【摘要】： 目的:1.研究結核分枝桿菌H37Ra免疫小鼠后產生的特異性細胞免疫和體液免疫應答。2.評價結核分枝桿菌H37Ra免疫小鼠對結核分枝桿菌毒株攻擊的免疫保護性。 方法:1. BALB/c小鼠隨機分為3組:H37Ra組、BCG組和NS組,分別用H37Ra、BCG和NS皮內注射,免疫后第6w,做小鼠PPD遲發(fā)型超敏反應實驗。2.第8w處死部分小鼠,測定小鼠臟器重量指數;肺組織病理學檢測。3.分離小鼠外周血血清,ELISA法測定血清特異性IgG抗體的水平。4.流式細胞分析儀檢測小鼠脾淋巴細胞亞群的變化。5.取小鼠脾淋巴細胞體外培養(yǎng)并用PPD刺激,ELISA法檢測培養(yǎng)上清液中IFN-γ和IL-4的產生水平;MTT法檢測脾淋巴細胞的刺激指數(SI)。6.免疫后第8w,用5×106CFU MTB毒株H37Rv經小鼠腹腔注射,4w后處死小鼠,測定小鼠臟器重量指數。7.取稀釋小鼠脾臟、肝臟和肺臟勻漿接種于改良羅氏培養(yǎng)基,培養(yǎng)21d后計數CFU。8.同時取肺組織做病理學檢查。 結果:1.H37Ra免疫小鼠后能誘導顯著的遲發(fā)型超敏反應,以24h為最佳觀測時間。2.免疫小鼠8w后,肝、肺、脾、腎臟器重量指數差異均無統(tǒng)計學意義;病理學檢測發(fā)現H37Ra免疫小鼠后肺組織無明顯改變。3.H37Ra免疫小鼠血清中抗PPD IgG抗體的水平顯著升高。4.H37Ra免疫小鼠脾臟CD3+T細胞的百分率為(41.63±1.68)%,顯著高于NS對照組(38.44±1.87)%(P0.05);H37Ra免疫小鼠脾臟CD3+T細胞、CD4+T細胞及CD8+T細胞的百分率均不同程度地高于BCG免疫小鼠,但差異無統(tǒng)計學意義。各組間脾臟CD4+T細胞、CD8+T細胞、CD4+T/CD8+T比值差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。5.脾淋巴細胞SI、IFN-γ和IL-4水平檢測發(fā)現H37Ra免疫組顯著高于NS對照組(P0.05);H37Ra免疫組略高于BCG免疫組。6.感染4w后H37Ra和BCG組小鼠肝、肺、脾、腎臟器重量指數較NS對照組均顯著降低(P0.05),但H37Ra和BCG組間小鼠各臟器重量指數均無顯著性差異(P0.05)。7.H37Ra組小鼠肺、脾、肝組織荷菌量與NS對照組比較分別下降0.954、1.228和0.883log10CFU,差異有顯著性(P0.05)。H37Ra組各臟器組織荷菌量與BCG組之間差異均無顯著性(P0.05)。8.組織病理分析發(fā)現:H37Ra組小鼠肺泡腔有漿液性滲出,肺泡間隔增厚,局部有巨噬細胞浸潤和肉芽腫形成。BCG組小鼠肺泡結構完整,巨噬細胞的浸潤略增加,肺泡壁略增厚。而NS對照組病變嚴重而廣泛,肺泡腔內有明顯的出血性滲出液,大部分肺泡壁腫脹、增厚,肺泡結構被破壞。 結論:1.H37Ra免疫小鼠后可以誘導產生特異性抗結核的細胞免疫和體液免疫應答。2.H37Ra免疫小鼠后能夠抵抗毒株H37Rv的攻擊,但效果不及BCG。
【圖文】：

273 4圖 1-6. 免疫小鼠肺組織病理表現（HE 染色，，×100）Fig.1-6. Micrographs of the lung tissue in the vaccination group mice.（HE staining, ×100）1-2 H37Ra immunized group; 3 BCG immunized group; 4 NS control group

圖 2-1. 恢復毒力 H37RV培養(yǎng) 8w 后的菌落-1. The MTB H37RVpassed through mice was growing in the cultur
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2007
【分類號】：R392

【參考文獻】

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本文編號：2553366