【摘要】： 目的 1)應(yīng)用新生大鼠離體延髓腦片標(biāo)本，記錄與之相連的舌下神經(jīng)呼吸節(jié)律性放電(respiratory rhythmical discharge activity，RRDA)，在灌流液中分別給予不同濃度的NO(nitric oxide，NO)供體硝普鈉(sodium nitropmsside，SNP)，NO合成前體L-精氨酸(L-Arginine，L-Arg)以及神經(jīng)元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase，nNOS)特異性抑制劑7-nitro indazole (7-NI)，觀察其對(duì)RRDA的影響，從而探討NO對(duì)節(jié)律性呼吸的產(chǎn)生和調(diào)節(jié)中的作用；2)在新生大鼠離體延髓腦片標(biāo)本上，同步記錄舌下神經(jīng)根和面神經(jīng)后核內(nèi)側(cè)區(qū)(the medial area of retrofacialis nucleus，mNRF)中的吸氣神經(jīng)元的放電活動(dòng)，分別給以NO的合成前體、供體以及nNOS的特異性抑制劑，進(jìn)一步探討NO對(duì)節(jié)律性呼吸產(chǎn)生影響的可能機(jī)制。 方法 選用新生SD大鼠(0～3d)，雌雄不拘。1)參照并改良Suzue的方法制作離體延髓腦片標(biāo)本，主要包含面神經(jīng)后核內(nèi)側(cè)區(qū)，前包欽格氏復(fù)合體(Pre-B(?)tzinger Complex)、腹側(cè)呼吸組以及背側(cè)呼吸組的一部分，保留舌下神經(jīng)根。用玻璃吸附電極記錄舌下神經(jīng)放電作為呼吸活動(dòng)的指標(biāo)，主要的呼吸參數(shù)包括呼吸周期(respiratory cycle，RC)、吸氣時(shí)程(inspiratory time，TI)、呼氣時(shí)程(expiratory time，TE)以及放電的積分幅度(integral amplitude，IA)，通過(guò)灌流液給藥，觀察不同濃度的不同藥物對(duì)神經(jīng)根放電活動(dòng)的影響；2)在面神經(jīng)后核內(nèi)側(cè)區(qū)(mNRF)同步記錄吸氣神經(jīng)元單位的放電活動(dòng)，灌流給予上述不同藥物藥物，觀察其對(duì)吸氣神經(jīng)元放電的影響。 結(jié)果 1在記錄神經(jīng)根的實(shí)驗(yàn)部分：1)灌流給予不同濃度的NO合成前體L-Arg(從500μmol/L到2mmol/L)，與給藥前對(duì)照相比，舌下神 經(jīng)根的各項(xiàng)放電指標(biāo)均未出現(xiàn)顯著性變化;2)灌流給予不同濃度的NO 供體sNP(濃度100腳。UL~2~1幾)，不論給予上述任何濃度的SNP， 舌下神經(jīng)根放電指標(biāo)與對(duì)照相比都未出現(xiàn)明顯變化;3)灌流給予不同濃 度的nNOs的特異性抑制劑7一I(500娜ol/L~2~ol幾)后，Rc、TE 無(wú)顯著性變化，而隨著給藥時(shí)間的逐漸延長(zhǎng)，TI和IA均同時(shí)出現(xiàn)逐漸 的下降的趨勢(shì):500娜。比7一I實(shí)驗(yàn)組，正常MKS液灌流時(shí)TI為1.39 士0.055、I^為1387.00士65.16林V·ms，給藥后第smin時(shí)Tl為1.01士 0 .055、I^為1274.00士55.82”V·ms(p0.05)，第10min時(shí)TI為0.89士 0.055、IA為1218.00士55.34釁·ms(p0 .05);lmmo比的7一I實(shí)驗(yàn)組， 正常對(duì)照組Tl為1.01士0.185、IA為1642.83士226.90四.ms，給藥后 Slnin，Tl為0.87士 0.145、認(rèn)為1528.43士189.02四·ms(P0 .05)，10rliln 時(shí)，Tl為0 .37士0.125、IA為1278.83士180.92四.ms(P0 .05);Znnno譏 7一I實(shí)驗(yàn)組，，正常對(duì)照的TI為1.17士0.065、IA為1356.00士65.16四·ms， 給藥后smin時(shí)，Tl為0.87士0.055、IA為1190.00士57.82釁.ms(P0 .05)， 給藥10min時(shí)，Tl為0.32士0.035、IA為966.00士58.34四.ms(’I’0 .05)。 7一I的濃度和這種抑制作用還存在量效關(guān)系，10min時(shí)，給予500洲mo比 Tl下降約36%，IA下降12%，Inuno比時(shí)TI下降63%，IA下降22%， 2~泥時(shí)Tl下降73%，IA下降28%;4)單純給予相應(yīng)濃度的7一I 溶劑二甲亞礬(d如ethyl sulfoxide，DMSO)后，舌下神經(jīng)根放電活動(dòng) 無(wú)顯著性變化。 2同步記錄舌下神經(jīng)根和mNRF區(qū)吸氣神經(jīng)元放電活動(dòng)的實(shí) 驗(yàn):l)給藥前，正常MKS灌流時(shí)，吸氣神經(jīng)元放電的平均頻率為 25.39士5.04次HZ，放電時(shí)程為0.5811士0.02975;2)先后分別給予L一A飛、 SNP之后，吸氣神經(jīng)元放電的平均頻率分別為26.79士5.llHz和 26.43土5.02Hz，放電時(shí)程分別為0.5733士0.02535和0.5628士0.02655，與 對(duì)照相比平均頻率和放電時(shí)程并無(wú)顯著性變化(卜0.05);3)給予nNOS 特異性抑制劑7一I之后，吸氣神經(jīng)元的放電時(shí)程為0.1894士0.02475，平 均頻率為17.58士4.78HZ，和對(duì)照相比均顯著性下降(P0 .05)，分別下 降67.4%和30.8%:4)灌流給予上述三種試劑后，TE均未發(fā)生明顯變 化。 結(jié)論1.NO對(duì)節(jié)律性呼吸中吸氣活動(dòng)的抑制作用參與了吸氣中止 機(jī)制;2.NO對(duì)呼吸強(qiáng)度和呼吸頻率均有調(diào)節(jié)作用，但對(duì)前者的作用更 為重要;3.在NO對(duì)基本節(jié)律性呼吸的調(diào)節(jié)過(guò)程中，主要由神經(jīng)元合成 并釋放的內(nèi)源性NO就可能滿足其對(duì)節(jié)律性呼吸的調(diào)節(jié)功能的需要，而 外源性NO，則可能由于對(duì)其需要量不大，或由于其半衰期過(guò)短，所以 在呼吸調(diào)節(jié)中的作用不大;4.NO對(duì)mNRF中吸氣神經(jīng)元的放電時(shí)程和 放電平均頻率有明顯的抑制作用，提示NO對(duì)吸氣中止機(jī)制的影響，可 能是通過(guò)對(duì)mN盯的吸氣神經(jīng)元的作用而實(shí)現(xiàn)的。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍第一軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類號(hào)】：R338

【參考文獻(xiàn)】

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1 王寧黔,吳中海;大鼠面神經(jīng)后核內(nèi)側(cè)區(qū)與腦干呼吸相關(guān)區(qū)間纖維聯(lián)系[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2002年05期

2 高楊,胡德輝,吳中海;新生大鼠離體延髓面神經(jīng)后核內(nèi)側(cè)區(qū)微量注射GABA和BIC對(duì)呼吸節(jié)律的影響[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1999年03期

3 吳中海,胡德輝,高楊,徐小元;新生大鼠離體延髓-脊髓標(biāo)本的呼吸節(jié)律性放電及微切割延髓對(duì)其放電的影響[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1998年04期

4 張楓桐,吳中海,李有仁;阻滯面神經(jīng)后核內(nèi)側(cè)區(qū)對(duì)呼吸節(jié)律的影響[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1989年02期

5 吳中海,張楓桐,李有仁;損毀面神經(jīng)后核內(nèi)側(cè)區(qū)神經(jīng)元胞體對(duì)呼吸節(jié)律的影響[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1992年03期

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7 吳中海,張楓桐,李有仁;家兔面神經(jīng)后核內(nèi)側(cè)區(qū)在呼吸節(jié)律起源中的作用[J];生理學(xué)報(bào);1990年01期

8 吳中海,張楓桐,李有仁;家兔延髓區(qū)域阻滯對(duì)呼吸的影響[J];生理學(xué)報(bào);1988年03期

本文編號(hào)：2644068