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供者特異性脾細胞輸注誘導外周耐受小鼠不同組織細胞內NF-κB p65的活性變化

發(fā)布時間:2020-03-24 00:14
【摘要】: 目的:轉錄因子NF- B是一種廣泛存在于真核細胞內,能將信息從胞質傳至胞核引起相應基因表達的重要轉錄因子。關于NF- B p65在調節(jié)外周耐受方面的作用尚未見報道。本課題利用供者特異性脾細胞輸注(donor specific spleen cell transfusion, DST)誘導外周耐受后,觀察小鼠不同組織細胞內NF- B p65活性的變化,以探討其在外周耐受發(fā)生過程中的活性改變及其意義。 方法:實驗以BALB/c小鼠為供者,輸注1×108個供者脾細胞3天和7天的C3H小鼠為受者,建立皮膚移植模型,每天觀察移植物的生長情況并于術后第7天取移植皮片和脾臟,通過對移植物的存活時間、移植皮片的組織病理學檢查和抗原特異性淋巴細胞增殖試驗(Alamarblue染色)來了解免疫功能的改變;并以免疫組化染色方法(SP染色)檢測小鼠脾臟和皮膚移植物中NF- B p65活性的變化。 結果:輸注后第7天手術組、輸注后第3天手術組和對照組皮膚移植物的存活時間(MST)分別為(15.67±1.24)d、(11.33±1.25)d和(11.25±2.05)d(n=5)。與對照組相比較,輸注后第7天手術組皮膚移植物MST明顯延長(p㩳0.05);輸注后第3天手術組則無顯著性差異(p㧐0.05)。將抗原特異性淋巴細胞經Alamarblue活細胞染色后,各組還原率為( 14.9804±0.82473 ) %、(14.7864±0.79468)%和(21.0488±2.39681)%。與對照組相比較,輸注后第3天手術組和輸注后第7天手術組抗原特異性淋巴細胞的增殖反應均明顯受抑制(p㩳0.05)。對照組和輸注后第3天手術組移植皮片的組織層次和血管結構均不清晰,并可見彌漫性的淋巴細胞浸潤;輸注后第7天手術組僅見少量的淋巴細胞浸潤,且皮片的組織層次和血管結構均完整無明顯壞死。各組皮膚移植物NF- B p65表達陽性細胞百分數分別為(62.356±16.626)%、(25.452±18.650)%和(26.343±23.980)%;各組脾臟細胞NF- B p65表達陽性率分別為(5.37±0.523)%、(8.815±1.775)%和(11.08±1.0173)%。與對照組相比較,輸注后第3天手術組受體移植皮片及周圍組織中NF- B p65的活性無顯著性差異(p㧐0.05);輸注后第7天手術組受體移植皮片及周圍組織中NF- B p65的活性增加(p㩳0.05)。與對照組相比較,輸注后第3天手術組受體脾臟中NF- B p65的活性無顯著性差異(p㧐0.05);輸注后第7天手術組受體脾臟中NF- B p65的活性降低(p㩳0.05)。 結論:移植前7d經尾靜脈輸注供者特異性脾細胞可誘導外周免疫耐受。外周耐受的產生可能與不同部位的免疫細胞內NF- B p65活性改變有關。
【圖文】:

輸注,HE染色,對照組


圖 1 術后第 7 天小鼠皮膚移植物組織病理學檢查結果(HE 染色×400)A:對照組;B:輸注后第 3 天手術組;C:輸注后第 7 天手術組。Fig.1 Histologic examination of skin allografts at 7days after transplantation(HE×400)

供者特異性脾細胞輸注誘導外周耐受小鼠不同組織細胞內NF-κB p65的活性變化


術后第7天小鼠皮膚移植物及脾臟免疫組化檢查結果(SP染色×400)
【學位授予單位】:華中科技大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2006
【分類號】:R392

【參考文獻】

相關期刊論文 前6條

1 王重慶,李啟靖,關迎輝,彭剛,郭亞遷;小鼠皮膚移植特異耐受性的獲得[J];北京大學學報(自然科學版);1998年04期

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本文編號:2597491

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