【摘要】： 中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system，CNS)脫髓鞘性疾病是神經(jīng)系統(tǒng)常見(jiàn)病，其病因和發(fā)病機(jī)制迄今尚未完全清楚。目前認(rèn)為它是由特異性抗原介導(dǎo)的 CNS 的自身免疫性疾病，其發(fā)病可能與病毒感染有關(guān)。其發(fā)病機(jī)理推測(cè)與其他自身免疫性疾病相似，是自身抗原、非特異性T細(xì)胞活化和T細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)共同參與了脫髓鞘疾病的發(fā)病過(guò)程。髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein ，MBP)既是神經(jīng)髓鞘的重要成份，又是CNS脫髓鞘疾病的重要抗原。用MBP免疫動(dòng)物誘發(fā)的實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎(experimental allergicencephalomyelitis，EAE)是T細(xì)胞介導(dǎo)的CNS 自身免疫性疾病，在臨床表現(xiàn)、免疫病理和免疫化學(xué)方面與人類(lèi)CNS 脫髓鞘疾病有很多相似之處，因而是研究CNS 脫髓鞘病的經(jīng)典動(dòng)物模型。用 EAE 易感動(dòng)物的外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear，PBMC)和樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cell，DC)等在離體條件下與MBP共培養(yǎng)，可用于探索和研究它們?cè)贓AE中的作用。DC作為機(jī)體內(nèi)功能最強(qiáng)的抗原遞呈細(xì)胞(antigen presenting cell，APC) ，目前已知其具有啟動(dòng)免疫應(yīng)答和免疫耐受雙重作用，參與機(jī)體免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)，其在自身免疫性疾病發(fā)病中的作用已受到人們的重視。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，DC具有致病性和促恢復(fù)性的雙重作用，通過(guò)體外培養(yǎng) MBP對(duì) PBMC、DC產(chǎn)生 IFN－Y、NO和 CDll。的表達(dá)影響 環(huán)境的調(diào)控可以改變DC 的功能或使其定向分化。因?yàn)镈C 的免 疫功能具有多樣性和易變性，所以有可能成為治療自身免疫病的 突破口。但DC在CNS脫髓鞘疾病中的作用，國(guó)內(nèi)外在此領(lǐng)域的 研究起步較晚，關(guān)于DC在EAE發(fā)病中的作用國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)報(bào)道。 本實(shí)驗(yàn)采用體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法，分離EAE 易感性BALB／C 小鼠PBMC 和DC，在體外與MBP 共培養(yǎng)。觀察經(jīng)MBP 活化的 PBMC 分泌IFN—Y以及NO 的含量變化，以證實(shí)T 細(xì)胞非特異 性活化的參與機(jī)制在CNS 脫髓鞘性疾病發(fā)病中的作用。通過(guò)檢 測(cè)經(jīng) ＼1 P 活化的 P B ＼IC 和 D C 中 D CI 的標(biāo)志性抗原 C DllC 的表 達(dá)，以觀察C＼S 脫髓鞘性疾病過(guò)程中DC 前體細(xì)胞向DCI 分化 變化。為設(shè)法使DC 前體細(xì)胞定向分化或者改變其功能，促進(jìn) CNS脫髓鞘性疾病的恢復(fù)，或減少?gòu)?fù)發(fā)提供實(shí)驗(yàn)資料。 本研究的主要結(jié)果如下：①經(jīng) MBP 刺激的 BALB／C ／J’鼠 PBMC 分泌IF＼－b，的含量明顯增加，實(shí)驗(yàn)組為43．83士6．06 pg／ml，對(duì)照組為ZS．52土2．18pg／。1，二者具有極顯著性差 異（P＜0．01）。②i4 MBP 刺激后的 BALB／C ’］＼鼠 PBMC 分泌 ＼0 的含量明顯增加，實(shí)驗(yàn)組為 180．76土20．75 11 mol／L，對(duì) 照組為 9 5．61土 13．0 9 u mo／L，h者具有極顯著性差異（P ＜0．of）。③經(jīng) MBP 刺激的 BALB；／C ／J’鼠 PBMC CDllC 的表 達(dá)明顯增強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)組CDllC 平均熒光強(qiáng)為 15．16士1．92 D， 對(duì)照組為 8．76 士 1．70 D，，二者具有極顯著性差異 卜＜ 0．01）。④＠ MBP刺激的 BALB／C 小鼠 DC CDllC 的表達(dá)明顯 增強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)組平均熒光強(qiáng)度為 17．41．62 D，對(duì)照組為 9．13士0．66 D，二者具有極顯著性差異（尸＜0．01）。⑤去除 DC 的 BALB／C 小鼠脾單個(gè)核細(xì)胞，MBP 刺激后其 CDI IC 的表 達(dá)無(wú)明顯增強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)組平均熒光強(qiáng)度為 S．86士 1．SS D，對(duì)照 組為8．69上L．12 D，二者無(wú)顯著性差異（尸＞O．05）。 MBP對(duì)PBMC、DC產(chǎn)生IFN．Y、NO和CDllc的表達(dá)影響 本實(shí)驗(yàn)提示：①被誘導(dǎo)抗原MBP激活的EAE易感性BALB／C 小鼠 PBMC 分泌 IF＼－Y 和 NO增加。②EAE易感性BALB／C 小 鼠DC 前體細(xì)胞與MBP共培養(yǎng)可以促進(jìn)其向DCI 亞型分化。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類(lèi)號(hào)】：R363

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 于國(guó)平,朱克,于濤,田東華,周湘軍;實(shí)驗(yàn)性過(guò)敏性腦脊髓炎豚鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)一氧化氮合酶的表達(dá)[J];中華神經(jīng)科雜志;1998年03期

本文編號(hào)：2664916