發(fā)布時(shí)間：2020-02-06 14:15

【摘要】：目的:探討在熱休克條件下,人胚肺二倍體細(xì)胞MRC-5株誘導(dǎo)型熱休克蛋白70(HSP70)在細(xì)胞水平的表達(dá)機(jī)制,以及對(duì)MRC-5細(xì)胞衰老的影響。 方法:用熱休克處理誘導(dǎo)MRC-5細(xì)胞HSP70的表達(dá),同時(shí)采用HSP70反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染MRC-5細(xì)胞做對(duì)照,分別置42℃恒溫水浴30min、1h、2h、4h,及每日水浴1h共3d和5d,各組細(xì)胞均在37℃復(fù)溫,于復(fù)溫后4h固定。流式細(xì)胞儀測(cè)定誘導(dǎo)型HSP70的表達(dá)及細(xì)胞凋亡,黃嘌呤氧化酶法測(cè)定細(xì)胞超氧化物歧化酶(SOD)總活力,衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色及顯微鏡觀察并采圖。 結(jié)果:(1)在熱休克條件下的不同時(shí)相,MRC-5細(xì)胞誘導(dǎo)型HSP70的表達(dá)隨熱處理時(shí)間延長(zhǎng)而增加,且均高于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組水平,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(2)在熱休克條件下的不同時(shí)相,MRC-5細(xì)胞SOD總活力隨熱處理時(shí)間延長(zhǎng)而增高,均高于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組水平,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(3)經(jīng)反義寡核苷酸處理的細(xì)胞,在熱處理第三天及第五天,β-半乳糖苷酶染色陽(yáng)性表達(dá)率高于實(shí)驗(yàn)組。 結(jié)論:熱處理方法可成功誘導(dǎo)MRC-5細(xì)胞表達(dá)HSP70,隨熱處理時(shí)間延長(zhǎng),MRC-5細(xì)胞誘導(dǎo)型HSP70表達(dá)增加,誘導(dǎo)型HSP70可能通過(guò)增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)源性抗氧自由基能力,影響MRC-5細(xì)胞的衰老進(jìn)程。
【圖文】：

采用黃嗓嶺氧化酶原理檢測(cè)各組超氧化物歧化酶總活力，結(jié)果顯示，正義組與單純熱處理組隨熱處理時(shí)間延長(zhǎng)，細(xì)胞SOD總活力增加，，且高于同時(shí)相的反義組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<.005)。(見(jiàn)表3，圖3)

級(jí)碩士論文附
【學(xué)位授予單位】：四川大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：R363

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

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本文編號(hào)：2576916