【摘要】： 目的:轉(zhuǎn)錄因子NF- B是一種廣泛存在于真核細(xì)胞內(nèi),能將信息從胞質(zhì)傳至胞核引起相應(yīng)基因表達(dá)的重要轉(zhuǎn)錄因子。關(guān)于NF- B p65在調(diào)節(jié)外周耐受方面的作用尚未見報(bào)道。本課題利用供者特異性脾細(xì)胞輸注(donor specific spleen cell transfusion, DST)誘導(dǎo)外周耐受后,觀察小鼠不同組織細(xì)胞內(nèi)NF- B p65活性的變化,以探討其在外周耐受發(fā)生過程中的活性改變及其意義。 方法:實(shí)驗(yàn)以BALB/c小鼠為供者,輸注1×108個(gè)供者脾細(xì)胞3天和7天的C3H小鼠為受者,建立皮膚移植模型,每天觀察移植物的生長情況并于術(shù)后第7天取移植皮片和脾臟,通過對移植物的存活時(shí)間、移植皮片的組織病理學(xué)檢查和抗原特異性淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)(Alamarblue染色)來了解免疫功能的改變;并以免疫組化染色方法(SP染色)檢測小鼠脾臟和皮膚移植物中NF- B p65活性的變化。 結(jié)果:輸注后第7天手術(shù)組、輸注后第3天手術(shù)組和對照組皮膚移植物的存活時(shí)間(MST)分別為(15.67±1.24)d、(11.33±1.25)d和(11.25±2.05)d(n=5)。與對照組相比較,輸注后第7天手術(shù)組皮膚移植物MST明顯延長(p㩳0.05);輸注后第3天手術(shù)組則無顯著性差異(p㧐0.05)。將抗原特異性淋巴細(xì)胞經(jīng)Alamarblue活細(xì)胞染色后,各組還原率為( 14.9804±0.82473 ) %、(14.7864±0.79468)%和(21.0488±2.39681)%。與對照組相比較,輸注后第3天手術(shù)組和輸注后第7天手術(shù)組抗原特異性淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)均明顯受抑制(p㩳0.05)。對照組和輸注后第3天手術(shù)組移植皮片的組織層次和血管結(jié)構(gòu)均不清晰,并可見彌漫性的淋巴細(xì)胞浸潤;輸注后第7天手術(shù)組僅見少量的淋巴細(xì)胞浸潤,且皮片的組織層次和血管結(jié)構(gòu)均完整無明顯壞死。各組皮膚移植物NF- B p65表達(dá)陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)分別為(62.356±16.626)%、(25.452±18.650)%和(26.343±23.980)%;各組脾臟細(xì)胞NF- B p65表達(dá)陽性率分別為(5.37±0.523)%、(8.815±1.775)%和(11.08±1.0173)%。與對照組相比較,輸注后第3天手術(shù)組受體移植皮片及周圍組織中NF- B p65的活性無顯著性差異(p㧐0.05);輸注后第7天手術(shù)組受體移植皮片及周圍組織中NF- B p65的活性增加(p㩳0.05)。與對照組相比較,輸注后第3天手術(shù)組受體脾臟中NF- B p65的活性無顯著性差異(p㧐0.05);輸注后第7天手術(shù)組受體脾臟中NF- B p65的活性降低(p㩳0.05)。 結(jié)論:移植前7d經(jīng)尾靜脈輸注供者特異性脾細(xì)胞可誘導(dǎo)外周免疫耐受。外周耐受的產(chǎn)生可能與不同部位的免疫細(xì)胞內(nèi)NF- B p65活性改變有關(guān)。
【圖文】：

圖 1 術(shù)后第 7 天小鼠皮膚移植物組織病理學(xué)檢查結(jié)果（HE 染色×400）A：對照組；B：輸注后第 3 天手術(shù)組；C：輸注后第 7 天手術(shù)組。Fig.1 Histologic examination of skin allografts at 7days after transplantation(HE×400)

術(shù)后第7天小鼠皮膚移植物及脾臟免疫組化檢查結(jié)果（SP染色×400）
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R392

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2597491