【摘要】：動脈粥樣硬化(AS)作為導(dǎo)致腦梗塞、心肌梗塞、肢端壞疽，以及器官或組織功能喪失的主要病因，是引起死亡的主要原因之一。近十年來，經(jīng)皮冠脈腔內(nèi)成形術(shù)(PTCA)成為治療冠狀動脈粥樣硬化疾病的常用手段。隨著臨床經(jīng)驗的積累及儀器設(shè)備的完善，臨床應(yīng)用越來越廣泛。然而術(shù)后高達30-50％的再狹窄率仍是目前亟待解決的難題，也是PTCA進一步推廣應(yīng)用的一大障礙。血管平滑肌細胞(SMC)從中膜向內(nèi)膜遷移以及在內(nèi)膜、中膜增生在AS形成及PTCA術(shù)后再狹窄過程中都起著重要作用。血小板、內(nèi)皮細胞、激活的單核細胞、SMC本身均可釋放一些生長因子和細胞介質(zhì)，例如：PDGF、bFGF、EGF、IGF-1等并通過相互協(xié)調(diào)，促進SMC的增生和遷移。盡管對SMC增生和遷移的機制已進行了大量的研究，但目前仍未十分清楚。一些研究提出纖溶酶原激活物(PAs)系統(tǒng)可能也參與SMC的增生和遷移。PAs是纖溶系統(tǒng)的主要成分，包括組織型(tPA)和尿激酶型(uPA)兩種類型，其主要功能是使纖溶酶原轉(zhuǎn)化成纖溶酶，纖溶酶使纖維蛋白和很大一部分細胞外基質(zhì)成分降解，且使膠原酶原激活轉(zhuǎn)變成膠原酶。雖然PAs對腫瘤細胞和其他一些細胞的作用已有所研究，但近年來Clowes等才在球囊損傷的鼠頸動脈壁觀察到PAs表達，并認為可能與SMC的增生和遷移有關(guān)。動物實驗顯示PDGF，AngⅡ，PMA等均可刺激動脈壁PAs表達增加。近年來對動物和人的動脈壁及動脈粥樣硬化斑塊部位有關(guān)PAs和PAI-1的分布雖已進行了不少研究，但對PAs，PAI-1與血管SMC增生的關(guān)系仍很不清楚，一些研究結(jié)果也不完全一致。 本項研究首先建立兔髂動脈損傷模型，用Fogarty球囊導(dǎo)管造成血管內(nèi)皮剝脫，觀察損傷前后血管壁結(jié)構(gòu)的改變；在損傷前后測定血管壁tPA活性變化；以tPA cDNA為探針進行原位分子雜交，觀察tPA與血管SMC增生和遷移的關(guān)系。研究發(fā)現(xiàn)在內(nèi)皮剝脫后第4天，中膜SMC開始向內(nèi)膜遷移，第7天，內(nèi)膜已較明顯增厚，以SMC成分為主。內(nèi)皮剝脫導(dǎo)致中膜提取物中tPA活性明顯升高，tPA活性的變化與tPA mRNA表達水平的變化一致。提示tPA活性的升高可能與
【學(xué)位授予單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：1997
【分類號】：R363
【圖文】：

3.培養(yǎng)的人主動脈SMC:倒置相差顯微鏡下SMC呈長梭形，峰谷狀x100化石蠟切片烘片2一3小時，37℃二甲苯脫蠟2次，每次15分鐘切片經(jīng)無水乙醇至75%乙醇進蒸餾水3%HZOZ滴加于切片上，室溫下10分鐘PBS洗5分鐘

圖6.GAPOH質(zhì)粒鑒定切后獲得316bP的GA備(26)株，接種于含相應(yīng)抗smlLB培養(yǎng)基中，培的3OmlLB中，培養(yǎng)至取質(zhì)粒，鑒定其為目0mLlB中。37℃劇烈2.sml氯霉素溶液(34m，15分鐘，收集菌體OrPm，10分鐘，收集菌m)l混勻，冰上放置5，室溫放置5一10分鐘。。，

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本文編號：2789065