【摘要】：近年,隨著細胞生物學、分子腫瘤學、實驗胚胎學、實驗腫瘤學以及免疫胚胎學的發(fā)展,對胚胎發(fā)育與腫瘤形成的對比研究不斷深入。大量的實驗研究發(fā)現(xiàn),在胚胎發(fā)育與腫瘤形成之間存在著諸多相似之處。這主要表現(xiàn)在腫瘤細胞與早期胚胎細胞均為發(fā)育學上的“年輕”細胞,擁有強大的生命力和旺盛的增殖與生長能力,有許多相同的基因表達(癌基因/抑癌基因、異位激素、異位同功酶、胚胎抗原等),相似的血管形成和免疫逃逸機制,特別是腫瘤細胞侵襲與胚胎植入(滋養(yǎng)層細胞侵襲子宮內(nèi)膜),兩者均具有活躍的侵襲細胞外基質(zhì)能力。 雖然 nm23 基因是一個腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因,但是其相關(guān)蛋白 NDPK 是一種廣泛存在于細胞漿和細胞膜的多功能酶,具有復雜生物學功能。由此推斷該基因在胚胎植入過程中可能也具有重要作用。 目 的: 本研究擬通過構(gòu)建 nm23-M1 基因原核表達載體,制備抗 nm23-M1 多克隆抗體,并進一步對其在胚胎植入過程中的作用作初步的探討。 方 法: 1.提取小鼠組織中的總 RNA,運用 RT-PCR 方法和基因克隆技術(shù)獲得 nm23-M1 基因片段,將目的片段轉(zhuǎn)入質(zhì)粒載體 pQE30,構(gòu)建pQE30/nm23-M1 重組子,用酶切和雙向 DNA 測序進行鑒定。 2.把陽性重組子轉(zhuǎn)入大腸桿菌表達宿主菌 SG13009 中,并對表達蛋白進行鑒定。用表達的重組蛋白免疫新西蘭兔,獲得抗 nm23-M1 抗體。 3.利用不同劑量的純化的抗 nm23-M1 抗體對妊娠第 2 天(D2)的
【圖文】：

質(zhì)粒pQE30的結(jié)構(gòu)圖

載體構(gòu)建示意圖
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2005
【分類號】：R321

【引證文獻】

相關(guān)碩士學位論文 前2條

1 陳珊珊;表皮生長因子受體Ⅲ型突變體（EGFRvⅢ）多克隆抗體的純化及其特異性的初步研究[D];北京交通大學;2008年

2 孫文文;斑節(jié)對蝦ANT基因與nm23基因的cDNA克隆及表達分析[D];上海海洋大學;2012年

，

本文編號：2576049