本研究以液態(tài)懸浮芯片為技術(shù)平臺,選取13種高、低危HPV型別作為研究對象,分別以臨床出現(xiàn)的單獨一型和混合型HPV感染為模型,建立了基因分型的新方法。應(yīng)用所建立的液態(tài)懸浮芯片分型方法,對尖銳濕疣標(biāo)本和宮頸糜爛標(biāo)本進行了HPV基因分型的測定。 本課題以國際公認(rèn)的HPV質(zhì)粒作為陽性參照標(biāo)準(zhǔn),設(shè)計了基因分型檢測系統(tǒng),并對HPV通用引物和探針進行了篩選,建立了PCR反應(yīng)體系、雜交反應(yīng)體系,對影響雜交反應(yīng)的因素做了較為系統(tǒng)的分析,獲得了最佳反應(yīng)條件。質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的檢測結(jié)果證明該方法可對HPV準(zhǔn)確分型。為確立陽性診斷的標(biāo)準(zhǔn),運用判別分析的統(tǒng)計學(xué)方法建立了特征判別的函數(shù)。根據(jù)判別函數(shù),對標(biāo)準(zhǔn)樣本進行回代分析,其檢測的陽性準(zhǔn)確率達96.7%以上。與反向雜交方法的對照實驗顯示,兩種方法的符合率為82%。應(yīng)用本研究方法檢測126例尖銳濕疣標(biāo)本和100例宮頸糜爛標(biāo)本,檢出率分別為79%和9%。 與反向雜交方法相比,液態(tài)懸浮芯片易于操作,省時省力,通量和敏感性更高,在臨床上具有更廣的發(fā)展空間。臨床標(biāo)本結(jié)果顯示,該研究對于疾病的篩查和流行病學(xué)的預(yù)測有重要的意義。
【學(xué)位單位】：西北大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2006
【中圖分類】：R373;Q789
【部分圖文】：

圖2液態(tài)懸浮芯片技術(shù)原理圖圖3加mnixe儀器照片伽mniex公司研制的微球是用兩種不同顏色的熒光染料(紅色和橙色)在不比例下混合后分別將直徑為5.6產(chǎn)m的聚苯乙烯微球染成為一百種顏色的點陣。據(jù)微球所攜帶的獨特的橙色/紅色熒光配比，通過流式細(xì)胞儀時可予以區(qū)分。

液態(tài)芯片則是一種很有市場潛力的新技術(shù)。3液態(tài)生物芯片技術(shù).31液態(tài)生物芯片的技術(shù)原理液態(tài)生物芯片也稱液態(tài)懸浮芯片網(wǎng)，]el，該技術(shù)是一種以微球為基礎(chǔ)的多指標(biāo)數(shù)據(jù)采集和分析平臺，起源于流式細(xì)胞儀。多指標(biāo)檢測是指在一個簡單的試管中對一份樣品同時進行多種指標(biāo)的分析。由于流式細(xì)胞儀有區(qū)分不同大小和顏色微球的能力，使得這種方法可以用于不同類別微球群的分析。以大小進行區(qū)分的微球允許同時對多種指標(biāo)進行分析，但是小微球的聚集物與大微球不能很好的區(qū)分開來，限制了這種以大小區(qū)分微球得應(yīng)用范圍。相比之下，用可以產(chǎn)生兩種不同波長染料對相同大小的微球進行染色，以區(qū)分不同微球的方法得到廣泛采用。

技術(shù)路線
【引證文獻】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 姚敏杰;基于磁性微粒和熒光微球的DNA檢測方法研究[D];西北大學(xué);2007年

本文編號：2865550