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原癌基因c-myb在孕酮調(diào)控小鼠卵母細(xì)胞成熟中的作用

發(fā)布時(shí)間:2019-09-22 20:54
【摘要】:目的:觀察不同濃度孕酮(P)對(duì)小鼠生發(fā)泡(GV)期卵母細(xì)胞體外成熟的影響。觀察不同濃度反義c-myb ODN(c-myb ASODN)對(duì)小鼠GV 期卵母細(xì)胞體外成熟的影響;在適宜濃度孕酮存在下,將小鼠GV 期卵母細(xì)胞或/和反義c-myb ODN、或/和二丁酰環(huán)腺苷酸(dbcAMP)、或/和維拉帕米(Verapamil)、或/和肝素鈉(Heparin)共同孵育24h,觀察卵母細(xì)胞體外成熟的情況并分析它們之間的相互關(guān)系。通過實(shí)驗(yàn)資料的分析獲得卵巢功能調(diào)控的新知識(shí)、新資料,為開辟新的促生育和抗生育途徑提供新的方法。 方法:用外源性孕馬血清促性腺激素(PMSG)誘導(dǎo)昆明小鼠超排卵,48h 后斷頭處死,取出雙側(cè)卵巢,在解剖顯微鏡下用4 號(hào)針劃破卵泡,然后用口吸管將卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體(COC)吹散,收集裸卵(DO)。在M199 培養(yǎng)液(Medium 199)中添加P、或/和反義c-myb ODN、或/和dbcAMP、或/和Verapamil、或/和肝素鈉,觀察卵母細(xì)胞體外成熟的情況。 結(jié)果:(1)在M199 培養(yǎng)液分別添加0、5、10、20μmol/L 的孕酮培養(yǎng)GV 期小鼠卵母細(xì)胞(裸卵)24h。5、10、20μmol/L 的孕酮均能夠促進(jìn)GV 期小鼠卵母細(xì)胞體外成熟,10μmol/L孕酮組與5μmol/L孕酮組比較有顯著性差別,與20μmol/L孕酮組比較無顯著性差別。觀察孕酮促卵母細(xì)胞成熟的時(shí)效關(guān)系時(shí)發(fā)現(xiàn),各孕酮組均于2h 開始顯著促進(jìn)生發(fā)泡破裂(GVBD),隨著時(shí)間的延長(zhǎng),這種促進(jìn)作用一直持續(xù)。各孕酮組均于8h 開始顯著促進(jìn)第一極體(PBI)排出,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),這種促進(jìn)作用一直持續(xù)。(2)在M199 培養(yǎng)液分別添加0、4、8、16μmol/L的反義c-myb ODN 培養(yǎng)GV 期小鼠卵母細(xì)胞(裸卵)24h。反義c-myb ODN 對(duì)GV期小鼠卵母細(xì)胞體外成熟的抑制作用呈劑量依賴關(guān)系。8、16μmol/L 的反義c-myb ODN 可顯著抑制GV 期小鼠卵母細(xì)胞體外成熟。觀察反義c-myb ODN 抑制
【圖文】:

孕酮,小鼠卵母細(xì)胞,體外成熟,共同作用


c-myb ODN 和孕酮共同作用對(duì) GV 期小鼠卵母細(xì)胞體外成熟過程中 PB 的影響孕酮(10μmol/L),2 組為反義 c-myb ODN(16μmol/L),3 組為孕酮(10μmol/L)yb ODN(16μmol/L)。與孕酮組相比,* p<0.05,** p<0.01。AMP 單獨(dú)以及與反義 c-myb ODN 共同作用時(shí)對(duì) GV 期小鼠卵母細(xì)胞影響10μmol/L 孕酮相比,1×10-4μmol/L dbcAMP 可顯著抑制孕酮誘導(dǎo)的母細(xì)胞體外成熟(GVBD 率和 PBI 率都顯著下降)。當(dāng) 1×10-4μmo
【學(xué)位授予單位】:江西醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2005
【分類號(hào)】:R321

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前7條

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2 鄭月慧,方廉,況海斌,鄒桂華;c-myb對(duì)大鼠黃體細(xì)胞孕酮和雌二醇生成的影響[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;1999年02期

3 李朝軍,王斌,范必勤;小鼠卵母細(xì)胞減數(shù)分裂過程中鈣離子的三維分布[J];解剖學(xué)報(bào);1995年01期

4 金萱,方廉,鄭月慧,鐘志勝,況海斌;c-erbB_2對(duì)大鼠黃體細(xì)胞hCG誘導(dǎo)的孕酮分泌的影響[J];生理學(xué)報(bào);2000年01期

5 徐斯凡,鄭月慧,趙白鴿,王忠興,周壽康,趙偉,,吳曉蕓;cAMP介導(dǎo)內(nèi)皮素-1對(duì)大鼠黃體細(xì)胞孕酮分泌的作用[J];生殖醫(yī)學(xué)雜志;1995年02期

6 李朝軍,范必勤;Ca~(2+)與哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞成熟分裂的關(guān)系[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;1995年04期

7 鄭月慧,鐘志勝,方廉,金萱,況海斌;c-fos、c-myb和c-erbB-2與大鼠卵巢顆粒細(xì)胞生孕酮調(diào)控關(guān)系的研究[J];中國應(yīng)用生理學(xué)雜志;2000年03期



本文編號(hào):2540160

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