鼠抗人ICOS單克隆抗體的研制及GL50-ICOS信號對T細胞共刺激作用的研究
發(fā)布時間:2019-11-13 07:05
【摘要】:ICOS(Inducible Costimulator)及其配體GL50是新近發(fā)現的CD28/B7家族的一對新成員。ICOS主要表達在活化的T細胞上,GL50可持續(xù)表達在B淋巴細胞、巨噬細胞表面或誘導表達于成纖維細胞表面。GL50-ICOS的相互作用,對機體再次免疫應答過程中T細胞的增殖、活化、分化、細胞因子的分泌以及B細胞的增殖、分化、抗體分泌等都發(fā)揮了重要的作用。目前的研究業(yè)已證明:GL50-ICOS信號途徑在機體炎癥、自身免疫性疾病、腫瘤和移植排斥等免疫應答過程中發(fā)揮著重要的調節(jié)作用。對該信號途徑的有效調節(jié)將不僅為理解人體復雜、精細的免疫應答系提供新的視角,而且還具有潛在的臨床應用前景。因此特異性鼠抗人ICOS單克隆抗體的研制在為研究GL50-ICOS信號途徑生物學效應提供有力的研究工具的同時,也具有潛在的臨床應用價值。 一 分泌鼠抗人ICOS單抗的雜交瘤細胞株的制備及其生物學特性的鑒定 以肺癌病人胸水中高表達ICOS的活化T細胞為免疫原,免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴細胞融合技術,將反復免疫后的小鼠的脾臟細胞與小鼠骨髓瘤細胞SP2/0進行細胞融合,以ICOS-L929轉基因細胞作為陽性篩選細胞,以轉空載體的對照細胞mock-L929作為陰性對照細胞,經免疫熒光標記分析及抗體分泌陽性孔內雜交瘤細胞的反復篩選,并經多次克隆化培養(yǎng),最終獲得1株持續(xù)、穩(wěn)定分泌鼠抗人ICOS單克隆抗體的雜交瘤細胞株,命名為3F8。經快速定性試紙法分析鑒定,3F8的重鏈為IgG1;而輕鏈為κ。經體外連續(xù)傳代(40代)培養(yǎng),液氮凍存半年后復蘇,仍生長良好,穩(wěn)定分泌抗體。繼而采用本室建立的腹水誘生和純化方案,腹水形成陽性
【學位授予單位】:蘇州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2006
【分類號】:R392
本文編號:2560187
【學位授予單位】:蘇州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2006
【分類號】:R392
【參考文獻】
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1 邱玉華,張學光,郭玲,劉俊恒,王江方;鼠抗人sIL-6R單克隆抗體的制備及sIL-6R檢測方法的建立[J];細胞與分子免疫學雜志;1997年04期
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3 邱玉華,,張學光,謝煒,朱學東;一種顯著提高小鼠生產單抗腹水產量的新方法[J];中國免疫學雜志;1995年06期
本文編號:2560187
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