【摘要】： 目的:從胎盤組織中分離培養(yǎng)獲得間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)已成為干細胞研究領域的一大熱點。MSCs在胎盤的分布并不均衡,如何取材直接影響到胎盤間充質(zhì)干細胞(placenta derived mesenchymal stem cells,PMSCs)在體外的有效獲取及擴增。目前尚無特異性的標記物可用于成體MSCs的識別。本實驗旨在利用一些通用的MSCs標記物,探索MSCs在人胎盤的分布規(guī)律,并在此基礎上通過分組分離培養(yǎng)PMSCs,觀察細胞生物學的特性,初步驗證其規(guī)律,為MSCs的基礎研究和臨床應用奠定良好的基礎。 方法:取無指征剖宮產(chǎn)之足月健康產(chǎn)婦的新鮮胎盤組織,按中央帶(A)、中間帶(B)和邊緣帶(C)、絨毛板層(a)、中間層(b)和基底板層(c)分為九組:Aa、Ab、Ac、Ba、Bb、Bc、Ca、Cb、Cc,連續(xù)切片,以CD166、CD44、CD29分別做免疫熒光和免疫組化染色。顯微鏡下觀察陽性細胞分布區(qū)域,采用HPIAS-1000彩色病理圖象分析系統(tǒng)進行圖象分析,檢測陽性細胞區(qū)域的光密度值(OD),以平均光密度值作為衡量表達強弱的標準。所測數(shù)據(jù)采用SPSS軟件進行分析。再按上述分組取材分離培養(yǎng)PMSCs,觀察各組細胞增殖情況有無差異,進一步驗證上述標記物定位的可靠性;同時檢測所培養(yǎng)細胞的表面抗原,誘導傳代后的細胞向神經(jīng)元樣細胞分化,證實其具有MSCs的特點。 結(jié)果:(1)首次證實3個標記物CD166、CD44、CD29陽性表達細胞的分布情況較一致,主要集中于血管內(nèi)皮下及血管附近間質(zhì)內(nèi),胎盤中央帶中間層(Ab)陽性細胞較集中,陽性表達的強度較強,其OD值與其它組相比差異有顯著性(P0.05),邊緣帶陽性細胞稀少,陽性表達的強度較弱;(2)分組分離培養(yǎng)PMSCs結(jié)果顯示:在相同處理方法下和相同條件培養(yǎng)基中,各組間細胞增殖情況有差異,其中Ab組生長速率和細胞數(shù)量的增加較其它組顯著;(3)流式細胞儀檢測表面抗原表明,培養(yǎng)所獲細胞表達CD166、CD44、CD29、CD105,而不表達CD45、CD34以及HLA-DR,提示呈MSCs表型;(4)向神經(jīng)細胞誘導分化結(jié)果表明,培養(yǎng)細胞有MSCs跨胚層分化的潛能。 結(jié)論:胎盤各部位均存在CD166、CD44、CD29陽性表達的細胞,但臍帶附著處下方胎盤中間層(Ab)相對其他部位而言可能為MSCs富集區(qū)域。各組MSCs的數(shù)量與MSCs的體外分離培養(yǎng)效率呈正相關。CD166、CD44和CD29作為成體MSCs的定位指標有較好的可信度。
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【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2007
【分類號】：R329

【參考文獻】

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1 王明元;干細胞分化抗原及標記物研究進展[J];國外醫(yī)學(免疫學分冊);2004年06期

2 劉伯寧，陶雯琪，徐元鼎;應用圖像分析儀對正常足月胎盤不同層次內(nèi)絨毛的體規(guī)學研究[J];上海醫(yī)學;1994年01期

3 薛群,苗宗寧,曲靜,王明元,朱挺,金鈞,施勤,惠國楨,張學光;胎盤間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)細胞誘導的實驗研究[J];江蘇醫(yī)藥;2004年11期

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本文編號：2469178