發(fā)布時(shí)間：2020-05-30 17:50

【摘要】：睪丸的精子發(fā)生是一個(gè)獨(dú)特復(fù)雜的細(xì)胞分裂分化過程。睪丸生精小管中的生精細(xì)胞先后經(jīng)過三個(gè)階段的變化:精原細(xì)胞的增殖,精母細(xì)胞的減數(shù)分裂和精子細(xì)胞的變態(tài)過程,最終產(chǎn)生成熟的精子。在這一系列的形態(tài)學(xué)和生物學(xué)功能變化的背后是錯(cuò)綜復(fù)雜的基因網(wǎng)絡(luò)調(diào)控的過程。 睪丸內(nèi)復(fù)雜的基因表達(dá)調(diào)控一直是人們關(guān)注的熱點(diǎn),研究發(fā)現(xiàn)選擇性剪接是在睪丸內(nèi)轉(zhuǎn)錄水平控制基因表達(dá)的一種重要機(jī)制,對(duì)睪丸組織中的選擇性剪接的深入研究有助于理解其基因表達(dá)調(diào)控的機(jī)制和蛋白的多樣性。 本研究在用睪丸cDNA芯片與成人、6月齡胚胎睪丸及精子cDNA探針雜交的基礎(chǔ)上,鑒定了一條在人睪丸中表達(dá)的NORPEG基因(新的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞基因)的新轉(zhuǎn)錄本。因其比NORPEG短,因此命名為sNORPEG。此cDNA序列被輸入到Genbank,登錄號(hào)為AY317139�；蚪M比對(duì)顯示,sNORPEG基因定位于5p13.2-13.3。sNORPEG的cDNA全長(zhǎng)3486bp,開放閱讀框長(zhǎng)2952bp,編碼大小為110.4KDa的蛋白質(zhì)。氨基酸序列分析顯示其含有六個(gè)錨蛋白重復(fù)序列和兩個(gè)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域,與人NORPEG蛋白及小鼠ankycorbin蛋白高度同源。研究表明NORPEG蛋白是一個(gè)和細(xì)胞骨架功能相關(guān)的蛋白,分布在視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞胞質(zhì),研究發(fā)現(xiàn)小鼠ankycorbin蛋白分布在細(xì)胞與細(xì)胞之間粘著的部位,與細(xì)胞周邊終末網(wǎng)的肌動(dòng)蛋白絲結(jié)構(gòu)相互關(guān)聯(lián),是一種與肌動(dòng)蛋白功能相關(guān)的蛋白。RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示sNORPEG在胚胎、成人睪丸和精子中均有表達(dá),也在人多種組織中廣泛表達(dá)。 綜上所述,sNORPEG是一條NORPEG基因的新轉(zhuǎn)錄本,在睪丸
【圖文】：

結(jié)果.1芯片雜交在成人和胚胎。DNA探針與爭(zhēng)丸芯片雜交實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，我們分離鑒了一個(gè)新的在胚胎和成人有差異表達(dá)的克隆。它在胚胎和成人爭(zhēng)丸的雜交信號(hào)值分別為9.88和30.90，成人爭(zhēng)丸中的信號(hào)強(qiáng)度比胚胎的高3.12倍(圖3)。此外，它在精子中的雜交信號(hào)值為15.54，這明該基因在生精細(xì)胞中有表達(dá)。這是一條NORPEG基因短的不同轉(zhuǎn)本，因此命名為sNORPEG。

1.3sNORpEG的臟器表達(dá)特異性Rl二PCR結(jié)果顯示SNORPEG在胚胎爭(zhēng)丸，成人爭(zhēng)丸及精子中均有表達(dá)(圖8)。也在人多種組織中廣泛表達(dá)，在心，腦，胎盤，肺，肝，’腎，胰腺，脾，胸腺，辛丸，，卵巢，小腸，，結(jié)腸中都有表達(dá)，在骨骼肌有極微弱的表達(dá)，在前列腺，外周血白細(xì)胞未見表達(dá)，其中在肺和肇丸組織中檢測(cè)到一條未知的片段，新片段經(jīng)AT克隆測(cè)序后證實(shí)其為這條基因的一條新的EST(圖9)。這條新的EST提交到NCBIEST數(shù)據(jù)庫，其ESTid號(hào)為21253188。(圖10)。
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：R346

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 ;Expression of a novel bHLH-Zip gene in human testis[J];Asian Journal of Andrology;2003年02期

本文編號(hào)：2688497