發(fā)布時(shí)間：2017-03-25 12:02

  本文關(guān)鍵詞：脂肪源性干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)及向內(nèi)皮祖細(xì)胞的誘導(dǎo)分化，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景:脂肪源性干細(xì)胞是目前組織工程種子細(xì)胞的研究熱點(diǎn),通常采用膠原酶消化脂肪組織來(lái)獲得,但是存在著操作繁瑣,花費(fèi)高等不足。目的:觀察組織塊培養(yǎng)法分離的脂肪源性干細(xì)胞的基本生物學(xué)特性及其向骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞及內(nèi)皮祖細(xì)胞的誘導(dǎo)分化潛能。方法:無(wú)菌條件下切取大鼠雙側(cè)腹股溝脂肪組織,組織塊法分離培養(yǎng)脂肪源性干細(xì)胞,CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性,流式細(xì)胞儀分析干細(xì)胞表面標(biāo)志表達(dá)。取第4代脂肪源性干細(xì)胞用成骨誘導(dǎo)液、成脂誘導(dǎo)液、內(nèi)皮祖細(xì)胞誘導(dǎo)液培養(yǎng)兩三周并進(jìn)行鑒定。結(jié)果與結(jié)論:組織塊培養(yǎng)法得到的脂肪源性干細(xì)胞易擴(kuò)增,傳代后以長(zhǎng)梭形細(xì)胞生長(zhǎng)為主,呈漩渦狀排列,克隆樣生長(zhǎng);經(jīng)多次傳代仍能保持較強(qiáng)的增殖能力,細(xì)胞生長(zhǎng)曲線呈拋物線形;細(xì)胞表面標(biāo)志CD44、CD90、CD29呈陽(yáng)性表達(dá),CD45、CD31呈陰性表達(dá)。成脂誘導(dǎo)后細(xì)胞油紅O染色陽(yáng)性、成骨誘導(dǎo)后細(xì)胞茜素紅染色陽(yáng)性。誘導(dǎo)后的內(nèi)皮祖細(xì)胞CD34及Di I-ac-LDL和FITC-UEA-1雙熒光染色陽(yáng)性。以上結(jié)果顯示組織塊培養(yǎng)法能成功分離培養(yǎng)出脂肪源性干細(xì)胞,且獲得的細(xì)胞純度較高、易于增殖培養(yǎng),能高表達(dá)干細(xì)胞表面抗原以及具有向骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞及內(nèi)皮祖細(xì)胞多向分化的潛能,可以滿足組織工程研究種子細(xì)胞的需求。
【作者單位】： 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院綜合ICU;
【關(guān)鍵詞】： 干細(xì)胞 脂肪組織 細(xì)胞分化 內(nèi)皮細(xì)胞 脂肪干細(xì)胞 內(nèi)皮祖細(xì)胞 脂肪源性干細(xì)胞 組織塊培養(yǎng)法 分離 培養(yǎng) 誘導(dǎo) 國(guó)家自然科學(xué)基金
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81370364) 河南省衛(wèi)生科技創(chuàng)新人才工程專項(xiàng)基金~~
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 0引言Introduction實(shí)驗(yàn)方法:自2001年分離出具有多向分化潛能的脂肪源性干細(xì)大鼠脂肪源性干細(xì)胞的分離:無(wú)菌條件下取適量大鼠胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)以來(lái)[1],大量學(xué)者腹股溝皮下脂肪組織,清除明顯的結(jié)締組織及肉眼可見的證實(shí)相對(duì)于骨髓源性干細(xì)胞,脂肪源性干細(xì)

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本文編號(hào)：267148