骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向肝樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化的體外研究
發(fā)布時(shí)間:2020-10-16 09:02
目的:利用小鼠2/3肝部分切除術(shù)(PH)后36小時(shí)再生肝組織浸出液及肝細(xì)胞生長因子(HGF)、表皮細(xì)胞生長因子(EGF),探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外定向肝樣細(xì)胞分化的誘導(dǎo)條件,為肝組織工程的構(gòu)建開辟種子細(xì)胞來源的新途徑。 方法:采用Ficoll梯度離心和貼壁分離方法,獲得昆明(I(M)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,在基礎(chǔ)培養(yǎng)液中,分別應(yīng)用2/3肝部分切除術(shù)(PH)后36小時(shí)小鼠再生肝組織浸出液、肝細(xì)胞生長因子(HGF)和表皮細(xì)胞生長因子(EGF)、以及三者聯(lián)合刺激誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)向肝樣細(xì)胞分化。在倒置顯微鏡下動態(tài)觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)的改變,應(yīng)用免疫熒光法(immunofluorescence)進(jìn)行肝細(xì)胞特異性標(biāo)志物CK8、CK18和白蛋白檢測以鑒定細(xì)胞性質(zhì)。 結(jié)果:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)經(jīng)2/3肝部分切除術(shù)(PH)后36小時(shí)小鼠再生肝組織浸出液、肝細(xì)胞生長因子(HGF)和表皮細(xì)胞生長因子(EGF)、以及三者聯(lián)合刺激誘導(dǎo)后變?yōu)楦渭?xì)胞樣圓形,1-2周后免疫熒光染色可見分化后細(xì)胞表達(dá)肝細(xì)胞標(biāo)志物CK8、CK18和白蛋白,浸出液與兩種細(xì)胞生長因子聯(lián)合誘導(dǎo)組表達(dá)升高。 結(jié)論:研究結(jié)果表明,在體外利用小鼠2/3肝部分切除術(shù)(PH)后36小時(shí)再生肝組織浸出液、肝細(xì)胞生長因子(HGF)和表皮細(xì)胞生長因子(EGF)、以及三者聯(lián)合均可誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向肝樣細(xì)胞方向分化。再生肝組織浸出液與EGF、HGF聯(lián)合定向誘導(dǎo)有協(xié)同誘導(dǎo)作用。為肝組織工程的構(gòu)建開辟了種子細(xì)胞來源的新途徑。
【學(xué)位單位】:中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2004
【中圖分類】:R329.2
【文章目錄】:
英文縮寫
中文摘要
英文摘要
正文
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
致謝
附圖
【引證文獻(xiàn)】
本文編號:2843052
【學(xué)位單位】:中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2004
【中圖分類】:R329.2
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正文
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
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文獻(xiàn)綜述
致謝
附圖
【引證文獻(xiàn)】
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1 黃榮;山羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性、冷凍保存及基因轉(zhuǎn)染研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年
本文編號:2843052
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