本研究觀察粘性放線(xiàn)菌形成的單菌種生物膜的結(jié)構(gòu)以及胞外多糖在生物膜中的分布,比較粘性放線(xiàn)菌在生物膜中和浮游狀態(tài)下合成水溶性胞外多糖和水不溶性胞外多糖量的差異,并探討產(chǎn)生差異的可能原因。 本實(shí)驗(yàn)主要采用微生物厭氧培養(yǎng)技術(shù)將粘性放線(xiàn)菌在玻璃片上形成單菌種生物膜,用熒光染料Fluorescein、BODIPY和Calcofluor進(jìn)行熒光染色,激光共聚焦掃描顯微鏡觀察其形成的生物膜結(jié)構(gòu)和其中胞外多糖的分布。并且將粘性放線(xiàn)菌分別進(jìn)行靜置培養(yǎng)和搖動(dòng)培養(yǎng),以得到黏附狀態(tài)和浮游狀態(tài)下的粘性放線(xiàn)菌,蒽酮法測(cè)量?jī)煞N狀態(tài)下細(xì)菌合成的胞外多糖,比較它們?cè)诓煌菨舛鹊孜锖筒煌囵B(yǎng)時(shí)間所合成胞外多糖的差異。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示玻璃表面粘性放線(xiàn)菌黏附形成致密的生物膜,大量微菌落和溝壑間隙是其所形成生物膜的特征。臨近黏附表面的生物膜基底部位細(xì)菌密度較低,而中部則較致密。生物膜中胞外多糖分布與菌落中的細(xì)菌分布一致,結(jié)果提示粘性放線(xiàn)菌依靠其合成的胞外多糖聚集形成了生物膜。生物膜狀態(tài)下粘性放線(xiàn)菌合成水溶性胞外多糖的數(shù)量與浮游狀態(tài)的比較,隨著培養(yǎng)基中糖濃度的增加變化不大或減少。而生物膜中的粘性放線(xiàn)菌合成水不溶性胞外多糖的數(shù)量與浮游狀態(tài)的比較,在各種糖濃度以及不同培養(yǎng)時(shí)間條件下,生物膜中合成的水不溶性胞外多糖糖量均要多于浮游狀態(tài)合成的糖量,差異有顯著性(P0.05)。 綜上所述粘性放線(xiàn)菌依靠其合成的胞外多糖聚集形成了生物膜,在
【學(xué)位單位】：四川大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2004
【中圖分類(lèi)】：R379
【部分圖文】：

Fluoerseein染色(x200)粘性放線(xiàn)菌菌落圖

圖2BODPIY染色(X600倍)粘性放線(xiàn)菌菌落圖用BoDPIY染色20分鐘，藍(lán)光(504一sllnnr)，油鏡下粘性放線(xiàn)菌形成綠色的致密菌落形態(tài)(白色箭頭處)，菌落間的細(xì)菌分布厚薄不均，形成溝壑間隙(黃色箭頭處)，高低起伏，可能為水和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的通道。

圖3BODPIY染色(x6OO)粘性放線(xiàn)菌菌落斷層掃描照片用BoDIpY染色20分鐘，藍(lán)光(504一51Imn)，約25腳厚的生物膜，油鏡下以.06腳一層，由生物膜表面至薪附載體表面(z軸)進(jìn)行斷層掃描，斷層圖片32張，取第3、6、9、12、15、18、21、24、27張(見(jiàn)上圖)。粘性放線(xiàn)菌形成綠色的致密菌落斷層掃描照片，見(jiàn)
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2870361