【摘要】： 類固醇激素—孕酮（P_4）在雌性動(dòng)物生殖與妊娠維持過(guò)程中起著重要的作用。 體液孕酮含量的測(cè)定，可用于早期妊娠診斷、不孕癥診斷、發(fā)情鑒定、卵巢機(jī)能、 繁殖障礙和產(chǎn)科疾病的研究；還可用來(lái)檢查人工授精效果，進(jìn)行激素試驗(yàn)，為遺 傳分析提供有效的生理指標(biāo)等。 目前國(guó)內(nèi)對(duì)P_4的研究主要是采用液相放免分析法（~3H-P_4）以及酶免疫分析法 （EIA），但前者會(huì)產(chǎn)生需要進(jìn)行特殊處理的廢液，后者測(cè)定結(jié)果不夠穩(wěn)定，在實(shí) 際應(yīng)用中都存在一定問(wèn)題。 本研究建立了一種運(yùn)用孕酮單克隆抗體自包被固相放免分析法（Self-coating RIA Using Progesterone Mono-clonal Antibody，Sc-RIA）其靈敏度為0.06nmol/L， 回收率達(dá)95.73％，批內(nèi)CV6.8％，批間CV9.3％，與DPC有非常好的相關(guān)性。在 研究中用90％乙醇作為固相樣品-濾紙的抽提劑，得到濾紙樣品中的~3H-P_4和~(125)I- P_4回收率分別為95.01±0.80％和94.09±3.03％。按照Cerceo提出的“效點(diǎn)系統(tǒng) 打分法”中的五項(xiàng)指標(biāo)，對(duì)所建立的Sc-RIA方法進(jìn)行評(píng)價(jià)，得分為31分（得分 在28分以上為較優(yōu)）。說(shuō)明Sc-RIA可行、可靠。 應(yīng)用所建立的Sc-RIA，測(cè)定了正常發(fā)情奶牛，配種后懷孕奶牛和卵巢疾病奶 牛奶清和濾紙樣品中的孕酮含量的變化，結(jié)果表明奶清樣中的孕酮變化和濾紙樣 中的孕酮變化趨勢(shì)一致。正常奶牛發(fā)情周期中，奶清樣與濾紙樣孕酮的相關(guān)系數(shù) r=0.8792±0.070，且測(cè)得周期天數(shù)完全一致，為22±2.18天。兩者于同一天達(dá)到 谷點(diǎn)，在谷點(diǎn)處，，濾紙樣孕酮和奶清樣孕酮的平均濃度分別為1.6481± 0.6023nmol/L和0.3184±0.2549nmol/L。配種后奶牛濾紙樣與奶清樣孕酮變化趨 勢(shì)一致，其相關(guān)系數(shù)為0.9178±0.0053。卵巢疾病奶牛奶清樣和濾紙樣孕酮變化 的相關(guān)系數(shù)為0.62。 Sc-RIA可于奶牛早期妊娠診斷。用奶清樣測(cè)孕酮含量進(jìn)行早期妊娠診斷，妊 娠診斷準(zhǔn)確率達(dá)89.47％，未孕診斷準(zhǔn)確率達(dá)100％。用濾紙樣測(cè)定牛奶中的孕酮 含量進(jìn)行早期妊娠診斷，妊娠診斷準(zhǔn)確率達(dá)87.61％，未孕診斷準(zhǔn)確率達(dá)95.47％。 Sc-RIA還可用于監(jiān)測(cè)奶牛的發(fā)情、排卵、黃體功能等各種繁殖生理狀態(tài)，從 而進(jìn)一步地提高奶牛的繁殖率，提高牧場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效益。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2001
【分類號(hào)】：R392

【引證文獻(xiàn)】

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1 韓慧;葛根素對(duì)小鼠血清中激素含量和乳腺組織中受體表達(dá)量的影響研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

本文編號(hào)：2688193