同源框基因(homeobox gene)在脊椎動(dòng)物胚胎發(fā)育中,具有控制體節(jié)特征和確定胚胎前后分化關(guān)系等作用。同源框基因是一類控制胚胎發(fā)育和細(xì)胞分化的調(diào)節(jié)基因,其表達(dá)的蛋白質(zhì)為同源域蛋白,是一類轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子。這類基因中都存在一個(gè)由183個(gè)堿基對(duì)(bp)組成的、高度保守的同源框(homeobox)序列。HOX基因是同源框基因中的一大類,它們表達(dá)的蛋白產(chǎn)物,參與調(diào)節(jié)胚胎發(fā)育和細(xì)胞分化。HOXA11基因是HOX基因家族中的一員,主要參與子宮形態(tài)的發(fā)生和發(fā)育的調(diào)控。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),同源框基因HOXA11在人子宮內(nèi)膜的發(fā)育及孕卵著床過(guò)程中起著重要作用,而且在人子宮內(nèi)膜中的表達(dá)呈周期性變化。 卵巢性激素與HOXA11基因表達(dá)的關(guān)系是近年來(lái)HOX基因在生殖領(lǐng)域中的研究熱點(diǎn)。目前認(rèn)為HOX基因是性激素對(duì)子宮調(diào)節(jié)鏈中的重要介導(dǎo)基因,雌、孕激素對(duì)內(nèi)膜的多種調(diào)節(jié)作用主要通過(guò)HOX基因介導(dǎo)完成;HOX基因的異常表達(dá)與多種婦科疾病(不孕、流產(chǎn)、內(nèi)膜異位及腫瘤等)相關(guān)。因此,闡明HOX基因在子宮內(nèi)膜中的表達(dá)規(guī)律,以及卵巢激素對(duì)其表達(dá)的調(diào)控機(jī)制具有非常重要意義。已有的研究表明:在體內(nèi),孕激素對(duì)內(nèi)膜腺上皮HOXA11基因的表達(dá)起負(fù)調(diào)控作用;而體外研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)上皮細(xì)胞與間質(zhì)細(xì)胞分離培養(yǎng)時(shí),孕激素并不能使上皮細(xì)胞HOXA11基因表達(dá)量下降,而是使其表達(dá)量增加。孕激素的作用效應(yīng)大多通過(guò)孕酮受體(Progesteron receptor, PR)介導(dǎo)產(chǎn)生;RU486 WP=5 是一種孕酮拮抗劑,其與PR有較強(qiáng)的親和力,通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性地與PR結(jié)合而阻止孕酮的生物效應(yīng)。 本研究目的是通過(guò)體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),用半定量RT—PCR方法,研究孕激素對(duì)內(nèi)膜腺上皮HOXA11基因表達(dá)的影響,尤其是內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞在其中所起的作用,進(jìn)一步探討孕激素對(duì)內(nèi)膜腺上皮HOXA11基因表達(dá)負(fù)調(diào)控作用的機(jī)制。結(jié)果顯示:當(dāng)內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞中含有30㳠經(jīng)孕激素處理的間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液時(shí),加入孕激素或孕雌激素后第4小時(shí),其HOXA11 基因表達(dá)量有下降趨勢(shì);第24小時(shí),腺上皮細(xì)胞HOXA11 基因表達(dá)量下降明顯;而用RU486預(yù)處理后再加入孕激素或雌孕激素,腺上皮細(xì)胞HOXA11基因表達(dá)量與對(duì)照組無(wú)差異;當(dāng)上皮細(xì)胞中含有30㳠經(jīng)RU486預(yù)處理后,再加入孕激素處理的間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液時(shí),孕激素或孕雌激素對(duì)內(nèi)膜腺上皮HOXA11表達(dá)的負(fù)調(diào)控作用在第4小時(shí)消失;第24小時(shí),轉(zhuǎn)為正調(diào)控(HOXA11 基因表達(dá)量增加)。該組上皮細(xì)胞用RU486預(yù)處理后,再加入孕激素或孕雌激素時(shí),腺上皮細(xì)胞HOXA11基因表達(dá)量與對(duì)照組相比無(wú)差異。 上述結(jié)果提示,孕激素對(duì)內(nèi)膜腺上皮HOXA11基因的負(fù)調(diào)控作用需要間質(zhì)細(xì)胞參與,而且是間質(zhì)細(xì)胞和內(nèi)膜腺上皮中的PR共同介導(dǎo)完成這一負(fù)調(diào)控作用。目前已知,HOX基因的異常表達(dá)與多種婦科疾病(不孕、流產(chǎn)、內(nèi)膜異位及腫瘤等)相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)的這些結(jié)果為全面揭示卵巢激素對(duì)HOXA11基因的調(diào)節(jié)作用奠定研究基礎(chǔ),為從基因水平調(diào)節(jié)人類生育以及診治人類生殖性疾病提供依據(jù)。
【學(xué)位單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2004
【中圖分類】：R346
【部分圖文】：

間2P組、間2PE組、間2RuP組和間2RMP2P2ERUP2RUP2ECP2CP3

圖 7、間 1P 組和間 1PE 組在激素處理培養(yǎng)至第量與對(duì)照組相比明顯減少，孕激素組（P1）減組 HOXA11 表達(dá)量與對(duì)照組相比無(wú)明顯變化。0.00.51.01.52.02.51 2 3 標(biāo)OXA1／內(nèi)HGAPDH比值圖 8、間質(zhì)細(xì)胞孕激素培養(yǎng)液的上皮基因

圖 11、間 2P 組和間 2PE 組加入激素處理培養(yǎng)至的表達(dá)量明顯增加，以間 2P 組更為明顯，而孕組和間 2RuPE 組， HOXA11 表達(dá)量與對(duì)照組相2.27002.27202.27402.27602.27802.28002.28201 2 3 標(biāo)OXA1／內(nèi)HGAPDH比值圖 12、間質(zhì)細(xì)胞 RU486 孕激素培養(yǎng)液的上皮

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 王莉芬,王弘毅,羅宏志,朱正美,王介東;原位雜交檢測(cè)同源框基因HoxA11在人月經(jīng)周期子宮內(nèi)膜的表達(dá)[J];生殖與避孕;2000年03期

2 羅宏志,王弘毅,王介東,王莉芬,朱正美;雌/孕激素對(duì)原代培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞HOXA11和PR基因表達(dá)的影響[J];生殖與避孕;2002年01期

3 王莉芬,王弘毅,武捷,羅宏志,朱正美,王介東;小劑量米非司酮對(duì)分泌中期人子宮內(nèi)膜HOXA11基因表達(dá)的影響[J];生殖醫(yī)學(xué)雜志;2000年03期

4 李紅,陳士嶺,邢福祺;HOXA10基因在子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)及與不孕的關(guān)系[J];中華婦產(chǎn)科雜志;2002年01期

本文編號(hào)：2810660