本文關(guān)鍵詞：mTOR通過調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子c-Fos而影響TLR誘導(dǎo)的Th1反應(yīng)的機制和功能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：盡管IL-12在誘導(dǎo)Th1和CTL細胞免疫應(yīng)答中起著非常關(guān)鍵的作用,但單獨用TLR配體刺激DC和巨噬細胞時,只能誘導(dǎo)少量的IL-12表達,表明其表達水平受著嚴格的調(diào)控。通過本項研究,我們發(fā)現(xiàn)并闡述了TLR誘導(dǎo)IL-12表達,促進Th1應(yīng)答的新機制。我們通過篩選蛋白磷酸激酶的小分子抑制劑庫,發(fā)現(xiàn)了一些參與調(diào)節(jié)LPS誘導(dǎo)IL-12表達的蛋白激酶。通過進一步的研究,我們發(fā)現(xiàn)PI3K,ERK和m TOR是在天然免疫細胞中調(diào)節(jié)IL-12和IL-10的表達,從而調(diào)控機體的Th1免疫反應(yīng)的關(guān)鍵激酶。此外,我們發(fā)現(xiàn)這些激酶都控制TLR誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子c-Fos的表達,而c-Fos直接參與調(diào)節(jié)LPS誘導(dǎo)的IL-12和IL-10的表達調(diào)控。c-Fos通過與NF-κB相互作用,影響NF-κB與IL-12和IL-10啟動子的結(jié)合效率,因此在轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)控IL-12和IL-10等基因的表達。而且,利用m TOR的抑制劑Rapamycin作為佐劑,可以有效地提升乙肝和丙肝疫苗的效果�？傊�,這些結(jié)果表明m TOR通過調(diào)控c-Fos,進而調(diào)控TLR誘導(dǎo)的IL-12和IL-10表達,影響疫苗誘導(dǎo)的Th1免疫反應(yīng)。
【關(guān)鍵詞】：IL-12 mTOR Toll樣受體 c-Fos Th1免疫反應(yīng)
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R392
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 第一章 綜述8-15
• 1.1 TLR信號通路簡述8-9
• 1.2 TLR與適應(yīng)性免疫反應(yīng)9-10
• 1.3 IL-12 與TH1 免疫反應(yīng)10-11
• 1.4 IL-12 的表達調(diào)控11-12
• 1.5 轉(zhuǎn)錄因子C-FOS和免疫信號調(diào)控12-13
• 1.6 MTOR與TLR信號通路13-14
• 1.7 TLR信號在疫苗研發(fā)中的作用14-15
• 第二章 材料和方法15-34
• 2.1 實驗材料15-17
• 2.1.1 小鼠15
• 2.1.2 實驗試劑15-17
• 2.2 實驗儀器17-18
• 2.3 實驗方法18-34
• 2.3.1 骨髓來源的巨噬細胞的制備18-19
• 2.3.2 骨髓來源的樹突狀細胞的制備19-20
• 2.3.3 腹腔巨噬細胞的制備20
• 2.3.4 RNA樣品的制備20-21
• 2.3.5 細胞總蛋白的制備21-22
• 2.3.6 酶聯(lián)免疫吸附實驗樣品的制備22
• 2.3.7 RNA的提取22-23
• 2.3.8 反轉(zhuǎn)錄PCR23
• 2.3.9 實時熒光定量PCR23-24
• 2.3.10 ELISA檢測細胞因子分泌量24-25
• 2.3.11 細胞的胞質(zhì)分離技術(shù)25
• 2.3.12 蛋白質(zhì)免疫共沉淀25-26
• 2.3.13 雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?/span>26-27
• 2.3.14 WESTERN BLOT檢測蛋白表達量27-29
• 2.3.15 染色質(zhì)免疫共沉淀29-32
• 2.3.16 用不同佐劑與雞卵白蛋白抗原肽免疫小鼠32
• 2.3.17 用不同佐劑與乙肝病毒表面抗原免疫小鼠32-33
• 2.3.18 用不同佐劑與丙肝病毒E2 蛋白免疫小鼠33
• 2.3.19 數(shù)據(jù)分析處理與作圖33-34
• 第三章 實驗結(jié)果34-46
• 3.1 篩選參與TLR調(diào)節(jié)IL-12 表達和TH1 反應(yīng)的蛋白激酶34-35
• 3.2 蛋白激酶PI3K、ERK和MTOR參與LPS誘導(dǎo)的IL-10 表達35-37
• 3.3 RAPAMYCIN，，WORTMANNIN和U0126 通過抑制MTOR信號調(diào)節(jié)IL-12/ IL-10表達37-39
• 3.4 C-FOS通過調(diào)節(jié)NF-ΚB的活性來調(diào)控TLR誘導(dǎo)的IL-12 和IL-10 表達39-40
• 3.5 MTOR和C-FOS調(diào)控TLR信號誘導(dǎo)的基因表達40-42
• 3.6 用RAPAMYCIN能增強TLR誘導(dǎo)的抗HBV TH1 反應(yīng)42-44
• 3.7 用RAPAMYCIN+MPL作為佐劑能顯著增強HCV疫苗的保護效果44-46
• 第四章 討論46-48
• 參考文獻48-53
• 碩士階段已發(fā)表和待發(fā)表的文章53-54
• 致謝54-56

【相似文獻】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 何麗;mTOR通過調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子c-Fos而影響TLR誘導(dǎo)的Th1反應(yīng)的機制和功能研究[D];蘇州大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：mTOR通過調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子c-Fos而影響TLR誘導(dǎo)的Th1反應(yīng)的機制和功能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：270756