目的：1) 通過酸性胃蛋白酶消化豬帶絳蟲孕節(jié)建立收集蟲卵的新方法； 2) 應(yīng)用新方法了解豬帶絳蟲成熟孕節(jié)內(nèi)蟲卵數(shù)量； 3) 探索次氯酸鈉法孵化帶絳蟲卵的孵化規(guī)律和適宜孵化條件； 4) 研究一氧化氮(NO)對豬帶絳蟲六鉤蚴殺傷作用。 方法：1) 以1％酸性胃蛋白酶分別在普通和振蕩條件下消化完整和剪碎孕節(jié)，觀察不同條件下消化孕節(jié)收集蟲卵時(shí)間；分別對以物理法收集的蟲卵及以酸性胃蛋白酶法消化物理法剩余的孕節(jié)殘片收集的蟲卵計(jì)數(shù)，比較酸性胃蛋白酶法與物理法在收集蟲卵的數(shù)量上的差異；觀察酸性胃蛋白酶法和物理法收集的蟲卵以次氯酸鈉法孵化后蟲卵孵化率及六鉤蚴存活率；觀察1％酸性胃蛋白酶消化孕節(jié)40min和120min收集的蟲卵以次氯酸鈉法孵化后蟲卵孵化率及六鉤蚴存活率； 2) 對10條豬帶絳蟲的50片成熟孕節(jié)以酸性胃蛋白酶法消化，收集蟲卵，以細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)： 3) 以7種濃度的次氯酸鈉溶液孵化帶絳蟲卵，觀察不同時(shí)間的蟲卵孵化率和六鉤蚴存活率；同時(shí)觀察1.0％次氯酸鈉溶液在3個(gè)不同孵化時(shí)間的孵化率和六鉤蚴存活率；并觀察1.0％次氯酸鈉溶液孵化帶絳蟲卵的過程； 4) 以LPS誘導(dǎo)離體的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞，使其產(chǎn)生NO；加入豬帶絳蟲六鉤蚴，測定48h內(nèi)六鉤蚴的死亡率。同時(shí)，為進(jìn)一步證實(shí)NO對六鉤蚴的殺傷作用，分別用誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)的抑制劑地塞米松(Dexamethasone，DEX)和左旋硝基精氨酸(Nω -nitro-L-arginine，L-NNA)抑制NO產(chǎn)生，與未加抑制劑組比較，觀察六鉤蚴死亡率的變化。 安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 結(jié)果:1)l%酸性胃蛋白酶振蕩條件下消化孕一節(jié)收集蟲卵時(shí)問少于普通條件下聽 需時(shí)間(P0.01)，消化剪碎孕節(jié)時(shí)間少于消化完整孕節(jié)時(shí)間(P001);酸性胃 蛋白酶法收集蟲卵的數(shù)址較物理法高6%;酸性胃蛋}‘」酶法和物理法收集的蟲卵 以次氯酸鈉法孵化其孵化率及存活率無差異(P0.05);1%酸性胃蛋白酶消化孕 節(jié)40min和1 20而n收集的蟲卵以次氯酸鈉法孵化后孵化率及蟲卵存活率無差異 (P0.05); 2)豬帶絳蟲姆節(jié)成熟孕竹內(nèi)蟲卵數(shù)ht不等，址少為550個(gè)，址多為172500 個(gè)，平均為26891個(gè);不同蟲體間孕節(jié)內(nèi)蟲卵數(shù)的差異較同一蟲體戶lJ的差異顯著; 3)以不同濃度次氯酸鈉溶液孵化帶絳蟲卵，結(jié)果在一定濃度范川內(nèi)，孵 化率隨孵化時(shí)間而升高，但過長的時(shí)間會導(dǎo)致六鉤蝴存活率下降。達(dá)到最高孵化 率的孵化時(shí)間隨次氯酸鈉溶液升高而縮短，但較高濃度下六鉤坳存活率下降，高 濃度則蟲卵迅速完全崩解。在0.4%一1 .0%的濃度，孵化時(shí)問為3一6而n時(shí)，蟲卵 孵化率和六鉤坳存活率均較高;對孵化過程的鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，次認(rèn)酸鈉法通過濟(jì) 解胚膜，致六鉤坳逸出; 4)LPS可有效誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生NO，2.0 x 105巨I噬細(xì)胞產(chǎn)二生的NO濃度 為119.64(X)土5.1154卜mol/L，該濃度的殺蟲率為79.83%。)J 11人J印下1川齊11 DXS和L- NNA后，巨噬細(xì)胞的NO產(chǎn)量均明顯降低，J一冬殺蟲率也明顯降低。 結(jié)論:l)成功地建立了較為適川的新的豬帶絳蟲蟲卵收集方法—酸性}‘{蛋白 酶法; 2)豬帶絳蟲成熟孕節(jié)內(nèi)蟲卵數(shù)量不等，可有口懸殊的差別，較既滾11的文獻(xiàn) 有新的發(fā)現(xiàn); 3)次氯酸鈉溶液孵化帶絳蟲卵的孵化率與孵化時(shí)問呈正相關(guān)關(guān)系，孵化 時(shí)問與孵化川次縱酸鈉濟(jì)液濃度’.飛負(fù)相關(guān)關(guān)系;較為適介的條件為04伏一!，O伏的濃 度，孵化時(shí)間為3一6min;次氯酸鈉法孵化帶絳蟲卵的本質(zhì)是破壞溶解r!1了:膜，使 六鉤坳得以逸出; 4)寧舌化j月一噬細(xì)胞)卉二‘l幾的NO對豬·}}夢絳蟲六鉤蝴有殺傷作川
【學(xué)位單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2003
【中圖分類】：R383
【文章目錄】：
一、 中文摘要
二、 英文摘要
三、 前言
四、 材料與方法
    實(shí)驗(yàn)材料
    實(shí)驗(yàn)方法
        豬帶絳蟲蟲卵收集、孵化方法研究
        一氧化氮對豬帶絳蟲六鉤蚴細(xì)胞毒作用
五、 結(jié)果
六、 討論
七、 結(jié)論
八、 參考文獻(xiàn)
九、 附錄
十、 致謝
十一、 綜述

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本文編號：2842244