本文關(guān)鍵詞：乳腺癌細胞移植瘤模型的建立及小動物超聲和活體熒光成像中的應用比較，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：乳腺癌是女性常見的一種高度異質(zhì)性的惡性腫瘤，我國目前乳腺癌發(fā)病率正以每年2%-3%的速度增長。乳腺癌細胞MDA-MB-231屬于三陰性乳腺癌，是Basal B亞型的一種，細胞來源于胸水，為轉(zhuǎn)移型腺癌。由于其高侵襲和高轉(zhuǎn)移特性，是目前乳腺癌中預后最差的一種亞型。 裸鼠出現(xiàn)于1966年，編碼叉頭蛋白家族的一種轉(zhuǎn)錄因子FoxN1和fork-head box N1，這兩個基因發(fā)生突變生成裸鼠。FoxN1在嚙齒類和人類中，其序列和功能是高度保守的。在小鼠、大鼠和人體中，F(xiàn)oxN1突變可導致胸腺先天發(fā)育不全和無毛皮膚。在人體中，F(xiàn)oxN1突變可引起人類脫發(fā)和指甲營養(yǎng)不良，并導致初級T-細胞缺乏癥相關(guān)的嚴重感染。而FoxN1突變小鼠的結(jié)果是生成裸鼠，裸鼠由于其T細胞發(fā)育免疫缺陷和毛囊發(fā)育功能衰竭,已經(jīng)作為一個模型被廣泛應用于實驗腫瘤、免疫學和移植研究。 小動物超聲和活體熒光成像是現(xiàn)代動物實驗的兩種實驗方法，相較于病理切片分析需要處死實驗動物來檢測具體的實驗進程，前兩種實驗技術(shù)可以在無創(chuàng)傷的情況下，對動物模型的發(fā)生發(fā)展進行檢測，同時由于實驗前后一直使用同一只或同一批小鼠，，能減小個體差異，從而減小實驗誤差。但是這兩種實驗手段也有區(qū)別，比如小動物超聲可以通過運用不同頻率的探頭來檢測動物不同的器官，而活體熒光成像卻不能定位，但是活體熒光成像可以直觀的觀察到熒光表達部位，無需一步步排查。 本研究將表達GFP的乳腺癌細胞MDA-MB-231移植到裸鼠體內(nèi)，成功建立乳腺癌移植瘤模型，利用小動物超聲成像和活體熒光成像監(jiān)測移植瘤的發(fā)生、發(fā)展過程，比較在此過程中小動物超聲成像和活體熒光成像的不同作用。 目的： 1．建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型。 2．觀察小動物超聲成像在乳腺癌移植瘤研究中的作用。 3．觀察活體熒光成像在乳腺癌移植瘤研究中的作用。 方法： 1．將穩(wěn)定表達GFP的乳腺癌細胞MDA-MB-231接種于裸鼠右側(cè)乳腺處，建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型。 2．用0.1g/ml的戊巴比妥鈉麻醉裸鼠，用小動物超聲成像監(jiān)測乳腺癌裸鼠移植瘤的發(fā)生發(fā)展過程。 3．用0.1g/ml的戊巴比妥鈉麻醉裸鼠，用小動物活體熒光成像監(jiān)測乳腺癌裸鼠移植瘤的發(fā)生發(fā)展過程。 4．腫瘤第28天處死裸鼠，取裸鼠的移植瘤做切片HE染色。 結(jié)果： 1．成功構(gòu)建乳腺癌裸鼠移植瘤模型。 2．HE染色結(jié)果： 移植瘤為間葉性瘤，多有纖維細胞組成，所含的癌細胞相對較少，癌細胞形狀不規(guī)則、有分裂相、核大且染色較深、核質(zhì)較大，呈現(xiàn)分化程度較低特征，可見有小血管形成。 3．小動物超聲成像監(jiān)測乳腺癌移植瘤的發(fā)生發(fā)展過程： （1）在種瘤的第3天未檢測到腫瘤影像。 （2）在種瘤的第7天右側(cè)胸部淺表軟組織超聲可見不均質(zhì)實質(zhì)性略低回聲，面積為2.37mm2，長徑為2.44mm，短徑為0.28mm，其邊界欠清晰。 （3）在種瘤的第14天右側(cè)胸部淺表軟組織超聲可見增大的不均質(zhì)實質(zhì)性略低回聲，面積為6.62mm2，長徑為3.68mm，短徑為1.66mm，其內(nèi)有點狀分布的高回聲，邊界欠清晰。 （4）在種瘤的第21天右側(cè)胸部淺表軟組織超聲可見明顯增大的實質(zhì)性較低回聲，面積為21.99mm2，長徑為7.59mm，短徑為3.33mm，其邊界不清，其內(nèi)靠近瘤體表面可見大片狀高回聲。 （5）在種瘤的第28天右側(cè)胸部淺表軟組織超聲可見明顯突出于胸部的較大實質(zhì)性低回聲，面積為52.00mm2，長徑為9.28mm，短徑為8.06mm，其邊界不清，其內(nèi)靠近瘤體表面可見片狀高回聲區(qū)范圍明顯增大。 4．活體熒光成像在種瘤當天，即0天即可觀察到GFP的表達，但是第7天時未檢查到熒光的表達，第14天熒光高強度表達，且隨時間逐漸增強。 結(jié)論： 1．成功構(gòu)建乳腺癌裸鼠移植瘤模型。 2．活體熒光成像在監(jiān)測移植瘤發(fā)生發(fā)展較早期具有較高的靈敏度。 3．小動物超聲在監(jiān)測移植瘤發(fā)生發(fā)展過程中、晚期，具有較高的靈敏度及準確性，并且在操作上更簡單、方便。 4．相對于病理分析,小動物超聲以其實時監(jiān)測的優(yōu)勢,保證活體動物實驗的連續(xù)性及一致性,可降低實驗誤差,顯示其獨道的動物實驗優(yōu)勢。
【關(guān)鍵詞】：乳腺癌 移植瘤模型 小動物超聲 活體熒光成像
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R445.1;R737.9;R-332
【目錄】：

• 中文摘要4-8
• Abstract8-13
• 目錄13-15
• 英文縮寫詞表15-16
• 第1篇 緒論16-25
• 1.1 裸鼠移植瘤模型16-18
• 1.2 小動物超聲成像18-21
• 1.3 活體熒光成像21-25
• 第2篇 實驗研究25-50
• 實驗一 裸鼠乳腺癌移植瘤模型的建立25-34
• 1.1 實驗材料25-27
• 1.1.1 主要試劑25
• 1.1.2 主要儀器設(shè)備25-26
• 1.1.3 主要試劑配制26-27
• 1.1.4 細胞株27
• 1.1.5 實驗動物27
• 1.2 實驗方法27-29
• 1.2.1 細胞培養(yǎng)27-28
• 1.2.2 乳腺癌移植瘤模型的建立28
• 1.2.3 HE 染色28-29
• 1.3 實驗結(jié)果29-31
• 1.3.1 成功建立裸鼠移植瘤模型29
• 1.3.2 第 28 天的乳腺癌細胞移植瘤 HE 染色29-31
• 討論31-33
• 小結(jié)33-34
• 實驗二 小動物超聲和活體熒光成像在乳腺癌移植瘤模型中的應用比較34-50
• 2.1 實驗材料34
• 2.1.1 主要試劑34
• 2.1.2 主要儀器設(shè)備34
• 2.2 實驗方法34-35
• 2.2.1 小動物超聲圖像的采集34-35
• 2.2.2 活體熒光圖像的采集35
• 2.3 實驗結(jié)果35-45
• 2.3.1 乳腺癌細胞移植 3 天時的小動物超聲圖像35-36
• 2.3.2 乳腺癌細胞移植 7 天時的小動物超聲圖像36-37
• 2.3.3 乳腺癌細胞移植 14 天時的小動物超聲圖像37
• 2.3.4 乳腺癌細胞移植 21 天時的小動物超聲圖像37-38
• 2.3.5 乳腺癌細胞移植 28 天時的小動物超聲圖像38-39
• 2.3.6 精確 GFP 的激發(fā)光和吸收光波長39
• 2.3.7 乳腺癌細胞移植 0 天時的活體熒光圖像39-40
• 2.3.8 乳腺癌細胞移植 3 天時的活體熒光圖像40-41
• 2.3.9 乳腺癌細胞移植 7 天時的活體熒光圖像41
• 2.3.10 乳腺癌細胞移植 14 天時的活體熒光圖像41-42
• 2.3.11 乳腺癌細胞移植 21 天時的活體熒光圖像42-43
• 2.3.12 乳腺癌細胞移植 28 天時的活體熒光圖像43
• 2.3.13 裸鼠模型移植瘤和主要臟器的熒光圖像43-45
• 討論45-49
• 小結(jié)49-50
• 第3篇結(jié)論50-51
• 參考文獻51-56
• 作者簡介及在學期間所取得的科研成果56-57
• 致謝57

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李良;汪軍;范其坤;丁琦;褚芳;;蘆筍對人胃癌細胞MKN45裸鼠模型抑制腫瘤生長的初探[J];科技廣場;2010年10期

2 鄧立新;程福成;;動物超聲診斷技術(shù)在我國的應用現(xiàn)狀[J];中國牧業(yè)通訊;2008年10期

3 鄧鴻業(yè),方偉崗,王兆綽,丁桂鳳,黃大無;載異種移植瘤的裸鼠Ig分泌細胞的檢測[J];免疫學雜志;1988年03期

4 錢愛平;花國然;戴麗娟;;綠色熒光蛋白在腫瘤活體光學成像中的應用新進展[J];南通大學學報(自然科學版);2010年02期

5 崔光輝;張超;郭新;秦潔;桂耀庭;蔡志明;;移植大鼠生精干細胞到裸鼠生精小管實驗系統(tǒng)的建立[J];中國男科學雜志;2009年02期

6 馬會利;王秩秋;錢鋒;梁興杰;;用活體小動物SPECT/CT影像系統(tǒng)檢測納米材料和藥物在體內(nèi)的生物效應[J];生物物理學報;2010年08期

7 宿華威;崔云甫;吳德全;韓德恩;;活體生物螢光成像技術(shù)新進展[J];世界華人消化雜志;2006年24期

8 邊素艷;蓋魯粵;葉平;楊月峰;王華;郭子寬;王立生;;應用生物發(fā)光成像技術(shù)示蹤植入的骨髓間充質(zhì)干細胞[J];中國實驗血液學雜志;2009年05期

9 邰文;袁永兵;鄭禮勝;陳常青;;活體腫瘤成像技術(shù)的研究進展[J];藥物評價研究;2012年01期

10 朱淼鑫;姚明;;小動物活體成像技術(shù)的應用[J];中國比較醫(yī)學雜志;2011年03期

  本文關(guān)鍵詞：乳腺癌細胞移植瘤模型的建立及小動物超聲和活體熒光成像中的應用比較，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：259886