研究背景 β－內(nèi)酰胺類(lèi)藥物是治療革蘭陰性桿菌感染的最主要藥物，革蘭陰性桿菌對(duì)β－內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素耐藥的主要原因是產(chǎn)生了分解β－內(nèi)酰胺環(huán)的β－內(nèi)酰胺酶 。超廣譜β－內(nèi)酰胺酶（Extended-spectrum β-lactamases ESBLs）主要由TEM-1 、TEM-2和SHV-1型廣譜β－內(nèi)酰胺酶經(jīng)幾個(gè)氨基酸點(diǎn)突變而來(lái)，能水解包括第三代頭孢菌素在內(nèi)的β－內(nèi)酰胺類(lèi)藥物，不水解頭霉類(lèi)、碳青霉烯類(lèi)抗生素，其活性可被克拉維酸、舒巴坦、他唑巴坦等酶抑制劑抑制。最近30年來(lái)，由于第三代頭孢菌素的大量使用，產(chǎn) ESBLs的革蘭陰性桿菌越來(lái)越多。到目前為止，檢出的ESBLs有100余種。除了TEM型和SHV型ESBLs外，還有CTX-M型、PER型 、VEB 型等ESBLs。ESBLs主要由肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌產(chǎn)生，但近年來(lái)在其他腸桿菌科細(xì)菌以及非發(fā)酵菌中的ESBLs檢出率也有增長(zhǎng)趨勢(shì)，產(chǎn)ESBLs革蘭陰性桿菌呈多重耐藥性。PER－1型ESBLs是非TEM型和非SHV型ESBLs，最早在銅綠假單胞菌中檢出，且主要在歐洲的地中海國(guó)家。近年來(lái)在沙門(mén)菌屬、不動(dòng)桿菌屬、奇異變形桿菌、肺炎克雷伯菌等細(xì)菌中也檢出PER－1型ESBLs。在韓國(guó)和我國(guó)也有報(bào)道，但PER－1型ESBLs在腸桿菌科的流行情況還不清楚，非常有必要對(duì)產(chǎn)PER-1型ESBLs腸桿菌科細(xì)菌進(jìn)行研究。目的　研究南昌地區(qū)大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和陰溝腸桿菌產(chǎn)ESBLs情況及耐藥譜；檢測(cè)三種細(xì)菌產(chǎn)PER－1型ESBLs的情況以及產(chǎn)PER－1型ESBLs菌株的耐藥特點(diǎn)；調(diào)查是否有產(chǎn)PER－1型ESBLs菌株引起的院內(nèi)感染發(fā)生。方法　收集2002年8月至2003年6月間從南昌地區(qū)四家醫(yī)院分離的167株大腸埃希菌、154株肺炎克雷伯菌和67株陰溝腸桿菌，用頭孢噻肟（Cefotaxime CTX ）或頭孢他啶（Ceftaxidime CAZ）藥敏紙片篩選產(chǎn)ESBLs可疑株；用頭孢噻肟（Cefotaxime CTX）和頭孢噻肟加克拉維酸（Cefotaxime /Clavulanic Acid CTX/CA）或頭孢他啶（Ceftaxidime CAZ）和頭孢他啶加克拉維酸（Ceftaxidime/ Clavulanic Acid CAZ/CA ）雙紙片擴(kuò)散法檢測(cè)ESBLs，；采用 K－B法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)、PCR擴(kuò)增PER-1基因，對(duì)PER-1基因擴(kuò)增陽(yáng)性的菌株用改良三相試驗(yàn)進(jìn)行ESBLs的確證，對(duì)PER-1 WP=4 基因擴(kuò)增陽(yáng)性的PCR原液進(jìn)行DNA測(cè)序；用腸桿菌科菌屬間的重復(fù)序列(entrobacter repetitive intergenic concescus ERIC)作為引物擴(kuò)增PER-1基因陽(yáng)性的菌株進(jìn)行基因分型。結(jié)果 符合 CTX篩選標(biāo)準(zhǔn)的有158株，符合CAZ篩選標(biāo)準(zhǔn)的有94株，兩者都符合的有76株，共176株產(chǎn)ESBLs可疑株。CTX 和CTX/CA雙紙片檢出115株陽(yáng)性，CAZ和 CAZ/CA雙紙片檢出62株陽(yáng)性，兩種雙紙片法都為陽(yáng)性的有51株，共檢出126株產(chǎn)ESBLs菌株。大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和陰溝腸桿菌的ESBLs檢出率分別為30%（50/167）、34%（52/156）和36%（24/67）。產(chǎn)ESBLs株對(duì)氨芐西林、阿齊霉素和克林霉素的耐藥率近乎100%, 對(duì)阿米卡星、環(huán)丙沙星和呋喃妥因的耐藥相對(duì)較低，除2株產(chǎn)ESBLs肺克雷伯菌耐亞胺培南外，其余均為敏感。PER-1基因擴(kuò)增陽(yáng)性共16株，其中大腸埃希菌6株、肺炎克雷伯菌5株、陰溝腸桿菌5株，PER-1基因陽(yáng)性率分別為 3.6%(6/16７)、3.2%(5/156)和9.0%(5/67)，經(jīng)測(cè)序PCR產(chǎn)物片段為579bp，與PAPER-1的594-1172bp之間的579bp符合率為100%。16株P(guān)ER-1陽(yáng)性的菌株改良三相試驗(yàn)結(jié)果為14株單產(chǎn)ESBLs，2株為同時(shí)產(chǎn)ESBLs和AmpC酶，一株為肺炎克雷伯菌，另一株為陰溝腸桿菌。PER-1基因陽(yáng)性株對(duì)頭孢他啶、頭孢噻肟耐藥率為100%，頭孢西丁耐藥率也達(dá)94%，對(duì)阿米卡星和頭孢吡肟的耐藥率較低，分別為56%和31%，對(duì)亞胺培南的耐藥率為0。ERIC2引物擴(kuò)增6株產(chǎn)PER-1型ESBLs大腸埃希菌結(jié)果為5個(gè)基因型，兩株菌的DNA條帶完全相同且表型耐藥譜也相似，而5株陰溝腸桿菌有５個(gè)基因型。結(jié)論　　南昌地區(qū)大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和陰溝腸桿菌的產(chǎn)ESBLs率較高，耐藥性嚴(yán)重。篩選產(chǎn)ESBLs可疑株的最佳紙片為 CTX，表型確證產(chǎn)ESBLs菌株的最佳雙紙片為CTX和 CTX/CA。陰溝腸桿菌的產(chǎn)ESBLs率超過(guò)肺炎克伯菌成為主要產(chǎn)ESBLs菌。PER-1基因已在腸桿菌科細(xì)菌中播散，陰溝腸桿菌為首次檢出PER-1基因。治療產(chǎn)PER-1型ESBLs菌株引起的感染可選用亞胺培南或阿米卡星。改良三維試驗(yàn)可用于檢測(cè)同時(shí)產(chǎn)ESBLs和AmpC酶的菌株。ERIC-PCR是簡(jiǎn)便的、可用于多重耐藥菌株流行病學(xué)調(diào)查的方法。未發(fā)現(xiàn)產(chǎn)PER-1型ESBLs菌株造成的院內(nèi)感染。
【學(xué)位單位】：江西醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2004
【中圖分類(lèi)】：R378
【文章目錄】：
一、 中文摘要
二、 英文摘要
三、 前言
四、 材料與方法
五、 結(jié)果
六、 討論
七、 結(jié)論
八、 參考文獻(xiàn)
九、 致謝
十、 附錄

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 彭道榮,楊?lèi)?ài)龍,徐修禮,孫怡群,于文彬,余妍,楊佩紅;腸桿菌科細(xì)菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶攜帶率及其耐藥性變遷[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2002年03期

2 蔣曉飛,樂(lè)軍,洪秀華,朱月秋,王洪海,倪語(yǔ)星;一株同時(shí)產(chǎn)OXA-23型碳青霉烯水解酶和PER-1型超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的鮑曼不動(dòng)桿菌[J];上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志;2002年05期

3 鐵麗,陳俐麗,潘欽石,李向陽(yáng),張雪青;革蘭陰性桿菌中超廣譜β-內(nèi)酰胺酶和AmpC酶的檢測(cè)與分析[J];溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2003年06期

4 倪語(yǔ)星;質(zhì)粒介導(dǎo)的超廣譜β 內(nèi)酰胺酶的耐藥性問(wèn)題及檢測(cè)[J];中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志;1999年05期

5 朱戌冬,徐英春,吳偉元,王輝,陳民鈞;一種新CTX-M型超廣譜β-內(nèi)酰胺酶及其臨床意義[J];中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2001年04期

6 李向陽(yáng),楊錦紅,陶洪群,繆漢強(qiáng);陰溝腸桿菌外膜蛋白缺失與頭孢西丁耐藥的關(guān)系[J];中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2002年06期

7 侯天文,尹曉琳,陳興,安黎云,張林,龍建國(guó),張健;綠膿假單胞菌超廣譜β內(nèi)酰胺酶基因型分布[J];中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2003年09期

8 余方友;質(zhì)粒介導(dǎo)的Amp C酶研究進(jìn)展[J];中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2003年11期

9 杜廷義,周兵,馬東亮,劉海云,董云華,曾光雄;陰溝腸桿菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)及耐藥性分析[J];中華醫(yī)院感染學(xué)雜志;2001年02期

10 林紅燕,葉曉光,魏衍超;產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶菌耐藥譜3年的變遷[J];中華醫(yī)院感染學(xué)雜志;2003年09期

本文編號(hào)：2873206