【摘要】： 腮腺炎病毒(Mumps virus，，以下簡(jiǎn)稱(chēng)MV)為RNA病毒，屬副黏病毒科。成熟病毒顆粒內(nèi)的基因組為一不分節(jié)段的單股負(fù)鏈RNA。MV僅一個(gè)血清型。腮腺炎病毒已被確定是一種可以引起多種器官感染的病原，在其形成對(duì)腮腺感染的同時(shí)，它常常可以引起神經(jīng)系統(tǒng)感染、生殖腺體感染以及肝、腎、心臟、關(guān)節(jié)等多器官的感染。而這些感染，盡管其發(fā)病率相應(yīng)較腮腺炎本身為低，但其所導(dǎo)致的病理后果較腮腺炎要嚴(yán)重得多，如睪丸炎、腦膜炎等。自上世紀(jì)60年代以來(lái)腮腺炎減毒活疫苗在世界范圍內(nèi)的廣泛使用，這一曾經(jīng)大面積流行的疾病至今已得到了控制，發(fā)病率大大降低。 從上世紀(jì)90年代以后，該病重新在曾經(jīng)有過(guò)良好計(jì)劃免疫措施的發(fā)達(dá)國(guó)家，如英國(guó)、美國(guó)、加拿大重新出現(xiàn)，其發(fā)病率逐年上升并呈持續(xù)發(fā)展的趨勢(shì)。近期以來(lái)，甚至出現(xiàn)了局部爆發(fā)的情況。有關(guān)該病逐漸增多的流行病學(xué)報(bào)道使人們發(fā)現(xiàn)，這一疾病正以一種我們還未完全認(rèn)識(shí)的方式在卷土重來(lái)，而這其中，我們?cè)?jīng)成功使用過(guò)的腮腺炎減毒活疫苗則日益顯示出了它的許多不足之處。盡管腮腺炎減毒活疫苗在使用后大大降低了發(fā)病人數(shù)，但是類(lèi)似于野毒株感染所引起的一些并發(fā)癥也以相當(dāng)?shù)念l率不斷出現(xiàn)。其中最常見(jiàn)的就是免疫接種后產(chǎn)生的無(wú)菌性腦膜炎，另外還有腮腺炎、頜下腦水腫，發(fā)熱、局部反應(yīng)及過(guò)敏性反應(yīng)等，其中已為人們所公認(rèn)肯定的是無(wú)菌性腦膜炎和腮腺炎。 因此，在這樣的情況下，我們有理由重新審視這一疾病在當(dāng)前的流行特點(diǎn)，結(jié)合當(dāng)前對(duì)MV的分子生物學(xué)研究，在可能的范圍內(nèi)進(jìn)一步探索我們這一現(xiàn)有疫苗在理論和技術(shù)上可供改進(jìn)的基礎(chǔ)和空間。 對(duì)腮腺炎病毒的分子生物學(xué)分析已經(jīng)明確，腮腺炎病毒顆粒中具有主要抗原作用的蛋白成分是其外膜上突起狀的血凝素神經(jīng)氨酸酶——HN蛋白，因?yàn)槠涫窃诓《靖腥具^(guò)程中結(jié)合受體以介導(dǎo)病毒進(jìn)入細(xì)胞的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)蛋白，針對(duì)其的中和抗體即是針對(duì)病毒的中和抗體。而其它的病毒結(jié)構(gòu)蛋白相對(duì)來(lái)說(shuō)，在誘導(dǎo)特異性抗病毒免疫方面，均不如HN蛋白重要。因此，我們的純化抗原研制工作主要集中于這個(gè)蛋白。 本研究課題就是利用裂解滅活的濃縮的腮腺炎病毒，通過(guò)分子篩層析過(guò)柱的方法，收集分離的蛋白峰，通過(guò)血凝實(shí)驗(yàn)、SDS-PAGE電泳、Lowry法測(cè)蛋白含量、蛋白N端測(cè)序、Western-blot、HPLC測(cè)蛋白純度等，分離純化并鑒定出HN蛋白組分。我們拿此蛋白組份添加佐劑制備抗原實(shí)驗(yàn)性疫苗。 該實(shí)驗(yàn)性疫苗在一次免疫實(shí)驗(yàn)小鼠后，即可100％地誘導(dǎo)其抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)。本實(shí)驗(yàn)制備的純化的腮腺炎包膜糖蛋白-HN，為下一步進(jìn)行免疫學(xué)及安全性實(shí)驗(yàn)打下了良好的基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類(lèi)號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

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