【摘要】：【目的】 分析延邊地區(qū)土壤中分離的棘阿米巴(Acanthamoeba sp．)CJY／S1的18S rDNA基因型；并觀察大蒜素對棘阿米巴的體外殺傷作用。【方法】 延邊地區(qū)土壤中分離的Acanthamoeba sp．CJY／S1株PYG培養(yǎng)，常規(guī)氯仿-酚提取基因組DNA，，應用棘阿米巴屬特異性引物，PCR方法擴增并測18S rDNA序列。利用Genebank和分子生物學軟件ClustalX進行序列分析，與基因庫中已有T1至T12型序列進行比較并構建進化樹。將致病性棘阿米巴用不同濃度的大蒜素處理，對照組加等量的PYG，30℃培養(yǎng)。分別于3h、24h在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)變化，作生長曲線觀察增殖速率的變化，并透射電鏡下觀察其超微結構損傷情況�！窘Y果】 從延邊地區(qū)土壤中分離的棘阿米巴18S rDNA序列全基因長為2255bp，其基因型為T4型，與基因庫中Acanthamoeba castellanii Neff ATC親緣關系最近。大蒜素對致病性棘阿米巴原蟲的體外殺傷實驗表明，濃度為100ug／ml、1000ug／ml、10000ug／ml組的大蒜素處理3h均使棘阿米巴由滋養(yǎng)體轉化為包囊，1000ug／ml、10000ug／ml組分別于處理24h、3h后觀察到大量細胞分裂碎片；細胞生長曲線顯示，與正常對照組比較，10ug／ml組增殖速率正常，而100ug／ml組4d內未見細胞增殖；超微結構改變表明，大蒜素作用濃度為100ug／ml時，對棘阿米巴的結構產(chǎn)生輕度破壞，當大蒜素作用濃度為1000ug／ml時，對棘阿米巴的結構產(chǎn)生嚴重破壞，導致棘阿米巴完全壞死�！窘Y論】 Acanthamoeba sp．CJY／S1株為T4型，為Acanthamoeba castellanii；在體外大蒜素對棘阿米巴生長有明顯抑制作用。
【學位授予單位】：延邊大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2006
【分類號】：R383;R285

【參考文獻】

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本文編號：2556374