【摘要】：【目的】 分析延邊地區(qū)土壤中分離的棘阿米巴(Acanthamoeba sp．)CJY／S1的18S rDNA基因型；并觀察大蒜素對(duì)棘阿米巴的體外殺傷作用�！痉椒ā� 延邊地區(qū)土壤中分離的Acanthamoeba sp．CJY／S1株P(guān)YG培養(yǎng)，常規(guī)氯仿-酚提取基因組DNA，，應(yīng)用棘阿米巴屬特異性引物，PCR方法擴(kuò)增并測(cè)18S rDNA序列。利用Genebank和分子生物學(xué)軟件ClustalX進(jìn)行序列分析，與基因庫(kù)中已有T1至T12型序列進(jìn)行比較并構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)。將致病性棘阿米巴用不同濃度的大蒜素處理，對(duì)照組加等量的PYG，30℃培養(yǎng)。分別于3h、24h在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化，作生長(zhǎng)曲線(xiàn)觀察增殖速率的變化，并透射電鏡下觀察其超微結(jié)構(gòu)損傷情況�！窘Y(jié)果】 從延邊地區(qū)土壤中分離的棘阿米巴18S rDNA序列全基因長(zhǎng)為2255bp，其基因型為T(mén)4型，與基因庫(kù)中Acanthamoeba castellanii Neff ATC親緣關(guān)系最近。大蒜素對(duì)致病性棘阿米巴原蟲(chóng)的體外殺傷實(shí)驗(yàn)表明，濃度為100ug／ml、1000ug／ml、10000ug／ml組的大蒜素處理3h均使棘阿米巴由滋養(yǎng)體轉(zhuǎn)化為包囊，1000ug／ml、10000ug／ml組分別于處理24h、3h后觀察到大量細(xì)胞分裂碎片；細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)顯示，與正常對(duì)照組比較，10ug／ml組增殖速率正常，而100ug／ml組4d內(nèi)未見(jiàn)細(xì)胞增殖；超微結(jié)構(gòu)改變表明，大蒜素作用濃度為100ug／ml時(shí)，對(duì)棘阿米巴的結(jié)構(gòu)產(chǎn)生輕度破壞，當(dāng)大蒜素作用濃度為1000ug／ml時(shí)，對(duì)棘阿米巴的結(jié)構(gòu)產(chǎn)生嚴(yán)重破壞，導(dǎo)致棘阿米巴完全壞死�！窘Y(jié)論】 Acanthamoeba sp．CJY／S1株為T(mén)4型，為Acanthamoeba castellanii；在體外大蒜素對(duì)棘阿米巴生長(zhǎng)有明顯抑制作用。
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類(lèi)號(hào)】：R383;R285

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2556374