【摘要】： 疼痛是臨床上常見的癥狀，常給病人帶來極大的痛苦。組織損傷及外周神經(jīng)損傷后可導致痛及痛過敏。目前認為，痛及痛過敏的發(fā)生機制有兩方面：一是外周傷害性信息不斷傳入，二是脊髓內(nèi)感覺神經(jīng)元興奮性發(fā)生改變。但其詳細機制并未完全闡明。近年來研究表明，脊髓后角神經(jīng)元內(nèi)蛋白激酶C(PKC)的激活和位移與痛感覺及痛過敏的形成有關。鞘內(nèi)注射PKC激動劑如PMA，動物表現(xiàn)出明顯的痛過敏和自發(fā)性疼痛。而給予PKC抑制劑如H-7，動物對傷害性刺激反應遲鈍，明顯減輕福爾馬林足底注射引起的熱痛覺過敏現(xiàn)象，熱輻射實驗潛伏期延長。而在缺乏PKCγ的小鼠神經(jīng)損傷后完全不產(chǎn)生痛覺過敏�？梢姡琍KC的激活是產(chǎn)生痛及痛過敏的重要因素。海馬作為邊緣系統(tǒng)的重要部分，其功能尚未完全闡明。雖然已有較多的研究證明海馬參與情緒，記憶及應激調(diào)節(jié)，但是有關海馬與疼痛關系研究報道較少。近年來的一些研究表明，海馬有可能參與痛感覺及痛調(diào)制過程，但其詳細機制尚不清楚。 因此，本實驗目的有兩方面，一是系統(tǒng)觀察福爾馬林炎性痛時脊髓后角PKC激活的時間過程及其分布特征；二是觀察福爾馬林炎性痛及痛過敏過程中海馬PKC表達的變化及其區(qū)域特征，為進一步闡明海馬在痛感覺及痛調(diào)制方面的功能提供依據(jù)。研究結果如下： 1．大鼠福爾馬林炎性痛及痛過敏時脊髓后角PKC的變化及時 中文摘要 間特征 健康SD大鼠42只，雌雄不拘，酬頒7組，分另為對 照繃D獼馬林致痛后＊，3h，12h，2仇 3d及7d組（每組 n＝6人對照組大鼠經(jīng)右后掌皮下注射生理鹽水0．IInl，其余各 組大鼠注射 sed爾馬林溶液 0．Inil，對照組于注射后 24h，其 余各組于注射福爾馬肪相應時間點耿LS脊髓節(jié)段做PKC免 疫組織化學觀察。 結果發(fā)現(xiàn)，對照組PKC陽性細胞較少，免疫陽性產(chǎn)物均 勻分布在細胞膜、細胞撅D細胞核。而且左右兩側對比PKC 的陽性細胞數(shù)無差異中Deo．05人注射福爾馬林后各實驗組脊 髓后角PKC陽性細胞數(shù)增加，而且同側仰勤Uu明顯。與此 同時PKC陽性產(chǎn)物在細胞內(nèi)分布也鞭破，表現(xiàn)為：細胞核 幾乎無表達，主要分儷雛腳位；而且期鈔翱弛拗耐照組顯 著增加巾＜0．05人PKC a＠性的增加在時間上表現(xiàn)為兩個 高峰，邢IJ為注射福爾馬肪 lh 和 24h，而又以 24h更為顯著 巾．of人肋后 7d M的陽性細胞數(shù)目及染色髓恢復到 對照組水平。 以上結鞭明，福爾馬林贓性痛及痛過敏過程中，脊髓 后角PKC被激活膿移￥鵬部位，娜蜘曠于福爾馬林注射后 24h的同側脊髓后角最明顯。 2．大鼠福爾馬林炎性痛誘導海馬神經(jīng)元形態(tài)及PKC的變化 健康SD大鼠42只，雌雄不拘，酬蛐7組，分別為對 照繃D獼馬硼后＊，3h，12h，24h，3d禾 7d組（IFi）。 對照組大鼠經(jīng)右后掌皮下注射生理鹽水0．IInl，其余各組注射 5蝴馬林溶液0．IITil。對照組動物于注射后24h，其余各組 于注射后相應時間點斷頭取腦，冠狀切取視交叉后 1至4mm 2 中文摘要 腦胭，10％中牲甲醛固定，敝HE常順色和PKC免翩 化染色，觀察海馬神經(jīng)元的形態(tài)學變化及M 倩況。 結果發(fā)現(xiàn)，對照組海馬PKC陽性細胞較少，陽性產(chǎn)物在 細胞內(nèi)均勻分布，染色深度淺。M馬林后各實驗組PKC 陽。喇撇均增加，附勝噸臟…靴，而細胞核 無明顯表達。PKC的兔疫活性的增加在時間上表現(xiàn)為兩個高 峰，分別為＊ 和 24h，以 24h最明顯（pwto．of），之后即開始 下降，于注射后7d f恢復￥側股組水平。這種免疫活性的增 加，主要表現(xiàn)在CA3及CA4區(qū)，以CA3區(qū)最明顯；而CAI 區(qū)無論陽性細胞數(shù)及染色深度都與對照組無顯著性差異。HE 常艦染色發(fā)現(xiàn)對照組海躺體細艙由剛整齊，胞核清晰：注射 福爾馬林后可見部分海馬錐喇娜一＋脹，深染：在注 射福爾馬林后3d組海馬錐喇胞變化最明顯，可見細腳P列紊 亂，胞體月＋服核仁消失，部分錐體細胞胞體皺縮，胞漿濃縮及 胞核固縮；＿掖形態(tài)學改變可于注射福爾馬林后7天恢復。 以上結果表明，福爾馬敝性痛及痛過敏賄馬錐喇胞 M的表達增強，娜靴的時間特征與脊髓是一致的，說明 海馬參與了傷害賬息的傳遞與感受過程。海馬PKC觸強 主要出贓CA3區(qū)，說明CA3區(qū)可能題馬感受痛覺的主要 珊。而且在PKC的免疫活勝增強之后發(fā)生部分細胞可逆勝損 傷變化，表明傷害性信層的傳入可致海馬神經(jīng)元形態(tài)學發(fā)生可 逆性改變。 結論：大鼠右后掌注射福爾馬湘能G！起脊髓后角神a 內(nèi)PKC兔疫活性增強，膜結合PKC謝，這種變化于注射福 爾馬林后24h最為顯著：與此同時海馬神經(jīng)元細胞內(nèi)PKC免疫 活哪增強，表明傷害 急同時傳謝u了海馬。顧？變化以
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2002
【分類號】：R363

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本文編號：2781267