本研究以液態(tài)懸浮芯片為技術平臺,選取13種高、低危HPV型別作為研究對象,分別以臨床出現(xiàn)的單獨一型和混合型HPV感染為模型,建立了基因分型的新方法。應用所建立的液態(tài)懸浮芯片分型方法,對尖銳濕疣標本和宮頸糜爛標本進行了HPV基因分型的測定。 本課題以國際公認的HPV質(zhì)粒作為陽性參照標準,設計了基因分型檢測系統(tǒng),并對HPV通用引物和探針進行了篩選,建立了PCR反應體系、雜交反應體系,對影響雜交反應的因素做了較為系統(tǒng)的分析,獲得了最佳反應條件。質(zhì)粒標準品的檢測結果證明該方法可對HPV準確分型。為確立陽性診斷的標準,運用判別分析的統(tǒng)計學方法建立了特征判別的函數(shù)。根據(jù)判別函數(shù),對標準樣本進行回代分析,其檢測的陽性準確率達96.7%以上。與反向雜交方法的對照實驗顯示,兩種方法的符合率為82%。應用本研究方法檢測126例尖銳濕疣標本和100例宮頸糜爛標本,檢出率分別為79%和9%。 與反向雜交方法相比,液態(tài)懸浮芯片易于操作,省時省力,通量和敏感性更高,在臨床上具有更廣的發(fā)展空間。臨床標本結果顯示,該研究對于疾病的篩查和流行病學的預測有重要的意義。
【學位單位】：西北大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2006
【中圖分類】：R373;Q789
【部分圖文】：

圖2液態(tài)懸浮芯片技術原理圖圖3加mnixe儀器照片伽mniex公司研制的微球是用兩種不同顏色的熒光染料(紅色和橙色)在不比例下混合后分別將直徑為5.6產(chǎn)m的聚苯乙烯微球染成為一百種顏色的點陣。據(jù)微球所攜帶的獨特的橙色/紅色熒光配比，通過流式細胞儀時可予以區(qū)分。

液態(tài)芯片則是一種很有市場潛力的新技術。3液態(tài)生物芯片技術.31液態(tài)生物芯片的技術原理液態(tài)生物芯片也稱液態(tài)懸浮芯片網(wǎng)，]el，該技術是一種以微球為基礎的多指標數(shù)據(jù)采集和分析平臺，起源于流式細胞儀。多指標檢測是指在一個簡單的試管中對一份樣品同時進行多種指標的分析。由于流式細胞儀有區(qū)分不同大小和顏色微球的能力，使得這種方法可以用于不同類別微球群的分析。以大小進行區(qū)分的微球允許同時對多種指標進行分析，但是小微球的聚集物與大微球不能很好的區(qū)分開來，限制了這種以大小區(qū)分微球得應用范圍。相比之下，用可以產(chǎn)生兩種不同波長染料對相同大小的微球進行染色，以區(qū)分不同微球的方法得到廣泛采用。

技術路線
【引證文獻】

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1 姚敏杰;基于磁性微粒和熒光微球的DNA檢測方法研究[D];西北大學;2007年

本文編號：2865550