【摘要】：目的構(gòu)建人骨保護(hù)素(OPG)哺乳類表達(dá)載體并在非洲綠猴腎COS7細(xì)胞內(nèi)初步表達(dá)。方法用RT-PCR方法將人OPG cDNA的全長(zhǎng)編碼基因擴(kuò)增后,將其克隆于哺乳動(dòng)物表達(dá)載體pcDNA 3.1/CT-GFP上,構(gòu)建OPG的重組表達(dá)載體pcDNA 3.1/OPG-GFP。將其轉(zhuǎn)染COS7細(xì)胞進(jìn)行瞬時(shí)表達(dá),經(jīng)RT-PCR和EL ISA鑒定表達(dá)載體的功能及表達(dá)水平。結(jié)果成功地獲取了人OPG全長(zhǎng)編碼序列并構(gòu)建了OPG的表達(dá)載體pcDNA 3.1/OPG-GFP;瞬時(shí)表達(dá)試驗(yàn)證實(shí)該載體具有表達(dá)OPG的功能。結(jié)論采用基因克隆技術(shù)成功構(gòu)建了有表達(dá)OPG功能的哺乳類表達(dá)載體;此為高效、穩(wěn)定表達(dá)OPG的研究奠定了基礎(chǔ)。

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