【摘要】：ICOS(Inducible Costimulator)及其配體GL50是新近發(fā)現(xiàn)的CD28／B7家族的一對新成員。ICOS主要表達(dá)在活化的T細(xì)胞上，GL50可持續(xù)表達(dá)在B淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞表面或誘導(dǎo)表達(dá)于成纖維細(xì)胞表面。GL50-ICOS的相互作用，對機(jī)體再次免疫應(yīng)答過程中T細(xì)胞的增殖、活化、分化、細(xì)胞因子的分泌以及B細(xì)胞的增殖、分化、抗體分泌等都發(fā)揮了重要的作用。目前的研究業(yè)已證明：GL50-ICOS信號途徑在機(jī)體炎癥、自身免疫性疾病、腫瘤和移植排斥等免疫應(yīng)答過程中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用。對該信號途徑的有效調(diào)節(jié)將不僅為理解人體復(fù)雜、精細(xì)的免疫應(yīng)答系提供新的視角，而且還具有潛在的臨床應(yīng)用前景。因此特異性鼠抗人ICOS單克隆抗體的研制在為研究GL50-ICOS信號途徑生物學(xué)效應(yīng)提供有力的研究工具的同時，也具有潛在的臨床應(yīng)用價值。 一 分泌鼠抗人ICOS單抗的雜交瘤細(xì)胞株的制備及其生物學(xué)特性的鑒定 以肺癌病人胸水中高表達(dá)ICOS的活化T細(xì)胞為免疫原，免疫BALB／c小鼠，采用B淋巴細(xì)胞融合技術(shù)，將反復(fù)免疫后的小鼠的脾臟細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞SP2／0進(jìn)行細(xì)胞融合，以ICOS-L929轉(zhuǎn)基因細(xì)胞作為陽性篩選細(xì)胞，以轉(zhuǎn)空載體的對照細(xì)胞mock-L929作為陰性對照細(xì)胞，經(jīng)免疫熒光標(biāo)記分析及抗體分泌陽性孔內(nèi)雜交瘤細(xì)胞的反復(fù)篩選，并經(jīng)多次克隆化培養(yǎng)，最終獲得1株持續(xù)、穩(wěn)定分泌鼠抗人ICOS單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株，命名為3F8。經(jīng)快速定性試紙法分析鑒定，3F8的重鏈為IgG1；而輕鏈為κ。經(jīng)體外連續(xù)傳代(40代)培養(yǎng)，液氮凍存半年后復(fù)蘇，仍生長良好，穩(wěn)定分泌抗體。繼而采用本室建立的腹水誘生和純化方案，腹水形成陽性
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R392

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 邱玉華,張學(xué)光,郭玲,劉俊恒,王江方;鼠抗人sIL-6R單克隆抗體的制備及sIL-6R檢測方法的建立[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;1997年04期

2 楊佳薈,沈茜,趙東寶,蔡青,韓星海;可誘導(dǎo)共刺激分子在系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人外周血T細(xì)胞亞群的表達(dá)及與臨床的關(guān)系[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2005年05期

3 邱玉華，，張學(xué)光，謝煒，朱學(xué)東;一種顯著提高小鼠生產(chǎn)單抗腹水產(chǎn)量的新方法[J];中國免疫學(xué)雜志;1995年06期

本文編號：2560187