【摘要】： 有關(guān)衰老的研究在基礎(chǔ)和臨床醫(yī)學(xué)中都是一個(gè)被重視的課題。隨著 社會(huì)人口老齡化，有關(guān)衰老尤其是腦衰老的研究，已經(jīng)成為研究的熱點(diǎn)。 在探討腦的衰老變化機(jī)理研究中，腦內(nèi)生長抑素（Somatostatin，SS） 的變化是人們頗為關(guān)注的神經(jīng)肽之一。SS為環(huán)狀14肽，與學(xué)習(xí)記憶密切 相關(guān)，目前研究已確認(rèn)，海馬結(jié)構(gòu)內(nèi)的SS神經(jīng)元與垂體前葉生長激素的 分泌和釋放活動(dòng)沒有直接關(guān)系，而與學(xué)習(xí)、記憶密切相關(guān)，具有抗遺忘 作用，是記憶的物質(zhì)基礎(chǔ)，已有研究資料表明，老齡大鼠海馬SS水平低 下，SS陽性神經(jīng)元密度降低。 人參總皂甙是傳統(tǒng)中藥人參的主要有效成分之一，具有人參的主要 生理活性，近年來有關(guān)人參總皂甙抗衰老研究十分熱門，已有研究資料 表明，人參總皂甙可以有效延緩神經(jīng)系統(tǒng)機(jī)能的老齡性退變。然而，有 —— 關(guān)人參總皂貳對衰老大鼠海馬內(nèi)SS神經(jīng)元作用的研究，國內(nèi)外未見報(bào)道。 本課題采用卜半乳糖亞急性中毒衰老模型大鼠，應(yīng)用免疫組化ABCfk檢測 大鼠海馬SS陽性神經(jīng)元分布，觀察人參總皂貳對衰老大鼠海馬生長抑素 變化的影響，探討人參總皂貳的抗衰老作用。 一、材料和方法 （一）動(dòng)物分組 18只Wistar大鼠（雄性，體重265士369，四月齡），隨機(jī)分為對照 組、造模組和給藥組三組，每組6只。 （二）衰老模型的建立及給藥 造模組：皮下注射卜半乳糖（48mg／kg”d）6周。 給藥組：皮下注射卜半乳糖N8峪八g”d）同時(shí)給予人參總皂貳灌胃 （50mg／kg”d）6周。 對照組：皮下注射生理鹽水u 八g’d）6周。 （三）取材、固定、切片 各組大鼠經(jīng)戊巴比妥鈉（46mg／kg）腹腔注射麻醉，開胸，經(jīng)左心 室4％多聚甲醛緩沖液灌注取腦，入4％多聚甲醛緩沖液后固定6－8小時(shí)， 常規(guī)脫水、浸蠟、包埋，Leitz切片機(jī)鼠腦冠狀位連續(xù)切片，片厚5 u m。 （四）免疫組他BC法檢挪S 采用華美公司提供的全組分ABC免疫組化檢測試劑盒，一抗為兔抗SS 血清（二軍大神經(jīng)生物學(xué)教研室），＊ 1500稀釋，結(jié)合時(shí)間：濕盒中 4 oC過夜。其余操作按試劑盒說明書進(jìn)行。 DAB染色、復(fù)染封片，01y晌us光鏡下觀察。 一2一 —— ABC法染色的同時(shí)，分別做陽性對照和陰性對照。 （五）圖像分析 每個(gè)標(biāo)本選擇2張相同斷面的切片，在olympus BHZ顯微鏡10X 10下， 用JVC Digital Ca。era分別對各組切片的m、CA3、CA4＆DG區(qū)進(jìn)行采樣 （采樣過程中保持光源亮度恒定，以保證各組切片光密度的可比性）， 采樣結(jié)果輸入計(jì)算機(jī)，應(yīng)用HPIAS－1000（高清晰度病理圖文分析系統(tǒng)， High resolution Pathological Image Analysis Syste。，同濟(jì)醫(yī)科大 學(xué)）進(jìn)行圖像分析，測定SS陽性神經(jīng)元的積分光密度。在olympus顯微鏡 下用測微尺計(jì)數(shù)SS陽性神經(jīng)元（個(gè)／m。z）。 （六）數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)以平均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差表示，用SPSS 8．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行 單因素方差分析（one－。ay ANOVA）。 二、結(jié)果和討論 （一）各組大鼠海馬SS免疫陽性神經(jīng)元定量分析結(jié)果比較 表1 三組大鼠海馬SS陽性神經(jīng)元計(jì)數(shù)（個(gè)／mmz） 組別n CAI CA3 CA4＆DG 對照組6 89．17士16．55All6．33士11．83A 183．67士23．18A 造模紐 6 35．00士4．94““58．17is．13““68．33士8．89”“ 給藥組 6 79．32土8．94八 107．17土13．”凸 180．弧士ZI．22凸 注：幼示與對照組比較，P＜0．of ；八示與造模組比較，P＜0．of －3－ —— 表二 三組大鼠海馬SS免疫陽性神經(jīng)元積分光密度 組別n CAI CA3 CA4＆DG 對照組6 12．70士l．33 12．62土l．69 13．48士l．58 造模組6 6．99土0．61““6．93土0．34““7．20土0．44““ 給藥組6 12．25士1．43八 12．47土1．46么 12．59士1．36A 注：林示與對照組比較，P刃．01；A示與造模組比較，P吻．01 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，給藥組與造模組比較，海馬各區(qū)SS陽性神經(jīng)元數(shù)目 和積分光密度均有顯著增加（P＜0．01）。給藥組與對照組相比，海馬各 區(qū)SS陽性神經(jīng)元數(shù)目和積分光密度無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0．15）。提示人參 總皂貳對卜半乳糖加速衰老模型大鼠海馬SS能神經(jīng)元有較好的保護(hù)作 用。 二四－半乳糖致大鼠亞急性衰老模型在抗衰老研究中的應(yīng)用 D－半乳糖致大鼠亞急性衰老模型是以衰老自由基代謝紊亂學(xué)說為理 論基礎(chǔ)建立的一種簡便實(shí)用可靠的衰老動(dòng)物模型，在國內(nèi)外抗衰老研究 中得到廣泛應(yīng)用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明衰老模型大鼠海馬內(nèi)SS陽性神經(jīng)元數(shù) 目及積分光密度均比正常對照組顯著減少（p＜0．of），與己有報(bào)道一致， 從一定程度上證實(shí)了D－半乳糖致大鼠衰老模型是一種簡便、優(yōu)良的衰老 模型。 （三）海馬SS＄齡變化與認(rèn)知障礙的關(guān)系 海馬結(jié)構(gòu)內(nèi)的SS陽性神經(jīng)元與學(xué)習(xí)、記憶密切相關(guān)。SS有利于記憶 的強(qiáng)化，具有抗遺忘作用，是記憶的物質(zhì)基礎(chǔ)。已有研究資料表明，衰 老大鼠海馬SS水平低下，SS陽性神經(jīng)?
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2001
【分類號(hào)】：R339.3

【參考文獻(xiàn)】

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1 趙邦云，李希成，黎海蒂，鄭魯，吉衛(wèi)清，阮懷珍;海馬內(nèi)注射半胱胺對大鼠海馬生長抑素含量、痛閾和主動(dòng)回避反應(yīng)的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1996年01期

2 陳樹元，金偉軍，陳志良，石興華;D─半乳糖致大鼠亞急性衰老模型的建立[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1995年03期

3 陳樹元，金偉軍，侯連兵，陳志良;慈禧春寶沖劑對D－半乳糖致大鼠亞急性衰老模型的保護(hù)作用[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1996年02期

4 曲方;宰春和;;生長抑素與癡呆[J];國外醫(yī)學(xué).神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)分冊;1989年04期

5 張樟進(jìn);張可仁;王國明;馬菊芬;;衰老大鼠海馬結(jié)構(gòu)內(nèi)生長抑素樣神經(jīng)元的變化——免疫金銀染色法及圖像定量分析研究[J];解剖學(xué)報(bào);1989年02期

6 陶元祥,戴曉章,丁炯,傅玉峰,左國平;大鼠背海馬內(nèi)生長抑素mRNA神經(jīng)元的老年變化[J];解剖學(xué)報(bào);1995年03期

7 劉新峰，金泳清，史蔭綿;老年期癡呆患者腦脊液神經(jīng)肽含量的檢測[J];臨床精神醫(yī)學(xué)雜志;1995年05期

8 張石寧,陳明,肖紅,王偉勇,翟書濤;D-半乳糖致衰老模型的研究[J];臨床精神醫(yī)學(xué)雜志;1998年06期

9 王國強(qiáng),姜燕平;中樞神經(jīng)系統(tǒng)的生長抑素[J];國外醫(yī)學(xué)(腦血管疾病分冊);1997年01期

10 湯耀法;光密度測定的穩(wěn)定性以及有關(guān)參數(shù)的綜合測定[J];上海醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1997年01期

本文編號(hào)：2783579