【摘要】：目的研究煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)對(duì)精子DNA碎片化的作用,并探討此過(guò)程中的分子生物學(xué)機(jī)制。方法在差異濃度NAD(0、1、10、100、1 000μmol/L)孵育下,觀察最適宜的精子NAD孵育濃度;采用Bio Vsion公司生產(chǎn)的NAD/NADH定量試劑盒測(cè)定精子NAD水平;采用流式細(xì)胞儀觀察精子DNA碎片率和染色質(zhì)成熟度;采用實(shí)時(shí)定量PCR觀察精子DNA單鏈修復(fù)酶PARP1和雙鏈修復(fù)酶BRCA1的轉(zhuǎn)錄水平。結(jié)果 10μmol/L NAD孵育即能顯著增加精子NAD含量。在精子內(nèi)NAD水平顯著升高的同時(shí),精子DNA碎片率明顯降低,然而精子染色質(zhì)成熟度不受精子NAD水平的影響。精子內(nèi)NAD水平能顯著影響精子內(nèi)DNA單鏈修復(fù)酶PARP1和雙鏈修復(fù)酶BRCA1的轉(zhuǎn)錄水平。結(jié)論這些結(jié)果初步提示,精子內(nèi)NAD水平可能通過(guò)調(diào)節(jié)DNA修復(fù)系統(tǒng),參與精子DNA損傷修復(fù)。
[Abstract]:Aim to study the effect of nicotinamide adenine dinucleotide (NAD) on the fragmentation of sperm DNA and to explore the molecular biological mechanism in this process. Methods the optimal concentration of sperm NAD was observed at different concentrations of NAD (0,1,10,100,1000 渭 mol / L), and the NAD level of spermatozoa was determined by NAD/NADH quantitative kit produced by Bio Vsion Company. The DNA fragmentation rate and chromatin maturity were measured by flow cytometry, and the transcription levels of DNA single strand repair enzyme PARP1 and double strand repair enzyme BRCA1 were measured by real-time quantitative PCR. Results 10 渭 mol / L NAD significantly increased the content of NAD in spermatozoa. While the level of NAD in spermatozoa increased significantly, the percentage of sperm DNA fragments decreased significantly. However, the sperm chromatin maturity was not affected by the level of NAD in spermatozoa. The level of NAD in spermatozoa significantly affected the transcription level of DNA single strand repair enzyme PARP1 and double strand repair enzyme BRCA1 in spermatozoa. Conclusion these results suggest that the level of NAD in spermatozoa may be involved in the repair of sperm DNA damage by regulating the DNA repair system.
【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【分類(lèi)號(hào)】：R321.1

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2450533