【摘要】： 目的了解本地區(qū)臨床分離的金黃色葡萄球菌的耐藥特點,探討β-內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類抗生素相關(guān)耐藥基因的存在狀況,了解本地區(qū)MRSA菌株SCCmec基因型分布和各種基因型的耐藥特征,并結(jié)合SCCmec基因分型研究MRSA的耐藥機制。 方法采用Vitek微生物分析儀GPS109藥敏板檢測金黃色葡萄球菌對不同種類抗生素的敏感性;采用PCR方法檢測β-內(nèi)酰胺類耐藥基因mecA、氨基糖苷修飾酶基因aac(6')/ aph(2'')和aph(3')-III、大環(huán)內(nèi)酯類甲基化酶基因ermA和ermC、四環(huán)素類核糖體保護蛋白基因tetM和外排泵蛋白基因tetK的發(fā)生率;采用PCR方法檢測SCCmec基因分型的特征性基因,根據(jù)檢測特征性基因結(jié)果對臨床分離的MRSA進行分型。 結(jié)果社區(qū)獲得性皮膚軟組織感染病人分離的35株金黃色葡萄球菌沒有mecA陽性,175株醫(yī)院獲得性感染金黃色葡萄球菌84株mecA陽性(MRSA);醫(yī)院獲得性甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(HA-MSSA)對頭孢唑啉、慶大霉素和左氧氟沙星的耐藥率顯著高于社區(qū)獲得性甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(CA-MSSA)的耐藥率(P㩳0.05),醫(yī)院獲得性耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(HA-MRSA)對頭孢唑啉、紅霉素、克林霉素、四環(huán)素、慶大霉素、左氧氟沙星和利福平耐藥率的耐藥率顯著高于CA-MSSA和HA-MSSA(均P㩳0.05),HA-MRSA多重耐藥菌株所占的比率為90.4%,顯著高于CA-MSSA的20.0%和HA-MSSA的26.3%(均P㩳0.05);ermA、ermC、tetM、tetK、aac(6')/ aph(2'')和aph(3')-III在HA-MRSA中的檢出率分別為75.0%、8.3%、50%、54.8%、63.1%和3.6%,在HA-MSSA中的檢出率分別為14.3%、46.2%、16.5%、4.4%、3.3%和0%,在CA-MSSA中的檢出率分別為11.4%、40.0%、11.4%、2.8%、0%和0%;84株MRSA菌株中包括SCCmecⅡ型9株(10.7%),SCCmecⅢ型70株(83.3%),SCCmecⅣ型5株(6.0%),沒有發(fā)現(xiàn)SCCmecI型菌株,SCCmec各型別耐藥性分析顯示,所有菌株對利福平的耐藥率較低,對萬古霉素和利奈唑烷完全敏感,各型別間無顯著差異(P 0.05),對其它非β-內(nèi)酰胺類的抗菌藥物的耐藥率由高到低分別為SCCmecⅢ型、SCCmecⅡ型和SCCmecⅣ型,SCCmecⅡ型和Ⅲ型MRSA菌株表現(xiàn)為多重耐藥,其耐藥率顯著高于SCCmecⅣ型(P 0.05)。 結(jié)論CA-MSSA和HA-MSSA藥物敏感性明顯高于HA-MRSA;耐藥基因在金黃色葡萄球菌中均可檢出,在MRSA與MSSA發(fā)生率明顯不同,金黃色葡萄球菌對氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類抗生素耐藥與苯唑西林耐藥緊密相關(guān);SCCmecIII型菌株為本地區(qū)MRSA主要流行菌株,該型菌株對多種抗生素呈多重耐藥;SCCmec盒式染色體與MRSA多重耐藥密切相關(guān)。
【圖文】：

13圖 1 五種 SCCmec 基因型別的結(jié)構(gòu)圖[19-20]Fig1 the structure chart of five SCCmec genotypes根據(jù) SCCmec 分型的特征，選擇 IS1272 為 B 型 mec 基因復(fù)合體的特征性引物；mecI 為 A 型 mec 基因復(fù)合體的特征性引物；ccrA1 為 ccr1 型基因復(fù)合體特征性引物；ccrA2 為 ccr2 型基因復(fù)合體特征性引物；ccrA3 為 ccr3 型基因復(fù)合體特征性引物。分別擴增，并根據(jù)擴增結(jié)果進行分型： mecA+ccrA1+IS1272 陽性為Ⅰ型，，mecA+mecI+ccrA2 為Ⅱ型， mecA+mecI+ccrA3 陽性為Ⅲ型，mecA+ccrA2+IS1272陽性為 IV 型。

ermC在CA-MSSA和HA-MSSA中的檢出率高于HA-MRSA,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，均有統(tǒng)計學(xué)意義（P㩳0.05）。aph（3'）-III在MRSA和MSSA的檢出率無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。耐藥基因檢測結(jié)果見表5, PCR擴增結(jié)果見圖3。表5 175株金黃色葡萄球菌耐藥基因檢測結(jié)果Tab5 Comparison of antibiotic resistance genes between MRSA and MSSA基因CA-MSSA（n＝35） HA-MSSA（n＝91） HA-MRSA(n＝84)陽性株數(shù)(%) 陽性株數(shù)(%) 陽性株數(shù)(%)ermA 4（11.4） 13（14.3） 63（75.0）ermC 14(40.0) 42（46.2） 7（8.3）tetM 4（11.4） 15(16.5) 42（50.0）tetK 1(2.8) 4（4.4） 46（54.8）aac（6'）/ aph（2''） 0（0） 3（3.3） 53（63.1）aph（3'）-III 0（0） 0（0） 3（3.6）注：84株HA-MRSA中有5株同時檢出ermA和ermc基因,有38株同時檢出tetM和tetK基因,有2株同時檢出aac（6'）/ aph（2''）+aph（3'）-III， 91 株HA-MSSA 中，9 株同時檢出ermA和ermC基因，1株同時檢出tetM+tetK基因,35株CA－MSSA中有4株同時檢出ermA和ermc基因, 有1株同時檢出tetM和tetK基因.3.3.2攜帶耐藥基因模式攜帶耐藥基因模式研究ermA ermC、tetM、tetK、aac（6'）/ aph（2''）和 aph（3'）-III 共6種耐藥基因，HA-MRSA中有18株同時檢出3種耐藥基因, 有30株同時
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R515

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本文編號：2542491