【摘要】：目的 間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenehymal stem cells, MSC)來(lái)源于中胚層(Mesoderm),具有多向分化能力。大量研究表明,MSC可能在一定條件下向內(nèi)皮細(xì)胞分化。本實(shí)驗(yàn)以建立大鼠骨髓MSC的培養(yǎng)體系為基礎(chǔ),研究MSC體外向內(nèi)皮細(xì)胞分化的特性,體外觀察模擬的心肌局部微環(huán)境及心肌缺血微環(huán)境對(duì)MSC向內(nèi)皮細(xì)胞分化的影響。 方法 應(yīng)用4周以?xún)?nèi)的大鼠骨髓分離培養(yǎng)MSC,進(jìn)行體外擴(kuò)增,對(duì)其形態(tài)學(xué)、增殖能力及向成骨和脂肪細(xì)胞分化的功能進(jìn)行鑒定;在以上實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,建立大鼠的心肌梗死模型,制備不同時(shí)間心梗心肌的勻漿,參與到由成血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子β(bFGF)和胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)組成的成內(nèi)皮誘導(dǎo)體系中,應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)vWF、CD31特異性抗原,RT-PCR檢測(cè)vWF的表達(dá),并進(jìn)行吞噬實(shí)驗(yàn),并觀察心肌勻漿對(duì)MSC增殖和成內(nèi)皮分化的影響。 結(jié)果 通過(guò)對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)及功能鑒定,證明其為MSC,并具有向成骨、成脂肪細(xì)胞分化的能力;生長(zhǎng)因子加或不加心肌勻漿誘導(dǎo)后的細(xì)胞,部分呈vWF、CD31陽(yáng)性,Ac-LDL吞噬實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性,梗塞心肌勻漿與生長(zhǎng)因子共同作用,能促進(jìn)MSC向內(nèi)皮細(xì)胞分化,vWF陽(yáng)性率提高,P0.05,RT-PCR顯示1-2周的梗塞心肌勻漿vWF的基因表達(dá)最多。
[Abstract]:Objective Mesenchymal stem cells (mesenehymal stem cells, MSC) derived from mesodermal (Mesoderm), have the ability of multidirectional differentiation. A large number of studies have shown that MSC may differentiate into endothelial cells under certain conditions. Based on the establishment of the culture system of rat bone marrow MSC, the characteristics of MSC differentiation into endothelial cells in vitro were studied. The effects of simulated myocardial microenvironment and myocardial ischemia microenvironment on the differentiation of MSC into endothelial cells were observed in vitro. Methods MSC, was isolated and cultured from rat bone marrow within 4 weeks for in vitro amplification, and its morphology, proliferation and differentiation into osteoblasts and adipocytes were identified. On the basis of the above experiments, the model of myocardial infarction in rats was established, and the homogenate of myocardial infarction at different time was prepared, which involved in the involvement of vascular endothelial growth factor (VEGF),) in myocardial infarction. In the endothelial induction system composed of basic fibroblast growth factor-尾 (bFGF) and insulin-like growth factor-1 (IGF-1), the specific antigen of vWF,CD31 was detected by immunohistochemical method, and the expression of vWF was detected by RT-PCR. The effects of myocardial homogenate on proliferation and endothelial differentiation of MSC were observed by phagocytosis test. Results through the morphological and functional identification of cultured cells, it was proved that the cultured cells were MSC, and had the ability to differentiate into osteoblasts and adipocytes. The cells induced by growth factor plus or without myocardial homogenate were partly positive for vWF,CD31 and positive for Ac-LDL phagocytosis test. Infarct myocardium homogenate combined with growth factor could promote the differentiation of MSC into endothelial cells, and the positive rate of vWF increased, P0.05, P 0.05, P < 0.05, P < 0.01, P < 0.05, respectively. RT-PCR showed that the gene expression of vWF in myocardial homogenate was the highest at 1 and 2 weeks after infarction.
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張洪鑫;楊柳;段小軍;李忠;戴剛;;低分子肝素對(duì)VEGF作用下兔骨髓MSCs促增殖能力的影響[J];四川醫(yī)學(xué);2006年04期

2 張同方;萬(wàn)圣云;徐周緯;丁洋;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在血管外科領(lǐng)域中的研究進(jìn)展[J];中國(guó)普通外科雜志;2010年06期

3 何威;楊旭輝;林秋雄;余偉華;吳偉康;;微環(huán)境誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為內(nèi)皮樣細(xì)胞[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2010年08期

4 王文;張金洲;李靜;李軍昌;師長(zhǎng)宏;王宗仁;;芪丹通脈片含藥血清體外誘導(dǎo)MSCs分化為內(nèi)皮細(xì)胞的作用[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2006年11期

5 李立,應(yīng)大君,朱楚洪,糜建紅,王廷華,羊惠君;綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞定向分化的能力[J];中國(guó)臨床康復(fù);2005年10期

6 郭尚春;陳欣;袁霆;張長(zhǎng)青;王金武;;誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞分化[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年02期

7 楊思遠(yuǎn);石應(yīng)康;伍長(zhǎng)學(xué);賃可;吳江;;流動(dòng)切應(yīng)力對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)皮分化后t-PA mRNA表達(dá)的影響[J];中國(guó)胸心血管外科臨床雜志;2007年02期

8 張同方;萬(wàn)圣云;丁洋;孫朝兵;;Galectin-3對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響[J];中國(guó)普通外科雜志;2010年09期

9 楊思遠(yuǎn);石應(yīng)康;周耀黃;賃可;蒙煒;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外可定向誘導(dǎo)為內(nèi)皮細(xì)胞[J];河南醫(yī)學(xué)研究;2006年04期

10 丁洋;萬(wàn)圣云;;體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的研究[J];醫(yī)學(xué)綜述;2008年07期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 郭尚春;張長(zhǎng)青;王金武;袁霆;陳圣寶;曾炳芳;;誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞分化[A];2007年上海市醫(yī)用生物材料研討會(huì)論文匯編[C];2007年

2 賈紅亮;呂海濤;孫凌;張建敏;嚴(yán)文華;朱伯會(huì);曹磊;周萬(wàn)平;丁粵粵;;辛伐他汀對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞釋放微顆粒的影響及其機(jī)制的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十五次全國(guó)兒科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編（上冊(cè)）[C];2010年

3 馬向紅;黃體鋼;楊萬(wàn)松;周麗娟;;四氫生物喋呤對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生一氧化氮和超氧陰離子的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病分會(huì)第八次全國(guó)心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議匯編[C];2004年

4 冷曄;丁祖泉;高艷琴;;剪切力對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞—小腸黏膜下基質(zhì)復(fù)合培養(yǎng)物的影響[A];第八屆全國(guó)生物力學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

5 宋明寶;于學(xué)軍;朱光旭;;鈣離子跨縫隙連接在內(nèi)皮細(xì)胞與平滑肌細(xì)胞間傳遞的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第11次心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2009年

6 武曉靜;黃嵐;趙剛;;內(nèi)皮細(xì)胞表型改變對(duì)平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換及遷移的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第11次心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2009年

7 林云鋒;田衛(wèi)東;陳希哲;閆征斌;喬鞠;李志勇;劉磊;鄭曉輝;湯煒;;大鼠脂肪源性?xún)?nèi)皮細(xì)胞成脂潛能的研究[A];2005'中國(guó)修復(fù)重建外科論壇論文匯編[C];2005年

8 馬剛;林曉曦;金云波;李偉;王維;胡曉潔;許志成;楊川;;嬰幼兒血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定[A];第四屆華東六省一市整形外科學(xué)術(shù)會(huì)議暨2007年浙江省整形、美容學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

9 易龍;陳春燁;金鑫;于斌;舒芙蓉;麋漫天;;人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)方法的改進(jìn)[A];中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)術(shù)會(huì)議暨第七屆會(huì)員代表大會(huì)論文摘要匯編[C];2008年

10 單志新;林秋雄;楊敏;鄧春玉;朱杰寧;麥麗萍;符永恒;林曙光;余細(xì)勇;;血管緊張素Ⅱ通過(guò)AP-1調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞中巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子的表達(dá)[A];第十三次全國(guó)心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 趙煒;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可減輕排異反應(yīng)[N];健康報(bào);2004年

2 吳一福;西京醫(yī)院振蕩法支架種植內(nèi)皮細(xì)胞獲成功[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2008年

3 ;中藥抗血栓機(jī)理及對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的生物醫(yī)學(xué)研究取得佳績(jī)[N];科技日?qǐng)?bào);2000年

4 趙軍;耳毒性藥物對(duì)耳蝸螺旋動(dòng)脈平滑肌和內(nèi)皮細(xì)胞電生理特性的影響項(xiàng)目[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

5 吳一福;PTFE血管材料可攜載VEGF基因轉(zhuǎn)染[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

6 楊茜;美學(xué)者發(fā)現(xiàn)抗癌藥新生物指標(biāo)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

7 衣曉峰 李媛媛;化療可以有另一種方式[N];健康報(bào);2006年

8 紀(jì)英超;Tumsatatin使腫瘤細(xì)胞糧盡援絕[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

9 楊春;傷口暴露好還是濕敷好[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2001年

10 衣曉峰 李媛媛;晚期肺癌化療有了低劑量給藥方式[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 鄭心田;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)分化的實(shí)驗(yàn)研究及差異表達(dá)基因的微陣列分析[D];天津醫(yī)科大學(xué);2006年

2 梁峰;組織工程肝單元構(gòu)建的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2006年

3 景紅;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)為腎臟系膜細(xì)胞樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

4 岳韋名;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞抑制自體移植靜脈內(nèi)膜增生的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2008年

5 趙一麟;自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合脫細(xì)胞血管支架構(gòu)建組織工程血管的研究[D];吉林大學(xué);2006年

6 李海生;低氧促進(jìn)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖和分化及其機(jī)制研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

7 史達(dá);木豆葉聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療股骨頭壞死的實(shí)驗(yàn)與相關(guān)臨床研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2007年

8 顧紹峰;兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為角膜上皮樣細(xì)胞的體外研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2008年

9 張剛;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向動(dòng)靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的誘導(dǎo)及其機(jī)制的基礎(chǔ)研究[D];山東大學(xué);2009年

10 張偉;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)機(jī)制的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2004年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李玉巧;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞促進(jìn)球囊損傷后血管內(nèi)皮修復(fù)[D];南京醫(yī)科大學(xué);2008年

2 謝甲琦;剪應(yīng)力誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞分化的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2009年

3 田少華;剪應(yīng)力和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子對(duì)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2009年

4 黃玲;pEGFP-N_2-VEGF基因轉(zhuǎn)染的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與PLGA材料相容性[D];南昌大學(xué);2009年

5 孟寒;小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向平滑肌樣細(xì)胞分化過(guò)程中myocardin的表達(dá)[D];華中科技大學(xué);2008年

6 馬俊偉;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2009年

7 孫津津;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞分化的體外研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2005年

8 陳書(shū)尚;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療心力衰竭的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2005年

9 劉宏志;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為神經(jīng)前體細(xì)胞的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2005年

10 王艷芳;生物反應(yīng)器內(nèi)培養(yǎng)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞[D];大連理工大學(xué);2006年

，

本文編號(hào)：2445768