【摘要】： 本實(shí)驗(yàn)將人肝癌細(xì)胞系HHCC-9724-P株接種到3種不同免疫缺陷 和免疫正常BALB/c小鼠的不同部位，觀察腫瘤的生長(zhǎng)特點(diǎn)，測(cè)定小 鼠免疫細(xì)胞和抗體的變化趨勢(shì)及脾淋巴細(xì)胞對(duì)肝癌細(xì)胞殺傷力，探討 肝癌在不同免疫小鼠體內(nèi)生長(zhǎng)的模型特點(diǎn)及肝癌生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移與免疫間 的相互關(guān)系。 本實(shí)驗(yàn)首先在體外培養(yǎng)人肝癌細(xì)胞系（HHCC-9724-P），達(dá)到一定 數(shù)量的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)進(jìn)行消化收取，然后接種到免疫正常的BALB/c， B細(xì)胞缺陷的CBA/N，T細(xì)胞缺陷的BALB/c-nu（nude）和T、B細(xì)胞嚴(yán) 重聯(lián)合缺陷的SCID小鼠的皮下、腹腔和肝內(nèi)及用BLAB/c和CBA/N 外周血免疫重建的SCID（BALB/c-PBL-SCID和CBA/N-PBL-SCID）皮 下，監(jiān)測(cè)腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移情況。結(jié)果顯示，肝癌細(xì)胞系在BALB/c小 鼠體內(nèi)各接種組不生長(zhǎng)；在小鼠CBA/N的皮下、腹腔內(nèi)組不生長(zhǎng)，肝 內(nèi)組出現(xiàn)了少量的癌結(jié)節(jié)，但皮下隨接種數(shù)達(dá)到2×10~7/0.2ml時(shí)，有 癌結(jié)節(jié)出現(xiàn)，但到3周后又逐漸消失。nude、SCID和CBA/N-PBL-SCID 各皮下接種組都有癌結(jié)節(jié)生長(zhǎng)，但3組間癌體積差異顯著（P＜0.05）； BALB/c-PBL-SCID皮下接種后長(zhǎng)出的癌體到第3周逐漸有失；nude、 SCID的腹腔或肝內(nèi)接種組有廣泛轉(zhuǎn)移，而SCID小鼠的癌體大小、轉(zhuǎn) 移量和轉(zhuǎn)移范圍明顯超過nude。 第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文 一 另一方面，本實(shí)驗(yàn)在接種癌細(xì)胞后監(jiān)測(cè)小鼠體內(nèi)免疫的變化。接 種后每周測(cè)定有B細(xì)胞的小鼠抗體變化，分別用小鼠血清與肝癌細(xì)胞 系進(jìn)行凝集反應(yīng)對(duì)比試驗(yàn)一5周后，取實(shí)驗(yàn)鼠進(jìn)懈細(xì)胞毒殺傷實(shí)驗(yàn)； 同時(shí)測(cè)定具有 T細(xì)胞的，J、鼠 CD4”、CDS”T細(xì)胞百分率。結(jié)果表明， 脾細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞殺傷力依次為荷瘤CB洲、B從B／c、 CBA／N－PBL－SCID卜鼠，對(duì)照組及SCID、nude沒殺傷性。CBA／N和 BALB兒的 CD4”、CDS＊細(xì)胞百分率均發(fā)生變化，CD4”T細(xì)胞下降 明顯，CDS”T細(xì)胞變Jt不大。CD4”八b例降到 l．00左右。實(shí)驗(yàn)eA BALB兒，J、鼠血清與癌細(xì)胞凝集反應(yīng)較強(qiáng)烈，B從B兒FBLECID和 CdC 依次次之Z 所測(cè)的B ALALB兒小鼠免疫球蛋白有一上升到下降的趨勢(shì)， 而BALB兒PBL七CID小鼠是持續(xù)上升的，每毫升能達(dá)到毫克量。 結(jié)論：1．肝癌細(xì)胞在比ID體內(nèi)百分之百成瘤，而且癌體比＿d：長(zhǎng) 得更快更大，肝內(nèi)接種轉(zhuǎn)移率更高、轉(zhuǎn)移范圍和量更大，所以，SCID 是建立肝癌模型的最佳模型動(dòng)物。2．本實(shí)驗(yàn)用 8 X 106的細(xì)胞數(shù)進(jìn)行免 疫重建 SCID是成功的，不僅體現(xiàn)了 2種，J、鼠排斥腫瘤的特點(diǎn)，k且出 現(xiàn)的GVHD并不嚴(yán)重，因此SCID是兔疫重建和腫瘤免疫研究十分 理想的模型動(dòng)物。3．肝原位和腹腔接種易發(fā)生轉(zhuǎn)移，但肝內(nèi)原位接種轉(zhuǎn) 移率及轉(zhuǎn)移范圍更廣。4l細(xì)胞在排斥肝癌中起主要作用，B細(xì)胞在抗 腫瘤中也起很重要的作用；在一定條件下，存在非T細(xì)胞依賴的B細(xì) 胞抗腫瘤或非B細(xì)胞依賴的T細(xì)胞排斥腫瘤作用；免疫細(xì)胞間存在著 相互促進(jìn)的機(jī)制，腫瘤免疫需要綜合性免疫。5．腫瘤在不同接種部位所 產(chǎn)生的免疫影響是不完全一樣的；免疫在排斥腫瘤的同時(shí)，也受到腫 瘤抑制或影響。6．本實(shí)驗(yàn)h正明T細(xì)胞的細(xì)胞毒和B細(xì)胞產(chǎn)生的抗體是 異種特異性的抗腫瘤作用。
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2001
【分類號(hào)】：R-332;R735.7

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2799611