一種新型脊髓壓迫動物模型的建立及自噬因子beclin1表達研究
本文關鍵詞:一種新型脊髓壓迫動物模型的建立及自噬因子beclin1表達研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:1、建立一種新型的脊髓壓迫動物模型;2、通過beclin-1等因子的變化趨勢探討自噬在脊髓受壓后的發(fā)展過程及規(guī)律;3、研究動物脊髓受壓后的影像學、病理學變化。方法:將一種吸水后可以發(fā)生體積膨脹的材料植入SD大鼠的C6-C7硬膜外間隙。從而對SD大鼠脊髓造成壓迫,但是不造成運動功能障礙。建立一種脊髓受壓但是無運動功能障礙的新型脊髓壓迫動物模型。將30只體重為200g-250g SD大鼠隨機分為對照組及實驗組。首先通過后路手術暴露SD大鼠頸椎椎板,然后將吸水膨脹材料植入大鼠C6-C7硬膜外間隙。對照組SD大鼠行假手術,即不植入吸水膨脹材料。術后待SD大鼠清醒后觀察其運動功能,如果出現四肢痙攣、無力、四肢運動不協(xié)調等運動功能障礙表現時即表明手術對實驗動物造成急性損傷,隨即淘汰該實驗動物并進行樣本補充。術后1天、3天、7天、10天、14天分別處死實驗組及對照組SD大鼠各3只,進行運動行為學(BBB評分)、MRI、HE、TUNEL染色及Beclin-1免疫組織化學染色檢測。觀察上述指標在不同時間段的變化趨勢。統(tǒng)計學方法:計量資料采用樣本均數±標準差表示。符合正態(tài)分布的計量資料采用配對T檢驗,實驗組及對照組組內采用SNK-q檢驗,P0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。結果:術后各時間點進行MRI檢查,結果表明吸水膨脹材料進入C6-C7硬膜外間隙,無脫出及滑移,并造成椎管內脊髓壓迫。術后實驗組及對照組動物在各個時間點未出現運動功能障礙。HE染色顯示實驗組受壓節(jié)段脊髓出現明顯壓跡,神經元細胞變性、空泡樣變。TUNEL凋亡檢測發(fā)現從造模后1天開始出現陽性細胞,對照組相應節(jié)段脊髓則未出現相應變化。Beclin-1免疫組化染色檢測表明:造模后對照組Beclin1陽性細胞有少量表達。實驗組Beclin-1陽性細胞于造模后第1天開始升高,第7天達到峰值,造模后第14天表達量與對照組無統(tǒng)計學差異(P0.05)。結論:本實驗所建立的脊髓壓迫動物模型可以較好模擬在脊髓受到壓迫后的病理、生理變化,模型建立過程簡單,可進行各種相關檢查,結果可重復性較好,實驗動物術后生存率較高,是研究此類疾病可靠的動物模型。HE染色及TUNEL凋亡細胞檢測結果表明此模型可模擬脊髓受到慢性壓迫后的病理改變及細胞凋亡現象。在脊髓受到壓迫后不同時間點beclin-1陽性細胞變化規(guī)律表明:自噬可能參與脊髓慢性損傷后的病理生理變化過程,但其確切機制及發(fā)揮的作用仍需要進一步的研究。
【關鍵詞】:慢性脊髓損傷 動物模型 自噬 凋亡 beclin-1
【學位授予單位】:山西醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R744;R-332
【目錄】:
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-10
- 常用縮寫詞中英文對照表10-11
- 前言11-12
- 1 材料與方法12-20
- 1.1 材料與儀器12-13
- 1.2 實驗動物13
- 1.3 壓迫材料的制備13-14
- 1.4 脊髓慢性壓迫模型的建立14-15
- 1.5 術后護理15
- 1.6 脊髓標本采集15-16
- 1.7 切片及染色16-19
- 1.8 統(tǒng)計學方法及圖像分析19-20
- 2 結果20-34
- 2.1 一般結果20
- 2.2 HE結果20-22
- 2.3 免疫組化22-25
- 2.4 TUNEL檢測25-28
- 2.5 MRI28-33
- 2.6 BBB評分33-34
- 3 討論34-39
- 4 結論39-40
- 參考文獻40-43
- 綜述43-52
- 參考文獻49-52
- 附錄52-54
- 致謝54-55
- 在學期間發(fā)表的學術論文與研究成果55-56
- 個人簡歷56
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