課題一 遺傳病基因診斷新技術(shù)及中國(guó)人乙型血友病基因診斷的研究 遺傳病的基因診斷和產(chǎn)前診斷對(duì)阻斷遺傳病的逐代傳遞，提高人口素質(zhì)具有重要意義。本研究首先建立了兩項(xiàng)適合大量樣品未知基因突變篩查的新技術(shù)——循環(huán)雙脫氧指紋圖譜法(Cycle-ddF)和熒光指紋圖譜法(FF)。Cycle-ddF將循環(huán)測(cè)序反應(yīng)和SSCP電泳技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)結(jié)合在一起，與原來(lái)的雙脫氧指紋圖譜法(ddF)相比，省去了T7 RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄和AMV逆轉(zhuǎn)錄兩步反應(yīng)，避免了RNA操作，簡(jiǎn)化了步驟，降低了成本并保持了原ddF陽(yáng)性檢出率高及快速直觀的特點(diǎn)。熒光指紋圖譜法(FF)是我們首先發(fā)現(xiàn)DNA突變篩查新思路，利用ABI 373 DNA測(cè)序儀的熒光檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)收集處理系統(tǒng)，精確建立了樣品DNA的熒光指紋圖譜，該圖譜包含了所有樣品DNA序列的所有原始信息，在大量樣品的基因突變篩查時(shí)可以同時(shí)準(zhǔn)確靈敏、直觀高效地檢出所有樣品中的突變。較自動(dòng)測(cè)序儀檢測(cè)DNA突變?cè)瓉?lái)的程序，大大簡(jiǎn)化了操作，節(jié)省了時(shí)間，提高了工效。 以此兩項(xiàng)技術(shù)為核心，我們建立了乙型血友病基因診斷技術(shù)新體系。十三個(gè)中國(guó)人重型乙型血友病家系的FIX基因突變被檢出，共發(fā)現(xiàn)2例單堿基缺失，1例兩堿基缺失，1例三堿基缺失和7例單堿基替換。其中6例為國(guó)內(nèi)外首次報(bào)道的新突變類型。本文從分子水平上對(duì)這十三例重型血友病的發(fā)病機(jī)理進(jìn)行了詳細(xì)探討，并以FIX基因?yàn)閳?bào)告基因就中國(guó)人胚系突變模式的熱點(diǎn)問(wèn)題進(jìn)行了討論。_ 課題二 苯丙氨酸脫氨酶cDNA在乳酸乳球菌中的克隆表達(dá)及其在經(jīng)典型苯丙酮尿癥基因治療新途徑探索中的初步應(yīng)用 經(jīng)典型苯丙酮尿癥(Classical PKU)是一種先天性苯丙氨酸代謝缺陷病，屬常染色體隱性遺傳，由笨丙氨酸羥化酶(PAH)基因突
【學(xué)位單位】：中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：1997
【中圖分類】：R394
【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
[課題一]
    前言
    材料和方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
[課題二]
    引言
    第一部分
    第二部分
        Ⅰ
        Ⅱ
        Ⅲ
    第三部分
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
[綜述]
    綜述Ⅰ
    綜述Ⅱ
致謝

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

1 劉敬忠，向華，張紀(jì)平，毛燕玲，趙離鐘，張鵬，朱章菱，翁心植，盧圣棟;篩查基因突變的新技術(shù)──循環(huán)雙脫氧指紋圖譜法及其應(yīng)用[J];高技術(shù)通訊;1996年01期

2 向華;癌癥是否以扼殺個(gè)體的方式保全物種？[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).遺傳學(xué)分冊(cè);1996年03期

3 袁杰利，金曉艷，代軍，閻曉慧;雙歧桿菌微囊化的初步研究[J];中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志;1994年02期

4 劉敬忠，向華，劉亮，周航，張紀(jì)平，石奇珍，陳懷華，曾淑燕;應(yīng)用基因擴(kuò)增轉(zhuǎn)錄測(cè)序技術(shù)診斷乙型血友病[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;1995年10期

5 向華,劉敬忠,周艷,盧大儒,邱信芳,薛京倫,趙離鐘,胡維;乙型血友病患者的基因診斷[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;1997年04期

6 劉敬忠,吳冠蕓,高慶生,姜哲,梁植權(quán),羅會(huì)元,李琪,龍桂芳,張錦,鄧兵,王榮新,黃有文,曾瑞萍;中國(guó)廣西、廣東、四川三省區(qū)β-地中海貧血基因突變類型及產(chǎn)前基因診斷研究[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào);1990年02期

本文編號(hào)：2857747