【摘要】： 腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α）是一種由機(jī)體單核巨噬細(xì) 胞釋放的致炎細(xì)胞因子，可加強(qiáng)機(jī)體的抗感染能力。然而，在細(xì)菌等致病因子 活化下，機(jī)體可釋放過(guò)量的TNF-α，其潛在的毒性作用成為促使感染性休克發(fā) 生和發(fā)展的一個(gè)重要因素。本教研室發(fā)現(xiàn)人的中性粒細(xì)胞可以抑制吞噬細(xì)胞 U937釋放TNF-α。在此基礎(chǔ)上，本實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)一步探討人的中性粒細(xì)胞（poly- morphonuclear leukocytes，PMNs）對(duì)人外周血單個(gè)核細(xì)胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMCs）釋放TNF-α的影響及其作用的初步機(jī)理。 實(shí)驗(yàn)采用新鮮采集的健康供血者的外周靜脈血，以葡聚糖沉淀和密度梯度 離心法分離其PMNs和PBMCs，將PMNs細(xì)胞與PBMCs細(xì)胞按2∶1的數(shù)量比 與脂多糖共同培育，然后分別采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定培養(yǎng)上清的TNF-α濃度 和用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定結(jié)合熒光標(biāo)記脂多糖的單核細(xì)胞的百分率及單核細(xì)胞表面 平均熒光強(qiáng)度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1、PBMCs在細(xì)菌脂多糖刺激下釋放TNF-α，而PMNs在細(xì)菌脂多糖刺激 下不釋放TNF-α。PMNs可以抑制PBMCs釋放TNF-α（P＜0.05）。PMNs與PBMCs 按數(shù)量比2∶1共育時(shí)，PMNs的平均抑制率為45％。而紅細(xì)胞不具有類似PMNs 的抑制作用（P＞0.05），顯示PMNs的抑制作用是具有細(xì)胞特異性的。 2、經(jīng)多聚甲醛固定的PMNs仍具有上述的抑制作用（P＜0.05），說(shuō)明PMNs 的抑制效應(yīng)是通過(guò)與PBMCs的相互接觸發(fā)揮的，并提示PMNs表面存在發(fā)揮 該抑制作用的效應(yīng)分子。 3、絲氨酸蛋白酶抑制劑eglin C明顯抑制PBMCs釋放TNF-α（P＜0.05）。 當(dāng)PBMCs與PMNs共育時(shí)，eglin C并不能翻轉(zhuǎn)PMNs對(duì)PBMCs分泌TNF-α 的抑制作用，但PMNs對(duì)PBMCs分泌TNF-α的抑制率在未加eglin C時(shí)較加入 eglin C時(shí)為高（P＜0.05）。 4、使用熒光標(biāo)記細(xì)菌脂多糖及流式細(xì)胞術(shù)觀察PMNs是否影響單核細(xì)胞與 之的結(jié)合。結(jié)果顯示，結(jié)合熒光標(biāo)記脂多糖的單核細(xì)胞的百分率其平均表面熒 光強(qiáng)度均不受PMNs影響（P＞0.05），，單核細(xì)胞與脂多糖結(jié)合隨時(shí)間延長(zhǎng)而增加 （P＜0.05）。因此，PMNs并非通過(guò)阻斷單核細(xì)胞與脂多糖結(jié)合而發(fā)揮抑制效應(yīng)的。 上述結(jié)果表明，PA4NS可抑制人PBMCS釋放TNF。，其機(jī)理可能是通過(guò) 細(xì)胞間的相互接觸，Ph4NS干擾了脂多糖激活PBMCS的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程，抑制細(xì) 菌脂多糖對(duì)其的活化，從而下調(diào)M咐的釋放。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，PMNs對(duì)PBMCs 的抑制作用可能代表著機(jī)體調(diào)控’I’N’F－a生成的一種負(fù)反饋調(diào)節(jié)，對(duì)阻止感染性 休克的發(fā)生及發(fā)展具有一定的病理生理學(xué)意義。
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2000
【分類號(hào)】：R363

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 侯本祥;內(nèi)毒素誘導(dǎo)單核—巨噬細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子的作用機(jī)理[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).口腔醫(yī)學(xué)分冊(cè);1997年04期

2 陳祥銀;中性粒細(xì)胞的生理與病理生理[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;1992年03期

3 姜勇;LPS介導(dǎo)細(xì)胞激活的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo):從CD14到p38MAPK通路的研究[J];生理科學(xué)進(jìn)展;1999年01期

4 顏亮;一種高純度人多形核白細(xì)胞分離方法[J];中國(guó)病理生理雜志;1997年06期

5 顏亮;中性粒細(xì)胞抑制吞噬細(xì)胞U937生成TNF-α[J];中國(guó)病理生理雜志;1999年09期

本文編號(hào)：2609329