SD大鼠皮質(zhì)骨來源間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)與鑒定
發(fā)布時間:2019-12-04 11:34
【摘要】:【目的】研究大鼠皮質(zhì)骨來源間充質(zhì)干細胞(MSCs)的分離培養(yǎng)及鑒定的方法!痉椒ā咳PF級體質(zhì)量60~80 g的SD大鼠3只,運用骨髓貼壁法及膠原酶消化皮質(zhì)骨法培養(yǎng)間充質(zhì)干細胞,進行形態(tài)學(xué)觀察、體外增殖能力考察、細胞周期分析、細胞表面抗原免疫熒光鑒定,并采用茜素紅染色和油紅O染色鑒定所培養(yǎng)細胞的成骨與成脂分化潛能!窘Y(jié)果】膠原酶消化皮質(zhì)骨法及骨髓貼壁法均能有效分離純化大鼠MSCs,經(jīng)形態(tài)學(xué)、細胞表面抗原免疫熒光鑒定、成骨及成脂分化能力檢測證實為間充質(zhì)干細胞。【結(jié)論】自骨髓及皮質(zhì)骨均能實現(xiàn)間充質(zhì)干細胞的分離純化,但皮質(zhì)骨間充質(zhì)干細胞來源廣泛,原代不受血細胞干擾,是骨髓來源間充質(zhì)干細胞的很好補充。
【圖文】:
ぶ使搶叢?(圖1-F)間充質(zhì)干細胞呈梭形生長,少數(shù)呈多角形,細胞核染成紫紅色。2.2生長曲線2種方法培養(yǎng)的間充質(zhì)干細胞P1代細胞生長曲線相似,圖2結(jié)果顯示:細胞3~7d處于對數(shù)生長期,之后細胞生長到達平臺期。2.3細胞周期流式細胞儀細胞周期分析結(jié)果顯示:骨髓間充質(zhì)干細胞84.91%處于G0/G1期(圖3-A),皮質(zhì)骨間充質(zhì)干細胞88.04%處于G0/G1期(圖3-B),表明骨髓與皮質(zhì)骨來源間充質(zhì)干細胞都具有較強增殖潛能。圖2P1代骨髓來源與皮質(zhì)骨來源間充質(zhì)干細胞生長曲線Figure2GrowthcurveofP1generationofbonemarroworiginandcorticalbonederivedmesenchymalstemcellsDt/d13579第3期453
廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報2014年第3期0.60.40.20-0.2-0.4-0.6-0.8相關(guān)系數(shù)IL-4(pg/mL)IFN-γ(pg/mL)Th1/Th2IL-17(pg/mL)T-betGATA-3T-bet/GATA-3RORgammat①①①①①①①FEV0.3(mL)FEV0.3/FVC(%)PEF(mL/s)肺功能參數(shù)圖3肺功能參數(shù)與其他指標相關(guān)性分析Figure3Correlationoflungfunctionindexeswithotherindicators(“SD大鼠皮質(zhì)骨來源間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)與鑒定”的彩圖,正文見第453頁)骨髓來源皮質(zhì)骨來源原代第2天第3代第2代Giemsa染色圖1不同時期骨髓來源和皮質(zhì)骨來源間充質(zhì)干細胞的形態(tài)學(xué)觀察(×100)Figure1Morphologyofbonemarroworiginandcorticalbonederivedmesenchymalstemcellsatdifferentphases(×100)①P<0.05(“基于T-bet、GATA-3、RORgammat調(diào)控Th細胞研究六味補氣膠囊對慢性阻塞性肺病大鼠肺功能的影響”的彩圖,,正文見第407頁)494
【圖文】:
ぶ使搶叢?(圖1-F)間充質(zhì)干細胞呈梭形生長,少數(shù)呈多角形,細胞核染成紫紅色。2.2生長曲線2種方法培養(yǎng)的間充質(zhì)干細胞P1代細胞生長曲線相似,圖2結(jié)果顯示:細胞3~7d處于對數(shù)生長期,之后細胞生長到達平臺期。2.3細胞周期流式細胞儀細胞周期分析結(jié)果顯示:骨髓間充質(zhì)干細胞84.91%處于G0/G1期(圖3-A),皮質(zhì)骨間充質(zhì)干細胞88.04%處于G0/G1期(圖3-B),表明骨髓與皮質(zhì)骨來源間充質(zhì)干細胞都具有較強增殖潛能。圖2P1代骨髓來源與皮質(zhì)骨來源間充質(zhì)干細胞生長曲線Figure2GrowthcurveofP1generationofbonemarroworiginandcorticalbonederivedmesenchymalstemcellsDt/d13579第3期453
廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報2014年第3期0.60.40.20-0.2-0.4-0.6-0.8相關(guān)系數(shù)IL-4(pg/mL)IFN-γ(pg/mL)Th1/Th2IL-17(pg/mL)T-betGATA-3T-bet/GATA-3RORgammat①①①①①①①FEV0.3(mL)FEV0.3/FVC(%)PEF(mL/s)肺功能參數(shù)圖3肺功能參數(shù)與其他指標相關(guān)性分析Figure3Correlationoflungfunctionindexeswithotherindicators(“SD大鼠皮質(zhì)骨來源間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)與鑒定”的彩圖,正文見第453頁)骨髓來源皮質(zhì)骨來源原代第2天第3代第2代Giemsa染色圖1不同時期骨髓來源和皮質(zhì)骨來源間充質(zhì)干細胞的形態(tài)學(xué)觀察(×100)Figure1Morphologyofbonemarroworiginandcorticalbonederivedmesenchymalstemcellsatdifferentphases(×100)①P<0.05(“基于T-bet、GATA-3、RORgammat調(diào)控Th細胞研究六味補氣膠囊對慢性阻塞性肺病大鼠肺功能的影響”的彩圖,,正文見第407頁)494
【參考文獻】
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1 鄭景輝;李勇華;王麗萍;簡維雄;黃獻平;袁肇凱;;不同血清微環(huán)境對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞體外培養(yǎng)的影響[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2010年14期
2 李曉峰;趙勁民;蘇偉;崔向榮;羅世興;馬愛國;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)與鑒定[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年10期
3 楊勁松,楊淵;不同pH值的培養(yǎng)液對兔骨髓間充質(zhì)干細胞體外培養(yǎng)的影響[J];右江醫(yī)學(xué);2004年06期
4 陳廣華;楊婷;喬淑敏;田z
本文編號:2569598
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