【摘要】： 目的 小鼠胚胎消化管形態(tài)發(fā)生主要在胚胎第11天～17天。細(xì)胞增殖和凋亡與胚胎消化管的形態(tài)發(fā)生關(guān)系十分密切。本課題擬通過(guò)觀察凋亡相關(guān)蛋白P53，Bcl-2，Bax以及增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）在胎鼠第11天～17天食管、胃、小腸、結(jié)腸上皮細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)，以探討這些蛋白表達(dá)的時(shí)序和相互之間的關(guān)系，以及與消化管各段形態(tài)發(fā)生的關(guān)系。 方法 雌、雄小鼠交配，，取第11天～17天胎鼠，經(jīng)固定、石蠟包埋、連續(xù)切片后，每間隔10張取一張貼片，做成間斷連續(xù)切片，HE染色。光鏡下觀察間斷連續(xù)切片，定位消化管食管、胃、小腸、結(jié)腸所在位置。根據(jù)定位，選出有食管、胃、小腸、結(jié)腸的切片，用免疫組織化學(xué)SABC法檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白P53，Bcl-2，Bax以及增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）在第11天～17天胎鼠食管、胃、小腸、結(jié)腸上皮細(xì)胞中的表達(dá)。圖像分析系統(tǒng)測(cè)定P53，Bcl-2，Bax以及PCNA的表達(dá)強(qiáng)度，分析這些蛋白表達(dá)的時(shí)序和相互之間的關(guān)系，以及與四段消化管的形態(tài)發(fā)生的關(guān)系。 結(jié)果 ① Bcl-2在第11天～17天胎鼠食管、胃、小腸、結(jié)腸上皮細(xì)胞中表達(dá)的峰值均在第11天～13天，第14天開(kāi)始降低，第16天和17天僅有低水平表達(dá)。② P53在消化管四段上皮細(xì)胞中的表達(dá)峰值均在第11天～14天，第15天明顯降低，第16和17天僅低水平 WP=6 表達(dá)。③ Bax在食管上皮細(xì)胞中的表達(dá)峰值為第11天，然后逐漸下降；胃和小腸上皮細(xì)胞中Bax的表達(dá)峰值均在第14天；結(jié)腸上皮細(xì)胞中Bax的表達(dá)峰值在第15天。④食管和胃上皮細(xì)胞中表達(dá)PCNA的峰值均在第11天，然后逐漸降低；小腸和結(jié)腸上皮細(xì)胞中表達(dá)PCNA的峰值分別在第14天和第15天。⑤ Bcl-2在胃、小腸、結(jié)腸上皮細(xì)胞表達(dá)峰值時(shí)間（第11天～13天）均在Bax表達(dá)峰值時(shí)間（分別為14天和15天）之前；Bax在小腸和結(jié)腸上皮細(xì)胞表達(dá)的表達(dá)峰值時(shí)間正是小腸和結(jié)腸細(xì)胞凋亡峰值出現(xiàn)的時(shí)間；P53在胎鼠胃、腸上皮細(xì)胞表達(dá)的峰值時(shí)間與Bcl-2表達(dá)的峰值時(shí)間一致，而與Bax表達(dá)峰值時(shí)間不一致。 結(jié)論 ①Bax在胎鼠四段消化管上皮細(xì)胞中的表達(dá)有時(shí)序差異。②細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2在胚胎消化管各段發(fā)育中的表達(dá)結(jié)果表明： Bcl-2可能具有抑制胎鼠消化管上皮細(xì)胞凋亡的作用；Bax可能具有促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用。③P53在胚胎消化管各段發(fā)育中的表達(dá)結(jié)果顯示，P53與胎鼠消化管上皮細(xì)胞凋亡調(diào)控的關(guān)系不密切。④Bcl-2 及Bax在食管上皮細(xì)胞表達(dá)的峰值時(shí)間與其凋亡峰值時(shí)間基本一致，而在小腸和結(jié)腸上皮細(xì)胞表達(dá)的峰值與其凋亡峰值時(shí)間不一致。這表明參與胎鼠食管和腸上皮細(xì)胞凋亡調(diào)控的機(jī)制可能不完全相同。胎鼠消化管發(fā)育過(guò)程中上皮細(xì)胞凋亡的調(diào)控機(jī)制，可能依賴(lài)于多種凋亡蛋白間的相互作用。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類(lèi)號(hào)】：R321

【參考文獻(xiàn)】

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