;差異火箭免疫電泳定量檢測(cè)四價(jià)腦膜炎球菌結(jié)合疫苗游離多糖方法的建立及驗(yàn)證[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2015年11期

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2875625