【摘要】：目的 為了獲得鼠胚與人早孕蛻膜單層細胞的共培養(yǎng)系統(tǒng)；觀察鼠胚與人早孕蛻膜傳代的單層細胞及凍融的單層細胞共培養(yǎng)的效果，便于今后作反復(fù)種植失敗夫婦胚胎與其凍融的自體增殖晚期-分泌早期子宮內(nèi)膜單層細胞共培養(yǎng)以提高妊娠率。 方法 經(jīng)過細胞培養(yǎng)、傳代獲得蛻膜單層細胞；冷凍保存、解凍復(fù)蘇后接種獲得凍融蛻膜單層細胞；對單層細胞作免疫組織化學檢查其雌、孕激素受體的表達。觀察昆明白小鼠單細胞受精卵與傳代的、凍融的人子宮蛻膜單層細胞共培養(yǎng)(A，，B兩組)及僅用培養(yǎng)液培養(yǎng)的對照組(C組)的胚胎發(fā)育情況。分析A，B組與C組；A，B組之間各期鼠胚的發(fā)育情況及8-細胞期A類胚胎形成情況。 結(jié)果 1 人早孕蛻膜細胞有良好的體外培養(yǎng)活力，易于獲得培養(yǎng)及傳代。 2 凍融的蛻膜單層細胞成功地獲得，經(jīng)免疫組織化學檢查其雌、孕激素受體同樣陽性表達，具有子宮內(nèi)膜細胞的特點。 3 成功地獲得昆明白小鼠超促排卵后的單細胞受精卵。分別與傳代及凍融的蛻膜細胞共培養(yǎng)獲得囊胚孵出。 4 共培養(yǎng)對分裂期鼠胚發(fā)育的影響A、B、C三組的2-細胞期形成率無統(tǒng)計學差異，A組在4-細胞形成率上高于B、C組。隨著培養(yǎng)時間的逐漸延長，A、B與C組8-細胞期形成率經(jīng)x~2檢驗，有顯著性差異，而A、B組之間無顯著性差異。 5 共培養(yǎng)對種植前鼠胚發(fā)育的影響A、B組胚胎桑椹期、早期囊胚和擴張囊胚期的形成率與C組相比有顯著性差異。同樣，A、B組之間無顯著性差異。 安徽醫(yī)科大學碩士學位論文 6共培養(yǎng)對8一細胞鼠胚體外培養(yǎng)胚胎質(zhì)量的影響A、B組在8一細胞階段A、B類 胚胎形成率與C組相比，差異有顯著性。同樣A、B組之間的A、B類胚胎形成率無 顯著性差異。 7培養(yǎng)后的培養(yǎng)液病原學檢查結(jié)果培養(yǎng)多日的共培養(yǎng)的培養(yǎng)液經(jīng)檢查，細菌及 真菌均陰性。 結(jié)論 1人早孕蛻膜單層細胞與鼠胚共培養(yǎng)系統(tǒng)的建立為進一步作胚胎共培養(yǎng)效果的分 析及胚胎細胞凋亡等共培養(yǎng)機制的探討提供了可操作的方法。 2新鮮傳代或凍融的人早孕子宮蛻膜單層細胞作為輔助細胞在鼠胚的發(fā)育中起到 了促進作用，該結(jié)果為人胚胎與其凍融的自體子宮增殖晚期一分泌早期的內(nèi)膜單 層細胞共培養(yǎng)的研究提供了可行性分析。 3嚴格無菌操作情況下，共培養(yǎng)系統(tǒng)可避免污染，安全可靠。
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2003
【分類號】：R329

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