【摘要】：目的 利用雜交瘤技術(shù)建立分泌抗旋毛蟲肌幼蟲排泄分泌(ES)抗原單克隆抗體(McAb)雜交瘤細(xì)胞株，并對(duì)其及分泌的McAb進(jìn)行鑒定。 方法 用旋毛蟲肌幼蟲ES抗原免疫BALB／C小鼠，取其脾細(xì)胞與小鼠骨髓瘤SP2／0細(xì)胞融合，，篩選分泌高滴度McAb雜交瘤細(xì)胞株，制備腹水進(jìn)行純化。采用ELISA間接法、央心法、競(jìng)爭(zhēng)法分別測(cè)定培養(yǎng)細(xì)胞上清液及腹水中McAb滴度、相對(duì)親和力和相加效應(yīng)，瓊脂雙擴(kuò)散試驗(yàn)鑒定免疫球蛋白類型，檢測(cè)McAb與日本血吸蟲成蟲抗原、蟲卵抗原、弓形蟲RH株速殖子抗原、豬囊蟲囊液抗原、包蟲囊液抗原、旋毛蟲成蟲表皮抗原、成蟲可溶性抗原、成蟲ES抗原、肌幼蟲可溶性抗原、肌幼蟲48hES抗原、肌幼蟲72hES抗原的交叉反應(yīng)。電鏡觀察雜交瘤細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)，計(jì)數(shù)染色體數(shù)目及觀察雜交瘤細(xì)胞分泌McAb的穩(wěn)定性。 結(jié)果 篩選出2株分泌高滴度抗旋毛蟲肌幼蟲ES抗原McAb雜交瘤細(xì)胞株。電鏡顯示：雜交瘤細(xì)胞具有腫瘤細(xì)胞和漿細(xì)胞的特征，胞漿內(nèi)可見大量分泌顆粒；雜交瘤細(xì)胞染色體數(shù)目平均為98.6條：2株雜交瘤細(xì)胞均能穩(wěn)定分泌McAb；2株McAb均屬IgM類，B2C12株培養(yǎng)上清液和腹水McAb滴度分 天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 別為l:1280和l:2.O48xlod，EllFll株為1:640和l.024x10‘，其中 前者較后者的相對(duì)親和力高;2株McAb識(shí)別ES抗原不同的抗原決定簇; McAb與日本血吸蟲成蟲抗原、蟲卵抗原、弓形蟲RH株速殖子抗原、豬囊 蟲囊液抗原、包蟲囊液抗原、旋毛蟲成蟲表皮抗原、成蟲可溶性抗原、成蟲 ES抗原、肌幼蟲可溶性抗原、肌幼蟲48hES抗原、肌幼蟲72hES抗原均不 發(fā)生交叉反應(yīng)。 至吉士侖 獲得2株抗旋毛蟲肌幼蟲ES抗原雜交瘤細(xì)胞株，均能穩(wěn)定分泌敏感性 強(qiáng)、特異性高的IgM類McAb，并可識(shí)別不同的抗原決定簇，·為進(jìn)一步建立 檢測(cè)旋毛蟲循環(huán)抗原(CAg)、早期診斷旋毛蟲病診斷試劑盒和制備基因工 程抗體準(zhǔn)備了理想的試驗(yàn)材料。
【圖文】：

人工培養(yǎng)的肌幼蟲(x40)

人工培養(yǎng)的肌幼蟲(又100)
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

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本文編號(hào)：2632587