發(fā)布時間：2017-03-30 22:30

  本文關(guān)鍵詞：腸易激綜合征大鼠模型結(jié)腸樹突狀細胞生物學(xué)行為體外研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討Runx3、TGF-β1及樹突狀細胞與腸易激綜合征(Irritable bowel syndrome,IBS)發(fā)病中的相關(guān)性,進而為IBS的發(fā)病機制提供線索。方法:通過乙酸灌腸加束縛應(yīng)激方法建立腸易激綜合征大鼠模型。從每只大鼠中提取一小段結(jié)腸在電鏡觀察樹突狀細胞的形態(tài)。然后運用密度梯度離心法分離出大鼠結(jié)腸粘膜固有層的樹突狀細胞,分離出來的樹突狀細胞在體外培養(yǎng)12天后再經(jīng)過免疫磁珠分選器分選。再運用siRNA技術(shù)轉(zhuǎn)染RUNX3基因啟動子發(fā)卡樣特異性干擾寡核苷酸序列(shRNA-RUNX3)至分離出的樹突狀細胞。繼續(xù)培養(yǎng)7天。分別進行流式細胞儀檢測DC表型、運用Western blotting檢測TGF-β1及Runx3蛋白的表達情況。結(jié)果:1、在不同擴張容量下,比較兩組大鼠的AWR評分及腹壁肌電活動,發(fā)現(xiàn)模型組大鼠AWR評分較對照組明顯增加,提示其內(nèi)臟敏感性增加(P0.01)。2、大鼠派氏結(jié)DC表面OX62的表達率IBS模型組大鼠明顯高于正常對照組的(P0.05)。3、培養(yǎng)的樹突狀細胞通過倒置熒光鏡觀察符合DC的結(jié)構(gòu)特點。4、正常組DC的表面分子OX62、CD80、CD86、MHC-II的表達率均明顯低于IBS組,但轉(zhuǎn)染組與未轉(zhuǎn)染組之間無明顯差異。5、Western blotting結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染組Runx3蛋白的表達量較未轉(zhuǎn)染組明顯減少。轉(zhuǎn)染組與未轉(zhuǎn)染組TGF-β1蛋白表達量沒有明顯差異。結(jié)論:1、利用乙酸灌腸加束縛應(yīng)激的方法來建成的IBS動物模型是符合IBS的內(nèi)臟敏感性機制的,這非常適用于關(guān)于IBS的試驗研究。2、IBS的發(fā)生與發(fā)展可能有樹突狀細胞的參與。3、TGF-β1和Runx3在腸易激綜合征發(fā)病中存在的作用有待進一步研究。4、Runx3基因有可能通過其他傳導(dǎo)途徑來影響樹突狀細胞在腸易激綜合征中的作用。
【關(guān)鍵詞】：腸易激綜合征 樹突狀細胞 RUNX3 TGF-β1 shRNA
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R574.4;R-332
【目錄】：

• 縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 第1章 前言10-14
• 第2章 材料和儀器14-16
• 第3章 步驟和方法16-29
• 第4章 結(jié)果29-35
• 第5章 討論35-38
• 第6章 結(jié)論38-39
• 參考文獻39-42
• 綜述42-50
• 參考文獻47-50
• 在讀期間發(fā)表文章50-51
• 致謝51-52

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 曾雪愛;洪炎國;黃俊山;;RNA干擾技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用[J];生物醫(yī)學(xué)工程與臨床;2011年02期

  本文關(guān)鍵詞：腸易激綜合征大鼠模型結(jié)腸樹突狀細胞生物學(xué)行為體外研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：278262