【摘要】：目的:制備β淀粉樣多肽(Aβ)人源性抗體并進(jìn)行鑒定。方法:以Aβ1-42為抗原,利用噬菌體抗體庫技術(shù),通過“吸附-洗脫-擴(kuò)增”的富集反應(yīng),篩選出陽性克隆,進(jìn)行ELISA檢測。將單克隆噬菌粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌HB2151,誘導(dǎo)表達(dá)可溶性單鏈抗體(scFv)。結(jié)果:經(jīng)過4輪篩選,獲得56個能與AB結(jié)合的ELISA陽性克隆。經(jīng)蛋白印跡檢測(Western blot),表達(dá)的可溶性seFv抗體片段能夠特異性地與Aβ1-42結(jié)合,而與牛血清白蛋白(BSA)沒有交叉反應(yīng)。結(jié)論:該技術(shù)便捷有效,可不經(jīng)免疫制備出高特異性的人源性抗體,為開展阿爾茨海默病的免疫療法奠定了基礎(chǔ)。

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5 梁U，

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