【摘要】：乙型肝炎病毒(HBV)只能感染人類和少數(shù)靈長類動物，這使得對它的研究 受到很大制約�；谀壳皩BV細(xì)胞受體的認(rèn)識，有研究通過細(xì)胞轉(zhuǎn)染，使 HBV非易感細(xì)胞表達(dá)HBV binding protein或human Annexin V，用HBV體外感 染后可檢測到這些非易感細(xì)胞中的HBV DNA顯著地增多。而轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)的 出現(xiàn)，提供了一種改變動物的遺傳信息，使其獲得新的表型的方法。本研究將上 述細(xì)胞水平的研究進(jìn)展應(yīng)用于制備表達(dá)HBV binding protein和human Annexin V 的轉(zhuǎn)基因小鼠，嘗試建立乙肝易感的小鼠模型。 用PCR的方法從小鼠基因組中擴(kuò)增出白蛋白的啟動子和增強(qiáng)子序列。利用 RT-PCR，以HepG2細(xì)胞的RNA為模板擴(kuò)增出HBV binding protein和human Annexin V cDNA，將二者用IRES(internal ribosomal entry site)相連，置于小鼠白蛋 白增強(qiáng)子啟動子的調(diào)控之下。通過顯微注射的方法制備轉(zhuǎn)基因小鼠，經(jīng)Southern Blot檢測得到5只founder小鼠。經(jīng)RT-PCR和流式細(xì)胞術(shù)的檢測，HBV binding-protein和human Annexin V獲得了肝臟特異性的表達(dá)。用乙肝患者的血清 對轉(zhuǎn)基因陽性小鼠進(jìn)行腹腔和靜脈注射，但目前經(jīng)PCR和ELISA檢測，尚未有 感染的證據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號】：R346

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本文編號：2718206