發(fā)布時間：2019-09-22 02:20

【摘要】：開發(fā)更有效的抗腫瘤疫苗一直是腫瘤免疫治療的主要目標(biāo)之一。我們研究組以往的研究表明：經(jīng)欖香烯處理的腫瘤細胞用做腫瘤疫苗免疫小鼠后，可誘導(dǎo)機體產(chǎn)生比較強的抗腫瘤免疫保護效應(yīng)；用從欖香烯復(fù)合瘤苗(elemene combo tumor cell vaccine，EC-TCV)中提取的熱休克蛋白(heat shock proteins，HSPs)HSP70_肽復(fù)合物進行免疫，可誘導(dǎo)比較強的特異性抗瘤免疫保護效應(yīng)。這些結(jié)果提示，HSP70_肽復(fù)合物在欖香烯復(fù)合瘤苗誘導(dǎo)的抗瘤免疫保護效應(yīng)中起十分重要的作用。 日益增多的證據(jù)表明，樹突狀細胞(dendritic cells，DCs)是功能最強的抗原提呈細胞(antigen presenting cells，APC)，在體內(nèi)外均可激活初始型T細胞產(chǎn)生適應(yīng)性免疫應(yīng)答。HSPs是可以激活DCs的內(nèi)源性分子，，它強有力地結(jié)合整個細胞內(nèi)的抗原肽的能力，使它成為腫瘤疫苗最有吸引力的載體。本論文在上述研究基礎(chǔ)上，選擇Hca-F和L_(929)細胞系為模型，在體外比較卡介苗來源的HSP70_肽復(fù)合物(HSP70__(BCG))和Hca-F欖香烯復(fù)合瘤苗來源的HSP70_肽復(fù)合物(HSP70-_(EC-TCV))沖激的DCs抗Hca-F和L_(929)效應(yīng)；探討Toll-like Receptor 4(TLR_4)信號通路在HSP70__(BCG)和HSP70-_(EC-TCV)激活DCs過程中的作用；體外構(gòu)建的Hca-F欖香烯復(fù)合瘤苗抗原肽-HSP70__(BCG)復(fù)合物(H_(TA)-HSP70__(BCG))激活的DCs的體內(nèi)外抗瘤效應(yīng)，主要結(jié)果如下： 一．HSP70__(BCG)和HSP70-_(EC-TCV)抗原肽復(fù)合物對DCs的沖激作用 1．HSP70__(BCG)和HSP70-_(EC-TCV)由本室從Hca-F欖香烯復(fù)合瘤苗細胞和BCG中提取，Western blot證實，全過程以低壓液相色譜監(jiān)控。 2．骨髓來源的不成熟DC通過在培養(yǎng)基中加入GM-CSF(20ng／ml)和IL-4(20ng／ml)培養(yǎng)5天獲得。 3．以HSP70__(BCG)(25μg／ml)和HSP70-_(EC-TCV)(25μg／ml)沖激DC 24h，用ELISA法檢測上清中IL-12濃度，用流式細胞儀檢測DC表面CD_(86)和CD_(40)的表達。
【圖文】：

LI說明書操作，用ELSIA試劑盒測標(biāo)準(zhǔn)品各濃度的D0值，以D0值為品濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)本樣品的D0值可在標(biāo)準(zhǔn)度。9統(tǒng)計學(xué)處理驗數(shù)據(jù)均用(r士S)表示，采用SPSSI1.5軟件處理，進行t檢結(jié)果DC的體外誘導(dǎo)一CSF可刺激DC前體細胞分化為DC，而Jll一4則可防止前體細胞化〔“，”〕。小鼠的骨髓細胞在GM一CSF、IL一4存在時，在培養(yǎng)的前3胞死亡，進一步培養(yǎng)可見細胞形態(tài)發(fā)生改變，細胞不規(guī)則，并有偽在掃描電鏡下細胞表面有很多皺褶，細胞胞體不規(guī)則，表面粗糙，DC由于沒有捕獲抗原，屬于不成熟DC。

圖2.掃描電鏡下觀察到的DC的形態(tài)(x6000)Fig2.MoprhologyofDCobsevredbyeleeortn而eorseoPy(X6000)Sp70一Bee和HSP70一Ee一兀v沖激后nC表型的變化DC表面高表達CD86，CD40等，而不成熟DC這些分子是低表0一Beo和HSp7o一Ee一Tev沖激后，其表面Cns6，Cn4o的表達，見圖兩組DC表達CDs6，CD4o均呈顯著升高(P<0.05)。、、伏:丸，，尹滬··彩彩彩眾眾{{{叮洲洲洲SN00閃O汾O。一不O價SFLI書
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號】：R392

【參考文獻】

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本文編號：2539690