【摘要】：大腸桿菌O157:H7作為食源性致病菌存在流行暴發(fā)的可能性和感染的嚴重性,急需研制一種快速準確的檢測方法。本課題根據(jù)石英晶體微天平良好的質(zhì)量響應特性,在QCM石英金電極表面采用四種不同的抗體固定方法,將抗體固定在電極表面,并通過兩種分析方法來檢測大腸桿菌O157:H7。根據(jù)不同濃度的菌體溶液響應值存在規(guī)律性來測定菌體濃度。建立了基于QCM的壓電免疫生物傳感器的微生物檢測系統(tǒng),能夠快速準確的檢測大腸桿菌O157:H7。 本課題的主要研究內(nèi)容和研究結(jié)果如下: 1.采用四種抗體固定方法:硅烷固定法,聚乙烯亞胺固定法,3-巰基丙酸固定法和蛋白A固定法等將抗體固定于金電極表面,并通過兩種分析方法:氣相分析法和流動注射法來跟蹤了解石英金電極表面每一步反應的頻率變化。結(jié)果表明,蛋白A固定法與流動注射法聯(lián)合使用是最佳的QCM檢測大腸桿菌O157:H7方法。 2.利用蛋白A固定法和流動注射法聯(lián)合使用時,蛋白A濃度和抗體的濃度對結(jié)果有影響,實驗證明蛋白A最佳濃度為0.5mg/mL,抗體最佳濃度為1.0mg/mL。 3.選擇最佳的抗體固定方法和分析方法,通過頻率變化量的差異對不同濃度的大腸桿菌O157:H7溶液進行定量檢測,檢測限為7.33×10~3CFU/mL,檢測范圍為7.33×10~3CFU/mL～7.33×10~8CFU/mL,在此范圍內(nèi),其頻率變化值和濃度的響應方程式為:△f=6.9LogC-10.5。 以上實驗研究,為今后壓電免疫生物傳感器在食品致病菌的檢測研究應用打下基礎(chǔ),為從事食品安全研究與檢測提供相應的技術(shù)支撐。
[Abstract]:As the possibility of epidemic outbreak of food-borne pathogenic bacteria and the severity of infection, it is urgent to develop a rapid and accurate detection method of Escherichia coli O157:H7. According to the good quality response characteristics of quartz crystal microbalance, four different antibody fixation methods were used on the surface of QCM quartz gold electrode to fix the antibody on the electrode surface, and the E. coli O157 鈮，

本文編號：2508992