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變形鏈球菌延伸因子(EF-Tu)tuf基因的克隆及序列分析

發(fā)布時(shí)間:2019-04-13 09:32
【摘要】: 變形鏈球菌(Streptococcus mutans,以下簡(jiǎn)稱變鏈)是齲病的主要致病菌之一,耐酸性是其關(guān)鍵的毒力因子。變鏈作為口腔中最耐酸的細(xì)菌,目前多數(shù)研究都集中在與其粘附性相關(guān)基因的研究,,但對(duì)于開發(fā)變鏈耐酸性基因則顯得不足,變形鏈球菌在pH值低至4.0時(shí)仍能代謝蔗糖產(chǎn)酸,有助于維持菌斑的低pH環(huán)境,使牙面脫礦破壞,而其他很多致齲菌則不能在pH值小于5.0的酸性環(huán)境中進(jìn)行糖酵解。變鏈在低pH環(huán)境中能夠繼續(xù)生長(zhǎng)、代謝的分子機(jī)制尚未明了,其中包括在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中負(fù)責(zé)肽鏈延伸的延伸因子(EF-Tu),還需要大量的科研工作來(lái)揭示其作用機(jī)制。本試驗(yàn)以該基因作為靶點(diǎn),采用PCR方法,以變鏈染色體DNA為模板擴(kuò)增延伸因子tuf基因,得到tuf基因全長(zhǎng)共1197bp,克隆至pMD18-T載體后進(jìn)行序列分析,登陸Gene-Bank申請(qǐng)序列號(hào)為EF536028,目的是尋找一個(gè)新的與變形鏈球菌耐酸性相關(guān)的基因,為進(jìn)一步研究變鏈延伸因子在變鏈耐酸過(guò)程中的作用機(jī)制奠定良好基礎(chǔ),為齲病的防治提供新的思路。
[Abstract]:Streptococcus mutans (Streptococcus mutans,) is one of the main pathogenic bacteria of caries. Acid tolerance is the key virulence factor of Streptococcus mutans. As the most acid-resistant bacteria in oral cavity, most of the studies focus on the genes related to its adhesion, but it is insufficient to develop the variable-chain acid-tolerant genes. Streptococcus mutans can still metabolize sucrose and produce acid at pH 4.0, which is helpful to maintain the low pH environment of plaque and demineralize the tooth surface. However, many other caries-causing bacteria can not glycolysis in acidic environment with pH less than 5.0. Variable chains can continue to grow in low pH environment, the molecular mechanism of metabolism is not clear, including the extension factor (EF-Tu), which is responsible for the extension of peptide chain in the process of protein synthesis, and a great deal of research work is needed to reveal its mechanism. In this experiment, the extension factor tuf gene was amplified by PCR method with the variable strand chromosome DNA as the template. The total length of the tuf gene was 1197bp. After cloning into the pMD18-T vector, the gene was cloned into the pMD18-T vector for sequence analysis. The sequence number of the tuf gene was EF536028,. The aim of this study is to find a new gene related to acid tolerance of Streptococcus mutans, and to lay a good foundation for further study of the mechanism of variable chain extension factor in the process of acid tolerance of Streptococcus mutans, and to provide a new way of thinking for the prevention and treatment of caries.
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2007
【分類號(hào)】:R378

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本文編號(hào):2457444

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