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一種新型脊髓壓迫動(dòng)物模型的建立及自噬因子beclin1表達(dá)研究

發(fā)布時(shí)間:2017-03-22 00:01

  本文關(guān)鍵詞:一種新型脊髓壓迫動(dòng)物模型的建立及自噬因子beclin1表達(dá)研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:1、建立一種新型的脊髓壓迫動(dòng)物模型;2、通過beclin-1等因子的變化趨勢(shì)探討自噬在脊髓受壓后的發(fā)展過程及規(guī)律;3、研究動(dòng)物脊髓受壓后的影像學(xué)、病理學(xué)變化。方法:將一種吸水后可以發(fā)生體積膨脹的材料植入SD大鼠的C6-C7硬膜外間隙。從而對(duì)SD大鼠脊髓造成壓迫,但是不造成運(yùn)動(dòng)功能障礙。建立一種脊髓受壓但是無運(yùn)動(dòng)功能障礙的新型脊髓壓迫動(dòng)物模型。將30只體重為200g-250g SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組。首先通過后路手術(shù)暴露SD大鼠頸椎椎板,然后將吸水膨脹材料植入大鼠C6-C7硬膜外間隙。對(duì)照組SD大鼠行假手術(shù),即不植入吸水膨脹材料。術(shù)后待SD大鼠清醒后觀察其運(yùn)動(dòng)功能,如果出現(xiàn)四肢痙攣、無力、四肢運(yùn)動(dòng)不協(xié)調(diào)等運(yùn)動(dòng)功能障礙表現(xiàn)時(shí)即表明手術(shù)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造成急性損傷,隨即淘汰該實(shí)驗(yàn)動(dòng)物并進(jìn)行樣本補(bǔ)充。術(shù)后1天、3天、7天、10天、14天分別處死實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組SD大鼠各3只,進(jìn)行運(yùn)動(dòng)行為學(xué)(BBB評(píng)分)、MRI、HE、TUNEL染色及Beclin-1免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)。觀察上述指標(biāo)在不同時(shí)間段的變化趨勢(shì)。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:計(jì)量資料采用樣本均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料采用配對(duì)T檢驗(yàn),實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組組內(nèi)采用SNK-q檢驗(yàn),P0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行MRI檢查,結(jié)果表明吸水膨脹材料進(jìn)入C6-C7硬膜外間隙,無脫出及滑移,并造成椎管內(nèi)脊髓壓迫。術(shù)后實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組動(dòng)物在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)未出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)功能障礙。HE染色顯示實(shí)驗(yàn)組受壓節(jié)段脊髓出現(xiàn)明顯壓跡,神經(jīng)元細(xì)胞變性、空泡樣變。TUNEL凋亡檢測(cè)發(fā)現(xiàn)從造模后1天開始出現(xiàn)陽性細(xì)胞,對(duì)照組相應(yīng)節(jié)段脊髓則未出現(xiàn)相應(yīng)變化。Beclin-1免疫組化染色檢測(cè)表明:造模后對(duì)照組Beclin1陽性細(xì)胞有少量表達(dá)。實(shí)驗(yàn)組Beclin-1陽性細(xì)胞于造模后第1天開始升高,第7天達(dá)到峰值,造模后第14天表達(dá)量與對(duì)照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)所建立的脊髓壓迫動(dòng)物模型可以較好模擬在脊髓受到壓迫后的病理、生理變化,模型建立過程簡(jiǎn)單,可進(jìn)行各種相關(guān)檢查,結(jié)果可重復(fù)性較好,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物術(shù)后生存率較高,是研究此類疾病可靠的動(dòng)物模型。HE染色及TUNEL凋亡細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果表明此模型可模擬脊髓受到慢性壓迫后的病理改變及細(xì)胞凋亡現(xiàn)象。在脊髓受到壓迫后不同時(shí)間點(diǎn)beclin-1陽性細(xì)胞變化規(guī)律表明:自噬可能參與脊髓慢性損傷后的病理生理變化過程,但其確切機(jī)制及發(fā)揮的作用仍需要進(jìn)一步的研究。
【關(guān)鍵詞】:慢性脊髓損傷 動(dòng)物模型 自噬 凋亡 beclin-1
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R744;R-332
【目錄】:
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-10
  • 常用縮寫詞中英文對(duì)照表10-11
  • 前言11-12
  • 1 材料與方法12-20
  • 1.1 材料與儀器12-13
  • 1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
  • 1.3 壓迫材料的制備13-14
  • 1.4 脊髓慢性壓迫模型的建立14-15
  • 1.5 術(shù)后護(hù)理15
  • 1.6 脊髓標(biāo)本采集15-16
  • 1.7 切片及染色16-19
  • 1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法及圖像分析19-20
  • 2 結(jié)果20-34
  • 2.1 一般結(jié)果20
  • 2.2 HE結(jié)果20-22
  • 2.3 免疫組化22-25
  • 2.4 TUNEL檢測(cè)25-28
  • 2.5 MRI28-33
  • 2.6 BBB評(píng)分33-34
  • 3 討論34-39
  • 4 結(jié)論39-40
  • 參考文獻(xiàn)40-43
  • 綜述43-52
  • 參考文獻(xiàn)49-52
  • 附錄52-54
  • 致謝54-55
  • 在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果55-56
  • 個(gè)人簡(jiǎn)歷56

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  本文關(guān)鍵詞:一種新型脊髓壓迫動(dòng)物模型的建立及自噬因子beclin1表達(dá)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):260487

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