原癌基因c-myb在孕酮調(diào)控小鼠卵母細(xì)胞成熟中的作用
發(fā)布時(shí)間:2019-09-22 20:54
【摘要】:目的:觀察不同濃度孕酮(P)對(duì)小鼠生發(fā)泡(GV)期卵母細(xì)胞體外成熟的影響。觀察不同濃度反義c-myb ODN(c-myb ASODN)對(duì)小鼠GV 期卵母細(xì)胞體外成熟的影響;在適宜濃度孕酮存在下,將小鼠GV 期卵母細(xì)胞或/和反義c-myb ODN、或/和二丁酰環(huán)腺苷酸(dbcAMP)、或/和維拉帕米(Verapamil)、或/和肝素鈉(Heparin)共同孵育24h,觀察卵母細(xì)胞體外成熟的情況并分析它們之間的相互關(guān)系。通過實(shí)驗(yàn)資料的分析獲得卵巢功能調(diào)控的新知識(shí)、新資料,為開辟新的促生育和抗生育途徑提供新的方法。 方法:用外源性孕馬血清促性腺激素(PMSG)誘導(dǎo)昆明小鼠超排卵,48h 后斷頭處死,取出雙側(cè)卵巢,在解剖顯微鏡下用4 號(hào)針劃破卵泡,然后用口吸管將卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體(COC)吹散,收集裸卵(DO)。在M199 培養(yǎng)液(Medium 199)中添加P、或/和反義c-myb ODN、或/和dbcAMP、或/和Verapamil、或/和肝素鈉,觀察卵母細(xì)胞體外成熟的情況。 結(jié)果:(1)在M199 培養(yǎng)液分別添加0、5、10、20μmol/L 的孕酮培養(yǎng)GV 期小鼠卵母細(xì)胞(裸卵)24h。5、10、20μmol/L 的孕酮均能夠促進(jìn)GV 期小鼠卵母細(xì)胞體外成熟,10μmol/L孕酮組與5μmol/L孕酮組比較有顯著性差別,與20μmol/L孕酮組比較無顯著性差別。觀察孕酮促卵母細(xì)胞成熟的時(shí)效關(guān)系時(shí)發(fā)現(xiàn),各孕酮組均于2h 開始顯著促進(jìn)生發(fā)泡破裂(GVBD),隨著時(shí)間的延長(zhǎng),這種促進(jìn)作用一直持續(xù)。各孕酮組均于8h 開始顯著促進(jìn)第一極體(PBI)排出,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),這種促進(jìn)作用一直持續(xù)。(2)在M199 培養(yǎng)液分別添加0、4、8、16μmol/L的反義c-myb ODN 培養(yǎng)GV 期小鼠卵母細(xì)胞(裸卵)24h。反義c-myb ODN 對(duì)GV期小鼠卵母細(xì)胞體外成熟的抑制作用呈劑量依賴關(guān)系。8、16μmol/L 的反義c-myb ODN 可顯著抑制GV 期小鼠卵母細(xì)胞體外成熟。觀察反義c-myb ODN 抑制
【圖文】:
c-myb ODN 和孕酮共同作用對(duì) GV 期小鼠卵母細(xì)胞體外成熟過程中 PB 的影響孕酮(10μmol/L),2 組為反義 c-myb ODN(16μmol/L),3 組為孕酮(10μmol/L)yb ODN(16μmol/L)。與孕酮組相比,* p<0.05,** p<0.01。AMP 單獨(dú)以及與反義 c-myb ODN 共同作用時(shí)對(duì) GV 期小鼠卵母細(xì)胞影響10μmol/L 孕酮相比,1×10-4μmol/L dbcAMP 可顯著抑制孕酮誘導(dǎo)的母細(xì)胞體外成熟(GVBD 率和 PBI 率都顯著下降)。當(dāng) 1×10-4μmo
【學(xué)位授予單位】:江西醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2005
【分類號(hào)】:R321
本文編號(hào):2540160
【圖文】:
c-myb ODN 和孕酮共同作用對(duì) GV 期小鼠卵母細(xì)胞體外成熟過程中 PB 的影響孕酮(10μmol/L),2 組為反義 c-myb ODN(16μmol/L),3 組為孕酮(10μmol/L)yb ODN(16μmol/L)。與孕酮組相比,* p<0.05,** p<0.01。AMP 單獨(dú)以及與反義 c-myb ODN 共同作用時(shí)對(duì) GV 期小鼠卵母細(xì)胞影響10μmol/L 孕酮相比,1×10-4μmol/L dbcAMP 可顯著抑制孕酮誘導(dǎo)的母細(xì)胞體外成熟(GVBD 率和 PBI 率都顯著下降)。當(dāng) 1×10-4μmo
【學(xué)位授予單位】:江西醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2005
【分類號(hào)】:R321
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):2540160
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