腦缺血后的再灌注往往引起比缺血本身更為嚴(yán)重的損害。這是因?yàn)槿芩ㄖ委熝貉h(huán)再通后，引起微血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹、壞死，同時(shí)內(nèi)皮細(xì)胞功能失調(diào)，導(dǎo)致微血管結(jié)構(gòu)、功能紊亂，破壞了血管結(jié)構(gòu)的完整性，加重了腦血流供應(yīng)障礙，進(jìn)一步損害正常腦神經(jīng)功能。所以研究腦缺血再灌注過程中微血管超微結(jié)構(gòu)特征和微血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)、功能變化與再灌注損傷的關(guān)系尤為重要。本實(shí)驗(yàn)采用三血管阻斷法，利用大鼠全腦缺血30min再灌注模型檢測(cè)再灌注后不同時(shí)間點(diǎn)血管完整性標(biāo)記成份、內(nèi)皮細(xì)胞促凝因子的表達(dá)變化和微血管超微結(jié)構(gòu)的變化，試圖闡明腦缺血再灌注損傷微血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)、功能變化特點(diǎn)及微血管結(jié)構(gòu)損害變化特征，為缺血性腦血管病的治療提供依據(jù)和方法。 本實(shí)驗(yàn)研究將健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為缺血再灌注組和假手術(shù)組，采用三血管阻塞法建立大鼠全腦缺血再灌注模型，用免疫組化SABC法檢測(cè)大鼠在全腦缺血30min再灌注1h、3h、6h、12h、24h、48h、72h時(shí)FⅧ相關(guān)抗原的表達(dá)，以標(biāo)記微血管內(nèi)皮細(xì)胞在腦缺血再灌注過程中損傷變化；同時(shí)用原位雜交法測(cè)定不同再灌注時(shí)間點(diǎn)PAI-1mRNA的表達(dá)水平，以觀察腦缺血再灌注后微血管內(nèi)皮細(xì)胞纖溶活性的變化規(guī)律；同時(shí)利用多聚樹脂預(yù)聚體灌注并選微血管鑄型團(tuán)行掃描電鏡觀察，探討腦缺血再灌注后微血管變化特點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1、微血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷實(shí)驗(yàn)結(jié)果：FⅧ相關(guān)抗原主要在微血管內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)，在缺血再灌注1h開始下降(P＜0.05，腦缺血再灌注組與假手術(shù)組相比)，到24～48h達(dá)最低(P＜0.01)，72h表達(dá)又開始恢復(fù)；腦缺血再灌注組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的差異具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；假手術(shù)組各個(gè) 第，罕’ ＾碌’＊磅伍．＾ 一 時(shí)間點(diǎn)相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0刀5）。 2、PAI－IInRNA原位雜交試驗(yàn)結(jié)果：PAI－lmRNA假手術(shù)組可見少量 表達(dá)，腦缺血再灌注lh表達(dá)上調(diào)（與假手術(shù)組相比P＜005），1224h達(dá)高 峰后開始下降（與假手術(shù)組相比P＜0．01人72h表達(dá)仍高于假手術(shù)組（P＜ 0．05）。 3、皮層微血管超微結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果：腦缺血再灌注lh血管鑄型掃 描電鏡下觀察即見毛細(xì)血管痙攣、狹窄、直徑變細(xì)；3—48h見毛細(xì)血管管壁 不全或完全斷裂，出現(xiàn)無血管區(qū)。 綜上所述，結(jié)論如下八1）腦缺血再灌注早期就存在微血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷， 進(jìn)而破壞了微血管的完整性，導(dǎo)致BBB結(jié)構(gòu)受損，使得腦神經(jīng)元功能受損， 并進(jìn)一步加重缺血區(qū)神經(jīng)元的損傷。但在腦缺血再灌注超早期組織本身并未 完全出現(xiàn)器質(zhì)性不可逆變化，相關(guān)損傷病理狀態(tài)存在恢復(fù)的可能。G）腦缺血 再灌注可致腦皮層微血管結(jié)構(gòu)損害，由此引起的腦微循環(huán)異常是腦缺血再灌 注重要的病理生理變化，改善微循環(huán)將有利于腦缺血再灌注的臨床治療。（3） 缺血再灌注后內(nèi)皮細(xì)胞PAI4 高表達(dá)提示內(nèi)皮細(xì)胞在缺血再灌注早 期表現(xiàn)為促凝活性，可誘發(fā)血管內(nèi)微血栓形成，加重腦微循環(huán)障礙，使得再 灌注后的低灌注進(jìn)一步加重。
【學(xué)位單位】：中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2003
【中圖分類】：R361
【部分圖文】：

1.2顯微鏡下觀察(HE染色):再灌注3一6h皮層細(xì)胞水腫，但胞膜與周圍分界尚明顯，胞漿淡紅色，部分胞核呈三角形(附圖1);再灌注12~24h開始皮層小血管周圍出現(xiàn)空暈、為水腫液，腦組織疏松(附圖2，3):再灌注72h皮層細(xì)胞明顯水腫，部分核固縮、溶解、核膜結(jié)構(gòu)不清，腦組織呈網(wǎng)狀，見少量泡沫細(xì)胞出現(xiàn)，為腦組織壞死表現(xiàn)(附圖4)。對(duì)照組形態(tài)、結(jié)構(gòu)正常(附圖5)圖1:腦I一R6h頂葉皮層(RE40x10)

腦I-R12h頂葉皮層(HE40X10)

腦組織疏松(附圖2，3):再灌注72h皮層細(xì)胞明顯水腫，部分核固縮、溶解、核膜結(jié)構(gòu)不清，腦組織呈網(wǎng)狀，見少量泡沫細(xì)胞出現(xiàn)，為腦組織壞死表現(xiàn)(附圖4)。對(duì)照組形態(tài)、結(jié)構(gòu)正常(附圖5)圖1:腦I一R6h頂葉皮層(RE40x10)
【參考文獻(xiàn)】

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3 王有偉,陳以慈;人大腦內(nèi)部微血管構(gòu)筑——組織化學(xué)顯示法研究[J];解剖學(xué)雜志;1988年03期

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本文編號(hào)：2843693