【摘要】：(一) 暗絲孢科真菌是一大類形態(tài)結(jié)構(gòu)復(fù)雜而具特征性，目前只發(fā)現(xiàn)無性階段的絲孢綱真菌。多數(shù)腐生，少數(shù)對(duì)人和動(dòng)物致病。對(duì)人類致病的主要病原體為裴氏著色真菌、緊密著色真菌、卡氏枝孢霉、疣狀瓶霉、皮炎瓶霉、甄氏外瓶霉，可引起著色芽生菌病、暗絲孢菌病或真菌性足菌腫。長(zhǎng)期以來暗絲孢科真菌的分類、鑒定和命名一直甚為混亂，被稱為病原真菌分類學(xué)中的頭號(hào)難題。關(guān)鍵在于人們對(duì)該科真菌各種屬間的系譜格局認(rèn)識(shí)不清，，難以形成可靠的自然分類體系。 本文采用白念珠菌等18種真菌18S rDNA共有的一段24bp序列(GCATCACAGACCTGTTATTGCCTC)作引物，對(duì)上述6種30株重要致病性暗絲孢科真菌基因組DNA進(jìn)行隨機(jī)擴(kuò)增。反應(yīng)體系和擴(kuò)增條件為：在總體積30μl的反應(yīng)體系中，含10×PCR緩沖液、MgCl_2(25mmol／L)、dNTPs(各2.5mmol／L)各3μl，模板DNA(50ng／μl)、引物(25μmol／L)及Taq DNA聚合酶(1u／μl)各1μl。以DNA熱循環(huán)儀先在低退火溫度下擴(kuò)增二個(gè)循環(huán)：94℃ 3min、40℃ 2min、72℃ 2min；然后再以高退火溫度擴(kuò)增35個(gè)循環(huán)：92℃ 45sec、55℃ 45sec、72℃ 2min，72℃繼續(xù)延伸5min后，以1.2％瓊脂糖凝膠電泳、紫外線下觀察并照相。對(duì)擴(kuò)增出的多態(tài)性圖譜，采用數(shù)值表相學(xué)方法分析，以各運(yùn)籌分類單位對(duì)偶間的最小曼哈頓距離表值為指標(biāo)，獲得了表相圖。簡(jiǎn)單示之為{P.verrucosa[(F.pedrosoi F.compacta) W.dermatitidis][E.jeanselmei C.carrionii]}，其種內(nèi)差異小于種間、種同差異小于屬間。 采用薄層掃描方法對(duì)上述6種30株重要致病性暗絲孢科真菌可溶性全細(xì)胞蛋白單向SDS-PAGE圖譜結(jié)合基型趨異方法進(jìn)行分析，得出其系譜格局為{[P.verrucosa(F.pedrosoi F.compacta)]W.dermatitidis [E.jeanselmei C. carrionii]}。顯示出F.pedrosoi和F.compacta、Fonsecaea和Phialophora、以及E.jeanselmei和C.carrionii間的密切關(guān)系。 這一結(jié)果為最終形成暗絲孢科真菌自然分類體系并達(dá)到命名的統(tǒng)一提供重要
【學(xué)位授予單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：1996
【分類號(hào)】：R379

【參考文獻(xiàn)】

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1 朱弘復(fù);中國蝙蝠蛾屬支序分類(鱗翅目:蝙蝠蛾科)[J];動(dòng)物分類學(xué)報(bào);1984年04期

本文編號(hào)：2696266